Name: Orthotopique aortique transplantation: un modèle de rat pour étudier le développement de la vasculopathie chronique (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-12-04T17:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 32 s
Description: Découvrez la transplantation aortique orthotopique chez le rat pour étudier la vasculopathie chronique. Ce modèle PVG vers CI permet d'analyser la formation de néo-intima et d'explorer les mécanismes du rejet.

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Les auteurs remercient Christiane Pahrmann pour son travail histologique. Financement Sonja Schrepfer a reçu une subvention de recherche de la Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992 / 3 1 et SCHR992/4-1).]

Les rats pesant environ 250-300g sont achetés auprès de Charles River (Sandhofer Weg 7, D-97633 Sulzfeld). Les transplantations sont effectuées en utilisant des rats PVG en tant que donateurs, et les rats ACI en tant que bénéficiaires. Les rats sont logés dans des conditions classiques, nourris standards pour rats et de l&#39;eau ad libidum. Tous les instruments chirurgicaux sont stérilisés avant leur utilisation. La préparation des donateurs: Anesthetize rat avec l&#39;isoflurane (2,5-3%) en utilisant une chambre d&#39;induction. <ol><li> Raser les poils abdominale et thoracique et le lieu du rat sur son dos et placer un masque sur sa bouche et le nez pour maintenir l&#39;anesthésie. </li><li> Désinfectez la zone abdominale et thoracique en utilisant largement Provo-iode, la prochaine utilisation d&#39;éthanol à 80%, répétez cette étape trois fois. </li><li> Vérifiez réflexes pinçant les pattes postérieures pour être sûr que le rat anesthésié est suffisante. </li><li> Être exsangue le rat par l&#39;ouverture de l&#39;abdomen et découper un trou dans l&#39;aorte abdominale. </li><li> Ouvrez soigneusement le thorax à trouver l&#39;aorte thoracique descendante. </li><li> Disséquer l&#39;aorte thoracique de tissus environnants comme la graisse, les nerfs et l&#39;œsophage. </li><li> Retirer un morceau de 1,5 cm de l&#39;aorte en utilisant une couter, sans endommager les tissus de l&#39;aorte. </li><li> Perfuser le greffon aortique fond avec une solution saline stérile à froid et de stocker la greffe à 4 ° C. </li></ol> Destinataire: Anesthetize rat avec l&#39;isoflurane (2,5-3%) en utilisant une chambre d&#39;induction. La température corporelle est maintenue pendant l&#39;intervention chirurgicale. <ol><li> Rasez la zone abdominale et d&#39;appliquer une pommade oculaire pour éviter les yeux de sécher pendant l&#39;anesthésie. </li><li> Placez le rat sur son dos et placer un masque sur sa bouche et le nez pour maintenir l&#39;anesthésie. </li><li> Désinfectez la zone abdominale à l&#39;aide de Provo-iode, la prochaine utilisation d&#39;éthanol à 80%, répétez cette étape trois fois. </li><li> Vérifiez réflexes pinçant les pattes postérieures pour être sûr que le rat anesthésié est suffisante. </li><li> Effectuer une incision abdominale médiane séparant la peau et de muscle en deux étapes pour ouvrir le ventre. </li><li> Placez les intestins dans un gant de poudre de sérum physiologique réchauffé hydratée libre. Pliez le gant autour de l&#39;intestin pour empêcher la perte d&#39;humidité. </li><li> Retirez le tissu adipeux couvrant l&#39;aorte abdominale. </li><li> Disséquer l&#39;aorte sous-rénale sous forme de la région de la bifurcation, attention à ne pas causer des dégâts sur les branches des vaisseaux. </li><li> Si nécessaire branches ligaturer de l&#39;aorte. </li><li> Première utilisation d&#39;une pince de microchirurgie de la part de l&#39;aorte sous-rénale disséqués pour arrêter l&#39;écoulement du sang. </li><li> Ensuite, placez une deuxième pince à proximité de la bifurcation de l&#39;aorte. </li><li> Maintenant que le flux sanguin est arrêté, retirer un court segment de l&#39;aorte. </li><li> Prenez le greffon aortique donateurs, qui a été conservé dans une solution saline stérile à 0,9% sur la glace, le raccourcir à la longueur adéquate et le positionner dans le fossé. </li><li> Connectez l&#39;aorte des donateurs pour l&#39;aorte bénéficiaire, à effectuer des sutures en cours en utilisant 8-0 prolène suture (Ethicon, Norderstedt, Allemagne). Commencez avec le crâne de bout en bout anastomose. </li><li> Lorsque l&#39;extrémité distale à bout anastomose est terminée, ouvrir avec précaution la pince distale. </li><li> Quand il n&#39;y a pas de saignement après l&#39;ouverture de la pince distale, ouvrir avec précaution la pince crânienne. En cas de saignement à la suture, fermer la pince à nouveau, de localiser l&#39;hémorragie et arrêter le saignement en utilisant une maille unique. </li><li> Il devrait y avoir une impulsion visible à l&#39;extrémité distale de l&#39;aorte. </li><li> Suivant déplacer les intestins dans l&#39;abdomen. </li><li> Rincer l&#39;abdomen avec une solution saline stérile préchauffée. </li><li> Fermez la couche musculaire de la paroi abdominale en utilisant 6-0 prolène sutures course (Ethicon, Norderstedt, Allemagne). </li><li> Utilisez 5-0 Prolène (Ethicon, Norderstedt) fonctionnant sutures pour refermer la peau. </li><li> Alors que le rat est encore en anesthésie, injecter 4-5mg/kg carprofène sous-cutanée. </li><li> Pour fournir une analgésie suffisante pour ce type de procédure, métamisol est ajouté à l&#39;eau potable (50mg par 100ml Metamizol) pour des analgésiques pour 3 jours après la transplantation. </li></ol>

