Isolement de plusieurs types de cellules à partir d’un cerveau de souris par homogénéisation mécanique
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:27 min • July 8th, 2025
Commencez par placer les composants du broyeur de mouchoirs sur de la glace. Cet appareil comprend un mortier et deux pilons de diamètres différents.
Versez un tampon de sel réfrigéré dans le mortier, puis ajoutez du tissu cérébral de souris.
Le tampon maintient l’équilibre osmotique, préservant la structure et la fonction cellulaires.
Broyez le tissu en plusieurs coups doux à l’aide du pilon de plus petit diamètre, qui cisaille mécaniquement le tissu en petits morceaux.
Ensuite, caressez avec le pilon de plus grand diamètre, facilitant la décomposition du tissu en ses cellules composantes.
Transférez le mélange dans un tube et centrifugez.
Retirez le surnageant.
Ajoutez un tampon de sel réfrigéré et un vortex pour briser les amas cellulaires et la myéline.
Ensuite, ajoutez un milieu à gradient de densité et centrifugez.
En raison des différences de forme et de masse, les cellules se déposent dans la couche inférieure, tandis que les débris et la myéline s’accumulent dans la couche supérieure.
Jetez le surnageant.
Ajoutez une solution appropriée pour obtenir une suspension à plusieurs cellules pour une utilisation ultérieure.
Pour l’homogénéisation des tissus, ajoutez 3 millilitres
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques