Électrophorèse capillaire (EC)

1. CE Instrumentation Setup

1. Allumer l’instrument CE et l’ordinateur. En utilisant le logiciel de l’ordinateur, allumez la source de lumière pour l’analyse des UV pour lui permettre de se réchauffer. Un logiciel a un indicateur lorsque la lampe est prête à l’emploi (lampe icône devient couleur).
2. Faire un fichier de méthodes. Définissez les paramètres importants pour le marquage CE en cours d’exécution. Dans cette analyse, les températures de stockage de la cartouche et échantillon sont 35 ° C. La longueur d’onde de détection UV est 214 nm.
3. Écrire un programme de temps. Le programme se compose généralement des étapes de rinçage (pour nettoyer le tube capillaire avant l’analyse), étapes de l’injection, puis une étape de l’électrophorèse. Pour l’étape de rinçage, effectuer 2 rinçages pendant 1 min à l’aide de 20 lb/po2 de pression. Le premier rinçage est avec NaOH, qui permet de s’assurer que les groupes silanol sur la paroi capillaire sont déprotonés. Le second rinçage est avec exécution buffer (tampon de borate de 0,025 M ici) pour vous assurer que le tube capillaire est gauche équilibrée avec tampon.
4. Pour l’injection, injection sous pression sert à 0,5 lb/po2 pendant 5 s.
5. Pour l’étape de l’électrophorèse, les conditions étaient de séparation voltage : 20 kV, temps : 5 min, une polarité normale. Pour chaque étape, également indiquer quel flacon est l’entrée et quel flacon est la sortie. Enregistrez le fichier de méthodes après que tous les paramètres sont entrés.

2. préparation des normes et des échantillons de soude

1. Faire des solutions mères de 500 ppm de l’aspartame, la caféine et l’acide benzoïque dans l’eau. Faire 50 mL de chacun, à l’aide d’une fiole jaugée.
2. Préparer une solution standard de 150 ppm aspartame, caféine 150 ppm et 100 ppm d’acide benzoïque dans une fiole jaugée de 10 mL.
3. Faites des solutions de caféine standard de 200 ppm, 100 ppm, 150 ppm et 50 ppm à un fioles jaugées de 10 mL.

3. exécuter les exemples sur le marquage CE

1. Placer les flacons contenant des normes ou des échantillons de soude dans le porte-flacon échantillon. Assurez-vous d’écrire quel exemple se trouve dans quel slot. Deux machines à sous ont l’ion borate forme courir le tampon et la solution de rinçage de NaOH 0,1 M.
2. Dans le fichier de la méthode, une entrée qui slot le premier flacon est dans.
3. Acquérir un même essai, en veillant à saisir toutes les informations données le programme de visites.
4. Continuer à acquérir des données, changer le flacon d’entrée pour chaque échantillon. Exécuter la combinaison standard, les 3 concentrations de caféine et un Pepsi et diète Pepsi échantillon.
5. Insérez la cible dans l’instrument et choisir l’instrument approprié.
6. Analyser les données sur l’ordinateur. Calculer des pics et les normes de superposition et les échantillons réels pour aider à identifier les sommets. Faire une courbe d’étalonnage pour les données de la caféine.