Une nouvelle méthode de stabilisation vertébrale pour Produire contusion Traumatisme médullaire

L’objectif global de cette procédure est de générer des lésions de la moelle épinière cohérentes, précises et reproductibles à l’aide d’un nouveau stabilisateur vertébral, qui peut être utilisé avec plusieurs dispositifs LME. Ceci est accompli en disséquant soigneusement le tissu entourant les vertèbres cervicales, en faisant preuve de prudence pour minimiser l’hémorragie. La deuxième étape consiste à placer l’animal dans le dispositif de stabilisation et à stabiliser les vertèbres à l’aide des bras de stabilisation dentelés.

Ensuite, effectuez une laminectomie pour exposer la région ciblée de la moelle épinière. La dernière étape consiste à monter le dispositif de stabilisation en forme de U sur les masses de NYU, l’impacteur et à effectuer une lésion médullaire contusible et cohérente avec le nouveau dispositif de stabilisation. Aujourd’hui, nous allons démontrer l’utilisation de notre dispositif de stabilisation chirurgical unique accompagné de l’impacteur de la moelle épinière de l’Université de New York pour créer des lésions de la moelle épinière cohérentes, reproductibles et propices.

Nous utilisons ce dispositif de stabilisation dans notre laboratoire pour générer des lésions de la moelle épinière ainsi que pour des chirurgies de transplantation et de micro-injection et d’imagerie. Commencez cette procédure en nettoyant la surface chirurgicale avec de l’éthanol à 70 %. Placez un coussin chauffant sur la zone chirurgicale et allumez le coussin chauffant.

Placez ensuite la gaze stérile, les cotons-tiges et les outils chirurgicaux de l’autoclave dans la zone de chirurgie. Après avoir recouvert la surface avec un champ chirurgical stérile, utilisez un stérilisateur à microbilles pour la stérilisation inter-chirurgicale des outils chirurgicaux. Nettoyez également le stabilisateur avec de l’éthanol à 70 % avant et entre les chirurgies.

Maintenant, anesthésiez le rat par injection intrapéritonéale de kétamine xylazine, et confirmez la profondeur de l’anesthésie par un stimulus de pincement des orteils. Appliquez ensuite une pommade protectrice sur les yeux de l’animal pour éviter le dessèchement de la cornée. Après cela, rasez le dos du rat de la région thoracique médiane jusqu’à sa tête.

Retirez ensuite la fourrure à l’aide d’un aspirateur équipé d’un filtre HEPA. Ensuite, appliquez de la bétadine sur la zone rasée comme un gommage chirurgical et nettoyez la zone avec des lingettes à base d’alcool isopropylique à 70 %. Injecter par voie sous-cutanée 0,01 à 0,05 milligramme par kilogramme de buprénorphine et cinq milligrammes par kilogramme de carprofène avant l’intervention chirurgicale.

La buprénorphine doit ensuite être administrée toutes les huit à 12 heures et le carprofène une fois par jour pendant les quatre à sept premiers jours suivant la chirurgie. À l’aide d’une lame de scalpel, effectuez une incision médiane de trois à quatre centimètres sur la peau, de la base de la tête au milieu du thorax. Identifiez ensuite la ligne médiane du fascia et les muscles sous-cutanés antérieurs à la glande en hibernation au bas du cou.

Coupez les trapèzes et d’autres muscles le long de la ligne médiane pour réduire l’hémorragie. Trouvez le tissu adipeux sous-jacent aux muscles sur la ligne médiane. Coupez les muscles paraépineux de manière coddulante.

Par la suite, séparez les couches musculaires à l’aide d’un petit écarteur de tissu jusqu’à ce que le niveau de l’apophyse épineuse thoracique T deux soit atteint. Ensuite, coupez le muscle connecté à l’apophyse épineuse T deux et utilisez cette structure comme repère anatomique. Ensuite, retirez l’extrémité cartilagineuse de l’apophyse épineuse T deux pour améliorer la visibilité des vertèbres cervicales.