<ol><li>Deuse, T., Hoyt, G., Koyanagi, T., Robbins, R. C., Schrepfer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+and+Inhibition+But+Not+Reversion+of+Chronic+Allograft+Vasculopathy+by+FK778%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Prevention and Inhibition But Not Reversion of Chronic Allograft Vasculopathy by FK778.</a> Transplantation. 85, 870-877 (2008).</li>
<li>Mennander, A., Tiisala, S., Halttunen, J., Yilmaz, S., Paavonen, T., Hayry, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+rejection+in+rat+allografts.+An+experimental+model+for+transplant+arteriosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Chronic rejection in rat allografts. An experimental model for transplant arteriosclerosis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 11, 671-680 (1991).</li>
<li>Ono, K., Lindsey, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+technique+of+heart+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Improved technique of heart transplantation in rats.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 57, 225-225 (1969).</li>
<li>Poston, R. S., Billingham, M., Hoyt, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapamycin+reverses+chronic+graft+vascular+disease+in+a+novel+cardiac+allograft+model%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Rapamycin reverses chronic graft vascular disease in a novel cardiac allograft model.</a> Circulation. 100, 67-100 (1999).</li>
<li>Schrepfer, S., Deuse, T., Koch-Nolte, F., Krieger, T., Haddad, M., Schäfer, H., Pelletier, M. P., Robbins, R. C., Reichenspurner, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FK778+in+Experimental+Xenotransplantation%3A+A+Detailed+Analysis+of+Drug+Efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">FK778 in Experimental Xenotransplantation: A Detailed Analysis of Drug Efficacy.</a> J Heart Lung Transplant. 26, 70-77 (2007).</li>
</ol>

Pour plusieurs raisons, nous avons trouvé le modèle orthotopique greffe aortique d&#39;une manière plus précise pour étudier le développement de la TVP par rapport au modèle de transplantation cardiaque hétérotopique: En ce qui concerne la technique chirurgicale, le modèle de greffe aortique incarne une méthode facilement réalisable, nécessitant uniquement l&#39;accomplissement de bout-en-bout anastomose, alors que le modèle de transplantation cardiaque hétérotopique peut être considérée comme un défi plus comple...

