Génération de cellules dendritiques dérivées de la moelle osseuse : une méthode pour générer des cellules dendritiques à partir de moelle osseuse de souris
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0 vues • 2:57 min • April 30th, 2023
- Les cellules dendritiques ou DC sont des cellules présentatrices d’antigènes clés qui activent les lymphocytes T. Chez les patients leucémiques, ces cellules expriment mal l’antigène associé à la tumeur et ne parviennent pas à provoquer une réponse immunitaire spécifique à l’antigène. Les cellules dendritiques sont abondantes dans la moelle osseuse. Et par conséquent, la moelle osseuse est le site privilégié pour leur isolement afin d’aider à étudier leur rôle dans le cancer.
Pour obtenir des cellules dendritiques, extrayez la moelle osseuse du fémur ou du tibia d'une souris euthanasiée à l'aide d'une seringue remplie de média pour la rincer. Centrifuger et remettre en suspension la pastille dans un tampon d’ammonium-chlorure-potassium ou ACK pour lyser les érythrocytes. Ajoutez maintenant du milieu de culture pour arrêter la lyse et la centrifugeuse. Remettre la pastille en suspension dans le milieu de culture contenant un antibiotique. Ajoutez le facteur de stimulation des colonies de granulocytes-macrophages ou GM-CSF, et transférez la suspension cellulaire sur une plaque de Petri.
Incuber la plaque pendant la durée souhaitée. Le GM-CSF aide les cellules progénitrices à se dif
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