Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 2:40 min • June 17th, 2025
Commencez par une tranche de tissu cérébral de rat montée sur une lame de verre et immergée dans un tampon.
Le rat souffre de tubulinopathie, une affection causée par des défauts de la tubuline, les éléments constitutifs des microtubules, entraînant leur accumulation et leur perturbation anormales.
Cela affecte également la production de myéline dans le système nerveux central.
Placez la tranche sous un microscope à excitation à deux photons couvert pour une imagerie détaillée.
Hydratez régulièrement la tranche pour maintenir son intégrité.
Réglez le microscope sur un mode d’imagerie sans balayage, une technique sans marquage pour détecter les signaux faibles.
Exposez le tissu à un laser infrarouge pulsé.
Les microtubules émettent de la lumière sous forme de signaux détectables connus sous le nom de signaux de génération de seconde harmonique ou signaux SHG.
Les zones où l’accumulation de microtubules est anormale amplifient ces signaux, augmentant ainsi leur détectabilité.
Appliquez des filtres optiques pour affiner ces signaux.
L’image capturée révèle la densité et les anomalies des microtubules, dans lesquelles une intensité élevée de SHG et un regroupement indiquent des défauts de tubuli
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