Isolement de cellules mononucléées à partir du cerveau de souris : une technique de centrifugation à gradient de densité pour isoler les cellules mononucléées résidentes du cerveau
Encyclopédie des expériences JoVE
Recherche sur le cancer
0 vues • 4:11 min • April 30th, 2023
Les cellules mononucléées du cerveau, comprenant les lymphocytes et les monocytes, jouent un rôle crucial dans le maintien de la fonction cérébrale et de l’homéostasie.
Pour isoler ces cellules mononucléaires, il faut d’abord prendre un cerveau de souris fraîchement récolté et imprégné de solution saline.
La perfusion permet d’éliminer le sang et ses composants des vaisseaux sanguins, ce qui permet d’isoler les cellules immunitaires résidentes du cerveau dans les étapes suivantes.
Maintenant, rincez le cerveau avec un produit approprié pour éliminer les globules rouges adhérents. Faites suivre le rinçage d’un hachage pour obtenir de petits morceaux de tissu.
Homogénéiser les morceaux de tissu pour obtenir une suspension de cellules uniques et de fragments cellulaires.
À cette suspension, ajoutez ensuite un média refroidi et un milieu à gradient de densité approprié dans des volumes appropriés pour former un milieu à gradient de faible densité.
Ensuite, ajoutez un volume spécifique d’un support dégradé à haute densité ; le média dégradé à haute densité forme une couche distincte en bas, créant ainsi un dégradé de densité discontinu.
Centrifuger la suspension à grande vitesse et à ba
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques