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JoVE Science Education General Laboratory Techniques
An Introduction to Working in the Hood

1.8: Introduction au travail sous la hotte

157,069 Views
07:07 min
October 10, 2012
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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

Les hottes sont une classe commune d’instruments, qui agit comme une enceinte protectrice pour beaucoup de types d’expériences de laboratoire. Elles servent à protéger les échantillons expérimentaux de leur environnement, ainsi qu’à protéger les chercheurs d’échantillons dangereux ou infectieux. « La hotte » est un terme qui peut inclure les bancs avec un écoulement laminaire, les hottes à fumées (sorbonnes), ainsi que les hottes à culture de tissus ou les postes à sécurité biologique. Toutes les hottes fonctionnent sur la base du principe de l’écoulement laminaire et ont les mêmes composants de base, incluant une fenêtre à guillotine et une barrière protectrice en verre, une surface de travail non-poreuse, une entrée et une sortie d’air. Le type de hotte utilisé doit être choisi sur base de l’expérience. Par exemple, les hottes à fumées (sorbonnes) protègent typiquement l’utilisateur mais pas l’environnement expérimental. Par contre, les bancs à écoulement laminaire protègent l’expérience mais pas l’utilisateur, et donc peuvent, mais ne sont pas utilisés pour, garder les échantillons expérimentaux stériles, lorsqu’ils ne présentent pas de menace. Si l’utilisateur et l’expérience doivent être protégés tous les deux, une hotte à culture de tissus ou un poste à sécurité biologique peuvent être utilisés. Les hottes à culture de tissus maintiennent la stérilité des lignées de cellules, tandis que les postes de sécurité biologique fournissent une protection lors de procédures utilisant des agents infectieux. Une fois que l’unité appropriée est choisie pour une expérience, l’utilisateur devrait porter l’équipement de protection approprié, et suivre toutes les procédures de sécurité nécessaires.

Cette vidéo explique le principe de l’écoulement laminaire, comment la hotte est utilisée et discute les différents types de procédures qui devraient être réalisées dans chaque type de hotte.

Procedure

Les hottes sont une classe courante d’instrument, qui se comportent comme une enceinte protectrice pour plusieurs types d’expériences au laboratoire.

En plus de protéger les échantillons expérimentaux de l’environnement, les hottes protègent aussi le chercheur des échantillons dangereux ou infectieux.

« La hotte » est un terme qui peut inclure les bancs à flux laminaires, les hottes à fumées, les hottes à culture de tissus ou les postes de sécurité microbiologique. Choisissez toujours la bonne pour vos expériences.

La plupart des hottes utilisent le principe de base de l’écoulement laminaire, qui est l’écoulement fuselé et continu d’air en couches parallèles.

En opposition à l’écoulement turbulent, l’écoulement laminaire autorise l’air à progresser autour des objets à l’intérieur de la hotte de manière à ce que la stérilité de l’environnement de travail soit maintenue, et que les fumées nocives puissent être contenues.

Les hottes peuvent être construites pour avoir un écoulement laminaire soit horizontal soit vertical.

Dans les hottes à flux horizontal, l’air entrant est filtré, et l’air se propage alors horizontalement depuis l’arrière de l’unité, vers l’avant.

Dans les hottes à flux vertical, l’air entrant est filtré, mais l’air est ici tiré verticalement du haut vers le bas, et l’échappement est à nouveau filtré lorsqu’il sort. Ces unités maintiennent en général la stérilité de l’environnement de travail.

Toutes les hottes ont les mêmes composants de base. Un composant principal est la fenêtre à guillotine. C’est une barrière protectrice coulissante en verre qui joue le rôle de bouclier contre les éclaboussures et fumées. Elle peut être orientée horizontalement ou, pour certaines unités, verticalement.

La surface de travail à l’intérieur de la hotte est généralement un matériau non-poreux tel que de l’acier inoxydable.

Toutes les unités ont aussi une entrée d’air, où l’air est amené à l’intérieur de l’unité, et une sortie. La localisation de l’entrée et de la sortie varie, en fonction du type et modèle exact de hotte.

Adjacent à la vitre guillotine, un panneau est souvent présent avec des contrôles pour ajuster l’air entrant, les lumières et d’autres caractéristiques. Quelques modèles sont équipés d’une lampe UV, qui peut être utilisée pour désinfecter l’unité lorsqu’elle n’est pas utilisée.

Ne laissez jamais la lampe UV allumée pendant que quelqu’un est dans le labo ou utilise la hotte ! Cela peut provoquer des dommages à la rétine, des brûlures de la peau et accroitre le risque de cancer.

Après le choix du type de hotte approprié pour votre expérience, assurez-vous d’utiliser l’équipement de protection individuel ou EPI approprié. Mettez des gants, lunettes et un masque si nécessaire.

Si un environnement aseptisé est requis pour l’expérience, comme dans une hotte pour la culture de tissus, commencez par asperger la surface de la hotte avec de l’éthanol à 70%. Ceci désinfecte la surface, et s’évapore rapidement ne laissant pas de résidus.