<table><tbody><tr><td>Microscope chirurgical (grossissement 25x)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>rasoir</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Provo-Iodine</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>sérum physiologique glacé à 0,9 %</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>sérum physiologique stérile 0,9 % préchauffé</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>pommade ophtalmique</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>gant</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ciseaux microchirurgicaux</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>pinces</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>pinces</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Suture 8-0 (prolène)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Suture 6-0 (prolène)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Suture 5-0 (prolène)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Carprofène</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Métamizole</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Q-tips</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

orthotopique aortique transplantation: un modèle de rat pour étudier le développement de la vasculopathie chronique

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Les modèles de recherche d&#39;un rejet chronique sont indispensables pour étudier les processus pathobiologiques et physiopathologiques pendant le développement de la vasculopathie transplantation (TVP). Le modèle animal couramment utilisé pour les études cardiovasculaires rejet chronique est le modèle de transplantation cardiaque hétérotopique effectuées chez les rongeurs de laboratoire. Ce modèle est largement utilisé dans les expériences depuis Ono et Lindsey (3) publié leur technique. Pour analyser les résultats dans les vaisseaux sanguins, le cœur doit être sectionnée et tous les navires doivent être mesurés. Une autre méthode pour étudier le rejet chronique dans les questionnements cardio-vasculaire est le modèle de greffe aortique (1, 2). Dans le modèle de transplantation orthotopique aortique, l&#39;aorte peut être facilement évaluée histologiquement (2). Le modèle PVG-à-ACI est particulièrement utile pour les études de CAV, puisque rejet aigu vasculaire n&#39;est pas un facteur majeur de confusion et le traitement Cyclosporine A (CsA) n&#39;empêche pas le développement de la CAV, semblable à ce que nous trouvons dans le contexte clinique (4 ). A7-jours période de CsA est nécessaire dans ce modèle afin de prévenir le rejet aigu et d&#39;atteindre à long terme de survie avec le développement de la TVP. Ce modèle peut également être utilisée pour étudier rejet aigu cellulaire et la nécrose des médias dans les modèles xénogéniques (5).

Cette vidéo montre le modèle orthotopique greffe aortique comme un modèle simple pour étudier le développement de la vasculopathie transplantation (TVP) chez les rats.

Orthotopique aortique transplantation: un modèle de rat pour étudier le développement de la vasculopathie chronique

Les modèles de recherche sur le rejet chronique sont essentiels pour étudier les processus pathobiologiques et pathophysiologiques lors du développement du rejet de greffe...

L'objectif général de cette procédure est d'établir un modèle précis et une méthode facilement réalisable pour étudier le développement de la vasculopathie de transplantation. Cela est réalisé en utilisant la combinaison de souche PVG vers une souche CI. La deuxième étape de la procédure consiste à prélever l'aorte du donneur.La troisième étape de la procédure consiste à préparer le receveur. La dernière étape de la procédure consiste à anastomoser l'aorte du donneur à l'aorte du receveur. En fin de compte, des résultats peuvent être obtenus montrant la formation de néointima à l'aide d'une histologie pathologique.Bonjour, je suis Sonya Schwefel, professeure en immunologie des transplantations au laboratoire TS Eye du Centre cardiaque universitaire de Hambourg, en Allemagne. Et moi, c'est Manish Duboff, également du laboratoire TS Eye.Notre laboratoire s'intéresse à l'immunologie de transplantation. Dans cette vidéo, nous vous présenterons le modèle de transplantation aortique orthotopique, un modèle simple et pertinent pour étudier le développement de la vasculopathie de transplantation chez le rat. Nous utilisons cette procédure dans notre laboratoire afin d'explorer le rejet chr

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Nous décrivons une technique dans laquelle une section de l'aorte abdominale d'une souris est transplanté orthotopique juste au-dessous des artères rénales dans un receveur allogène ou syngéniques. Cette technique peut être utile dans les études où la transplantation de grandes artères de taille uniforme est jugée avantageuse.

Transplantation orthotopique aortique chez la souris pour l&#39;étude des maladies vasculaires

Nous décrivons un protocole pour la greffe d’interposition aortique chez la souris. L’objectif du protocole est de fournir un modèle permettant d’étudier les processus pathologiques et les stratégies thérapeutiques pertinents aux réactions allo-immunes dans les artères et aux modifications artérielles qui en résultent et qui contribuent à l’échec de la transplantation d’organe.