Séparez les muscles paraspinaux latéralement des apophyses épineuses et laminez, cependant, épargnez le muscle recouvrant la lame C3 pour éviter les saignements. Ensuite, coupez les muscles de la lame latéralement vers les facettes des deux côtés de la colonne vertébrale. Une fois les lamelles vertébrales exposées, placez l’animal dans le canal en forme de U du stabilisateur.

Localisez la vertèbre C cinq en comptant les apophyses épineuses depuis le point de repère T deux jusqu’à T un, C sept, C six et enfin C cinq. Dans cette procédure, positionnez les deux bras en acier inoxydable du stabilisateur pour suspendre l’animal en plaçant les bords dentelés des bras sous les facettes latérales des cinq à six vertèbres C. Après avoir fixé les bras avec les vertèbres en place, ajustez l’appareil de stabilisation pour vous assurer que la colonne vertébrale est nivelée et centrée.

Enfin, verrouillez les bras en y serrant les vis à oreilles du stabilisateur. Ensuite, coupez les ligaments entre les processus spinaux et les lames en C quatre à cinq et C cinq à six. Afin de localiser le bord de la lame C cinq à l’aide d’un micro ron, coupez la moitié de la lame sur la lame C cinq droite pour SCI.

Après la laminectomie, transportez l’animal avec le stabilisateur de la table chirurgicale au dispositif de blessure. Fixez l’animal avec le stabilisateur sur un support qui est fixé au dispositif de blessure. Alignez précisément le piston avec la cible de la moelle épinière à l’aide d’un micromanipulateur latéral sous un fort grossissement.

Localisez les zones d’entrée de la racine dorsale C cinq et C six sur la surface exposée de la moelle épinière dorsale sans otomie dure. Dirigez le piston vers le milieu des deux DRE Z identifiés et à mi-chemin entre la ligne médiane et le bord latéral de la moelle épinière. À l’aide d’un dispositif d’impact NYU masses avec une pointe de 2,5 millimètres de diamètre, produisez une contusion HEMI C cinq par une tige de 10 grammes à une hauteur de chute de 12,5 millimètres.

Vérifiez visuellement la blessure par l’ecchymose sur la moelle épinière et vérifiez les paramètres de blessure fournis par le logiciel NYU. Suturez ensuite les muscles et les tissus mous et fermez l’incision cutanée avec des agrafes chirurgicales. Appliquez une pommade antibactérienne sur le site chirurgical et administrez 5,0 millilitres de solution saline stérile à 0,9 % par voie sous-cutanée à l’animal pour l’hydratation.

Ensuite, placez l’animal dans un environnement à chaleur contrôlée avec de la nourriture humide fournie sur la litière et une bouteille d’eau avec un long bec pour un accès facile placée sur le sol de la cage. Fournir des soins pour assurer une récupération adéquate avant de remettre l’animal dans la cage familiale. Cette figure illustre une lecture d’un très bon impact avec des mesures de données de pourcentage d’erreur pour l’impact, de vitesse de la tige, de hauteur initiale et de temps de démarrage, toutes les valeurs se situent bien dans la fenêtre d’erreur acceptable.

À l’inverse, ce panneau présente des données produites par un impact inapproprié causé par une stabilisation inadéquate de la colonne vertébrale et l’erreur lors de la mise à zéro de la tige de l’élément de frappe sur la surface de la moelle épinière. Avant de régler la hauteur de la tige d’impact, ce dispositif de stabilisation immobilise la moelle épinière. Pourtant, un grand avantage de cet appareil est la mobilité qu’il offre pour transporter l’animal stabilisé d’une table chirurgicale à une station de micro-injection de transplantation à un appareil d’impact ou à une station d’imagerie.

La stabilisation des processus vertébraux latéraux permet de stabiliser les vertèbres spécifiques d’intérêt, ce qui permet des lésions de la moelle épinière plus reproductibles. La cohérence et la reproductibilité sont des facteurs cruciaux pour les modèles expérimentaux de lésions de la moelle épinière afin de minimiser la variabilité et d’optimiser la clarification des effets de la thérapie, ce qui est important pour l’application vers l’application clinique et la recherche d’un remède pour les lésions de la moelle épinière.