Aussi, assurez-vous d’asperger chaque objet avec l’éthanol à 70%, lorsque vous les placez dans la hotte, pour maintenir un environnement propre.

Lorsque vous placez des objets dans la hotte, gardez le flux d’air à l’esprit. Ne bloquez pas le flux d’air à l’arrière et laissez 15 cm de libre sur le devant de la hotte.

Assurez-vous d’utiliser la hauteur appropriée de guillotine pendant l’expérience pour maintenir l’écoulement d’air laminaire optimal. La plupart des hottes sont équipées d’une alarme qui se déclenchera si la hauteur de la vitre n’est pas optimale.

Lorsque la hotte n’est pas utilisée, souvenez-vous de toujours fermer la vitre, pour économiser l’énergie précieuse du laboratoire, et les ressources institutionnelles.

Maintenant que nous avons vu comment travailler sous hotte, passons en revue quelques types différents de hotte et les nombreuses procédures qui peuvent être réalisées sous celles-ci.

Un type spécifique de hotte est la hotte à fumées (ou sorbonne). Comme son nom l’indique, ce type d’unité devrait être utilisé pour les procédures produisant des fumées toxiques ou impliquant des réactifs chimiques qui émettent des fumées toxiques. La hotte à fumées protège l’utilisateur, mais pas l’environnement expérimental, donc des échantillons biologiques ne sont PAS protégés dans ces unités et la stérilité n’est PAS maintenue.

Une hotte à fumées devrait être utilisée pour la fixation, ainsi que pour le traitement de tissus, et les techniques d’histologie. Ces procédures impliquent typiquement des toxiques ainsi que des produits chimiques corrosifs.

Un autre type de hotte est le banc à écoulement laminaire. Cette unité protège l’expérience, mais pas nécessairement l’utilisateur. Ces unités peuvent utiliser un flux horizontal ou vertical, et peuvent être utilisées pour des expériences de BSL1 sans danger biologique connu, comme la culture de cellules sans risque d’exposition à des agents pathogènes.

Souvent, les dissections sont réalisées sous banc à écoulement laminaire, lorsque la sécurité de l’utilisateur n’est pas concernée mais que la stérilité des tissus disséqués est importante.

Les postes de sécurité microbiologique ou les hottes pour la culture de tissus protègent les deux, l’utilisateur et l’expérience. Comme vous l’avez déjà deviné, la culture de tissus est typiquement réalisée sous hotte pour la culture de tissus. Ces unités maintiennent la stérilité de l’espace de travail expérimental ; tout l’air est filtré par un filtre à particules à haute efficacité, ou filtre HEPA, qu’il entre ou sorte de la zone.

Beaucoup de laboratoires de recherche biomédicale ont des hottes pour la culture de tissus qui sont équipées avec un système d’aspiration par le vide pour aspirer le milieu de culture tissulaire.

Il y a beaucoup de types de postes de sécurité biologique et de hottes pour la culture de tissus ; regardez quel classement BSL est votre hotte avant d’y commencer une nouvelle expérience.

Vous venez de regarder l’introduction de JoVE sur le travail sous hotte. Dans cette vidéo, nous avons parlé du principe sous-jacent au fonctionnement d’une hotte, l’écoulement laminaire, les composants d’une hotte typique, comment travailler à l’intérieur de l’instrument et différents types de hotte.

Merci de nous avoir regardé, et n’oubliez pas de fermer la fenêtre à guillotine !!

Transcript

Les capots sont une classe courante d’instruments, qui servent d’enceinte de protection pour divers types d’expériences de laboratoire.

En plus de protéger les échantillons expérimentaux de l’environnement, les cagoules protègent également le chercheur contre les échantillons dangereux ou infectieux.

 ? Le capot ? est un terme qui peut inclure les bancs à flux laminaire, les hottes et les hottes de culture tissulaire ou les enceintes de biosécurité. Choisissez toujours le bon pour vos expériences.

La plupart des hottes fonctionnent selon le principe de base de l’écoulement laminaire, qui est l’écoulement d’air rationalisé et ininterrompu en couches parallèles.

Contrairement à l’écoulement turbulent, l’écoulement laminaire permet à l’air de circuler autour des objets à l’intérieur de la hotte, de sorte que la stérilité de l’environnement de travail est maintenue et que les vapeurs chimiques nocives peuvent être contenues.

Les hottes peuvent être conçues pour avoir un flux laminaire horizontal ou vertical.

Dans les hottes à flux horizontal, l’admission d’air est filtrée, puis l’air circule horizontalement de l’arrière de l’unité, vers l’avant de l’unité.

Dans les hottes à flux vertical, l’admission est filtrée, mais l’air est ensuite aspiré verticalement loin de l’utilisateur, et l’échappement est à nouveau filtré à sa sortie. Ces unités maintiennent généralement la stérilité de l’environnement de travail.

Toutes les hottes ont les mêmes composants de base. L’un des composants principaux est le châssis de la fenêtre. Il s’agit d’une barrière de protection coulissante en verre qui agit comme un bouclier contre les éclaboussures et les fumées. Il peut être orienté horizontalement ou, pour certaines unités, verticalement.

