Introduction au travail sous la hotte
Les hottes sont une classe courante d’instrument, qui se comportent comme une enceinte protectrice pour plusieurs types d’expériences au laboratoire.
En plus de protéger les échantillons expérimentaux de l’environnement, les hottes protègent aussi le chercheur des échantillons dangereux ou infectieux.
« La hotte » est un terme qui peut inclure les bancs à flux laminaires, les hottes à fumées, les hottes à culture de tissus ou les postes de sécurité microbiologique. Choisissez toujours la bonne pour vos expériences.
La plupart des hottes utilisent le principe de base de l’écoulement laminaire, qui est l’écoulement fuselé et continu d’air en couches parallèles.
En opposition à l’écoulement turbulent, l’écoulement laminaire autorise l’air à progresser autour des objets à l’intérieur de la hotte de manière à ce que la stérilité de l’environnement de travail soit maintenue, et que les fumées nocives puissent être contenues.
Les hottes peuvent être construites pour avoir un écoulement laminaire soit horizontal soit vertical.
Dans les hottes à flux horizontal, l’air entrant est filtré, et l’air se propage alors horizontalement depuis l’arrière de l’unité, vers l’avant.
Dans les hottes à flux vertical, l’air entrant est filtré, mais l’air est ici tiré verticalement du haut vers le bas, et l’échappement est à nouveau filtré lorsqu’il sort. Ces unités maintiennent en général la stérilité de l’environnement de travail.
Toutes les hottes ont les mêmes composants de base. Un composant principal est la fenêtre à guillotine. C’est une barrière protectrice coulissante en verre qui joue le rôle de bouclier contre les éclaboussures et fumées. Elle peut être orientée horizontalement ou, pour certaines unités, verticalement.
La surface de travail à l’intérieur de la hotte est généralement un matériau non-poreux tel que de l’acier inoxydable.
Toutes les unités ont aussi une entrée d’air, où l’air est amené à l’intérieur de l’unité, et une sortie. La localisation de l’entrée et de la sortie varie, en fonction du type et modèle exact de hotte.
Adjacent à la vitre guillotine, un panneau est souvent présent avec des contrôles pour ajuster l’air entrant, les lumières et d’autres caractéristiques. Quelques modèles sont équipés d’une lampe UV, qui peut être utilisée pour désinfecter l’unité lorsqu’elle n’est pas utilisée.
Ne laissez jamais la lampe UV allumée pendant que quelqu’un est dans le labo ou utilise la hotte ! Cela peut provoquer des dommages à la rétine, des brûlures de la peau et accroitre le risque de cancer.
Après le choix du type de hotte approprié pour votre expérience, assurez-vous d’utiliser l’équipement de protection individuel ou EPI approprié. Mettez des gants, lunettes et un masque si nécessaire.
Si un environnement aseptisé est requis pour l’expérience, comme dans une hotte pour la culture de tissus, commencez par asperger la surface de la hotte avec de l’éthanol à 70%. Ceci désinfecte la surface, et s’évapore rapidement ne laissant pas de résidus.
Aussi, assurez-vous d’asperger chaque objet avec l’éthanol à 70%, lorsque vous les placez dans la hotte, pour maintenir un environnement propre.
Lorsque vous placez des objets dans la hotte, gardez le flux d’air à l’esprit. Ne bloquez pas le flux d’air à l’arrière et laissez 15 cm de libre sur le devant de la hotte.
Assurez-vous d’utiliser la hauteur appropriée de guillotine pendant l’expérience pour maintenir l’écoulement d’air laminaire optimal. La plupart des hottes sont équipées d’une alarme qui se déclenchera si la hauteur de la vitre n’est pas optimale.
Lorsque la hotte n’est pas utilisée, souvenez-vous de toujours fermer la vitre, pour économiser l’énergie précieuse du laboratoire, et les ressources institutionnelles.
Maintenant que nous avons vu comment travailler sous hotte, passons en revue quelques types différents de hotte et les nombreuses procédures qui peuvent être réalisées sous celles-ci.