Modèle murin de rejet vasculaire allo-induite et Transplant artériosclérose

Insertion du cathéter en polyuréthane dans la lumière aortique et la ligature de l’aorte de suture induisent une hypoxie chronique en raison de l’hypoperfusion de l’adventitiels vasa vasorum. Cet article décrit un nouveau modèle animal d’anévrisme de l’aorte abdominale (AAA) présentant des caractéristiques semblables à celles de AAA chez les humains.

Création d’un modèle de rongeur d’anévrisme de l’aorte abdominale en bloquant adventitiels Vasa Vasorum Perfusion

Ici, nous présentons un protocole de la transplantation aortique hétérotopique chez les souris utilisant la technique de manchette de non-suture dans un modèle murin cervical. Ce modèle peut être utilisé pour étudier la pathologie sous-jacente de la vasculopathie chronique d'allogreffe (CAV) et peut aider à évaluer de nouveaux agents thérapeutiques afin de prévenir sa formation.

Modèle de transplantation aortique cervicale de Murine utilisant une technique modifiée de manchette de non-suture

Nous décrivons un modèle de transplantation abdominale hétérotopique de coeur chez les rats, impliquant des modifications des stratégies actuelles, qui mènent à une approche chirurgicale simplifiée. En outre, nous décrivons un modèle de rejet nouveau par l’injection dans l’oreille des cellules cardiaques vitales de muscle, permettant d’autres analyses immunologiques de greffe chez des rats.

Un modèle immunologique pour la transplantation héterotopique de cellules cardiaques et cardiaques chez les rats

Cet article présente un protocole de transplantation de lambeau ostéocutané hétérotopique partiel chez le rat et ses résultats potentiels dans le suivi à moyen terme.

Modèle de transplantation de membres postérieurs hétérotopiques partiels chez le rat

Ce protocole décrit une méthode simple et efficace pour la transplantation de feuillets valvulaires aortiques sous la capsule rénale afin de permettre l’étude de l’alloréactivité des valves cardiaques.

Un modèle simplifié pour la transplantation valvulaire cardiaque hétérotopique chez les rongeurs

Nous montrons comment établir un modèle murin d’implantation de racine pulmonaire dans l’aorte descendante pour simuler la procédure de Ross. Ce modèle permet l’évaluation à moyen/long terme du remodelage de l’autogreffe pulmonaire dans une position systémique, représentant la base du développement de stratégies thérapeutiques pour favoriser son adaptation.

Un modèle de rongeur de l’opération de Ross: implantation d’une greffe d’artère pulmonaire syngénique dans une position systémique

Le modèle de transplantation rénale orthotopique chez le rat contribue à étudier le mécanisme du rejet de l’allogreffe rénale. Le modèle actuel augmente la survie des receveurs sans interférence avec l’apport sanguin et le reflux veineux du bas du corps en utilisant une anastomose de bout en bout de l’implantation rénale et une méthode « tunnel » de bout en bout de l’anastomose uretère-vessie.

Un modèle de transplantation rénale orthotopique de rat pour le rejet de l’allogreffe rénale

Cette étude démontre une technique de transplantation cardiaque abdominale hétérotopique reproductible chez le rat que les débutants peuvent apprendre et effectuer. De plus, un nouveau modèle de régurgitation aortique chez le rat est généré en effectuant une transplantation cardiaque abdominale hétérotopique et en endommageant la valve aortique du donneur à l’aide d’un fil guide après la récolte.

Transplantation cardiaque abdominale hétérotopique modifiée et nouveau modèle de régurgitation aortique chez le rat

Ce travail présente un modèle animal de fibrose induite par la transition endothéliale à mésenchymateuse, tel qu’il est observé dans les malformations cardiaques congénitales telles que la sténose aortique critique ou le syndrome hypoplasique du cœur gauche, ce qui permet une évaluation histologique détaillée des tissus, l’identification des voies de signalisation régulatrices et le test des options de traitement.

Un modèle de transplantation cardiaque de rat hétérotopique néonatal pour l’étude de la transition endothéliale à mésenchymateuse

Découvrez la transplantation aortique orthotopique chez le rat pour étudier la vasculopathie chronique. Ce modèle PVG vers CI permet d'analyser la formation de néo-intima et d'explorer les mécanismes du rejet.

Orthotopique aortique transplantation: un modèle de rat pour étudier le développement de la vasculopathie chronique

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