La surface de travail à l’intérieur de la hotte est généralement un matériau non poreux tel que l’acier inoxydable.

Toutes les unités ont également une prise d’air, où l’air est amené dans l’unité, et une évacuation. L’emplacement de l’admission et de l’échappement varie en fonction du type et du modèle exacts de capot.

À côté du châssis, on trouve souvent un panneau avec des commandes pour régler l’entrée d’air, les lumières du capot et d’autres caractéristiques. Certains modèles sont équipés d’une lumière UV, qui peut être utilisée pour désinfecter l’appareil lorsqu’il n’est pas utilisé.

Ne laissez jamais l’UV allumé pendant que quelqu’un est dans le laboratoire ou utilise la cagoule ! Cela peut causer des lésions de la rétine, des brûlures de la peau et un risque accru de cancer.

Après avoir choisi le bon type de cagoule pour votre expérience, assurez-vous ensuite d’utiliser l’équipement de protection individuelle approprié ou ; EPI. Mettez des gants, des lunettes de protection et un masque si nécessaire.

Si un environnement aseptique est requis pour l’expérience, par exemple dans une hotte de culture tissulaire, commencez par pulvériser la surface de la hotte avec de l’éthanol à 70 %. Cela désinfecte la surface et s’évapore rapidement sans laisser de résidus.

Assurez-vous également de vaporiser chaque objet avec de l’éthanol à 70 %, car il est placé dans la hotte, pour maintenir un environnement propre.

Lorsque vous placez des objets dans la hotte, gardez à l’esprit le flux d’air. Ne bloquez pas la circulation de l’air à l’arrière et laissez 6 pouces dégagés devant le capot.

Assurez-vous d’utiliser la hauteur de châssis appropriée pendant l’expérience pour maintenir un flux d’air laminaire optimal. La plupart des hottes sont équipées d’une alarme qui se déclenchera si la hauteur du vantail n’est pas optimale.

Lorsque la hotte n’est pas utilisée, n’oubliez jamais de fermer le châssis, afin d’économiser la précieuse énergie du laboratoire et les ressources institutionnelles.

Maintenant que nous avons vu comment travailler à l’intérieur d’une hotte, passons en revue certains différents types de capots et les nombreuses procédures qui peuvent être effectuées dans chaque type de capot.

Un type spécifique de hotte est la hotte. Comme son nom l’indique, ce type d’unité doit être utilisé pour les procédures produisant des fumées toxiques ou impliquant des réactifs chimiques qui dégagent des fumées toxiques. Les hottes protègent l’utilisateur, mais pas l’environnement expérimental, de sorte que les échantillons biologiques ne sont PAS protégés dans ces unités et que la stérilité n’est PAS maintenue.

Une hotte doit être utilisée pour la fixation, ainsi que pour le traitement des tissus et les techniques d’histologie. Ces procédures impliquent généralement des produits chimiques toxiques et corrosifs.

Un autre type de hotte est le banc à flux laminaire. Cette unité protège l’expérience, mais pas nécessairement l’utilisateur. Ces unités peuvent utiliser un écoulement horizontal ou vertical, et peuvent être utilisées pour des expériences BSL1 sans risque biologique connu, comme la culture cellulaire sans risque d’exposition à des agents pathogènes.

Souvent, les dissections sont effectuées dans un banc à flux laminaire, lorsque la sécurité de l’utilisateur n’est pas une préoccupation mais que la stérilité des tissus de l’échantillon est importante.

Des enceintes de biosécurité ou des hottes de culture tissulaire protègent à la fois l’utilisateur et l’expérience. Comme vous l’avez peut-être déjà deviné, la culture tissulaire est généralement effectuée dans la hotte de culture tissulaire. Ces unités maintiennent la stérilité de l’espace de travail expérimental ; tout l’air est à haute efficacité Les particules sont filtrées, ou HEPA, lorsqu’elles entrent et sortent de l’armoire.

De nombreux laboratoires de recherche biomédicale disposent de capots de culture tissulaire équipés d’un système d’aspiration sous vide pour l’aspiration des milieux de culture tissulaire.

Il existe différents types d’enceintes de biosécurité et de hottes de culture tissulaire ; vérifiez l’indice BSL de votre capot avant de commencer une nouvelle expérience.

Vous venez de regarder l’introduction de JoVE au travail dans le capot.

Dans cette vidéo, nous avons parlé du principe de fonctionnement d’un pare-soleil, ou flux laminaire, des composants d’un pare-soleil typique, de la façon de fonctionner à l’intérieur de l’instrument et des différents types de pare-soleil.

Merci d’avoir regardé, et n’oubliez pas de fermer votre ceinture !

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Hotte expériences de laboratoire enceinte de protection échantillons dangereux flux laminaire hottes hotte de culture tissulaire enceintes de biosécurité stérilité fumées chimiques nocives hottes à flux horizontal hottes à flux vertical châssis de fenêtre surface de travail

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