Un type spécifique de hotte est la hotte à fumées (ou sorbonne). Comme son nom l’indique, ce type d’unité devrait être utilisé pour les procédures produisant des fumées toxiques ou impliquant des réactifs chimiques qui émettent des fumées toxiques. La hotte à fumées protège l’utilisateur, mais pas l’environnement expérimental, donc des échantillons biologiques ne sont PAS protégés dans ces unités et la stérilité n’est PAS maintenue.
Une hotte à fumées devrait être utilisée pour la fixation, ainsi que pour le traitement de tissus, et les techniques d’histologie. Ces procédures impliquent typiquement des toxiques ainsi que des produits chimiques corrosifs.
Un autre type de hotte est le banc à écoulement laminaire. Cette unité protège l’expérience, mais pas nécessairement l’utilisateur. Ces unités peuvent utiliser un flux horizontal ou vertical, et peuvent être utilisées pour des expériences de BSL1 sans danger biologique connu, comme la culture de cellules sans risque d’exposition à des agents pathogènes.
Souvent, les dissections sont réalisées sous banc à écoulement laminaire, lorsque la sécurité de l’utilisateur n’est pas concernée mais que la stérilité des tissus disséqués est importante.
Les postes de sécurité microbiologique ou les hottes pour la culture de tissus protègent les deux, l’utilisateur et l’expérience. Comme vous l’avez déjà deviné, la culture de tissus est typiquement réalisée sous hotte pour la culture de tissus. Ces unités maintiennent la stérilité de l’espace de travail expérimental ; tout l’air est filtré par un filtre à particules à haute efficacité, ou filtre HEPA, qu’il entre ou sorte de la zone.
Beaucoup de laboratoires de recherche biomédicale ont des hottes pour la culture de tissus qui sont équipées avec un système d’aspiration par le vide pour aspirer le milieu de culture tissulaire.
Il y a beaucoup de types de postes de sécurité biologique et de hottes pour la culture de tissus ; regardez quel classement BSL est votre hotte avant d’y commencer une nouvelle expérience.
Vous venez de regarder l’introduction de JoVE sur le travail sous hotte. Dans cette vidéo, nous avons parlé du principe sous-jacent au fonctionnement d’une hotte, l’écoulement laminaire, les composants d’une hotte typique, comment travailler à l’intérieur de l’instrument et différents types de hotte.
Merci de nous avoir regardé, et n’oubliez pas de fermer la fenêtre à guillotine !!
Les hottes sont une classe commune d’instruments, qui agit comme une enceinte protectrice pour beaucoup de types d’expériences de laboratoire. Elles s…
Les hottes sont une classe courante d’instrument, qui se comportent comme une enceinte protectrice pour plusieurs types d’expériences au laboratoire.
En plus de protéger les échantillons expérimentaux de l’environnement, les hottes protègent aussi le chercheur des échantillons dangereux ou infectieux.
« La hotte » est un terme qui peut inclure les bancs à flux laminaires, les hottes à fumées, les hottes à culture de tissus ou les postes de sécurité microbiologique. Choisissez toujours la bonne pour vos expériences.
La plupart des hottes utilisent le principe de base de l’écoulement laminaire, qui est l’écoulement fuselé et continu d’air en couches parallèles.
En opposition à l’écoulement turbulent, l’écoulement laminaire autorise l’air à progresser autour des objets à l’intérieur de la hotte de manière à ce que la stérilité de l’environnement de travail soit maintenue, et que les fumées nocives puissent être contenues.
Les hottes peuvent être construites pour avoir un écoulement laminaire soit horizontal soit vertical.
Dans les hottes à flux horizontal, l’air entrant est filtré, et l’air se propage alors horizontalement depuis l’arrière de l’unité, vers l’avant.
Dans les hottes à flux vertical, l’air entrant est filtré, mais l’air est ici tiré verticalement du haut vers le bas, et l’échappement est à nouveau filtré lorsqu’il sort. Ces unités maintiennent en général la stérilité de l’environnement de travail.
Toutes les hottes ont les mêmes composants de base. Un composant principal est la fenêtre à guillotine. C’est une barrière protectrice coulissante en verre qui joue le rôle de bouclier contre les éclaboussures et fumées. Elle peut être orientée horizontalement ou, pour certaines unités, verticalement.
La surface de travail à l’intérieur de la hotte est généralement un matériau non-poreux tel que de l’acier inoxydable.
Toutes les unités ont aussi une entrée d’air, où l’air est amené à l’intérieur de l’unité, et une sortie. La localisation de l’entrée et de la sortie varie, en fonction du type et modèle exact de hotte.
Adjacent à la vitre guillotine, un panneau est souvent présent avec des contrôles pour ajuster l’air entrant, les lumières et d’autres caractéristiques. Quelques modèles sont équipés d’une lampe UV, qui peut être utilisée pour désinfecter l’unité lorsqu’elle n’est pas utilisée.
Ne laissez jamais la lampe UV allumée pendant que quelqu’un est dans le labo ou utilise la hotte ! Cela peut provoquer des dommages à la rétine, des brûlures de la peau et accroitre le risque de cancer.
Après le choix du type de hotte approprié pour votre expérience, assurez-vous d’utiliser l’équipement de protection individuel ou EPI approprié. Mettez des gants, lunettes et un masque si nécessaire.
Si un environnement aseptisé est requis pour l’expérience, comme dans une hotte pour la culture de tissus, commencez par asperger la surface de la hotte avec de l’éthanol à 70%. Ceci désinfecte la surface, et s’évapore rapidement ne laissant pas de résidus.
Aussi, assurez-vous d’asperger chaque objet avec l’éthanol à 70%, lorsque vous les placez dans la hotte, pour maintenir un environnement propre.
Lorsque vous placez des objets dans la hotte, gardez le flux d’air à l’esprit. Ne bloquez pas le flux d’air à l’arrière et laissez 15 cm de libre sur le devant de la hotte.
Assurez-vous d’utiliser la hauteur appropriée de guillotine pendant l’expérience pour maintenir l’écoulement d’air laminaire optimal. La plupart des hottes sont équipées d’une alarme qui se déclenchera si la hauteur de la vitre n’est pas optimale.
Lorsque la hotte n’est pas utilisée, souvenez-vous de toujours fermer la vitre, pour économiser l’énergie précieuse du laboratoire, et les ressources institutionnelles.
Maintenant que nous avons vu comment travailler sous hotte, passons en revue quelques types différents de hotte et les nombreuses procédures qui peuvent être réalisées sous celles-ci.
Un type spécifique de hotte est la hotte à fumées (ou sorbonne). Comme son nom l’indique, ce type d’unité devrait être utilisé pour les procédures produisant des fumées toxiques ou impliquant des réactifs chimiques qui émettent des fumées toxiques. La hotte à fumées protège l’utilisateur, mais pas l’environnement expérimental, donc des échantillons biologiques ne sont PAS protégés dans ces unités et la stérilité n’est PAS maintenue.
Une hotte à fumées devrait être utilisée pour la fixation, ainsi que pour le traitement de tissus, et les techniques d’histologie. Ces procédures impliquent typiquement des toxiques ainsi que des produits chimiques corrosifs.
Un autre type de hotte est le banc à écoulement laminaire. Cette unité protège l’expérience, mais pas nécessairement l’utilisateur. Ces unités peuvent utiliser un flux horizontal ou vertical, et peuvent être utilisées pour des expériences de BSL1 sans danger biologique connu, comme la culture de cellules sans risque d’exposition à des agents pathogènes.
Souvent, les dissections sont réalisées sous banc à écoulement laminaire, lorsque la sécurité de l’utilisateur n’est pas concernée mais que la stérilité des tissus disséqués est importante.
Les postes de sécurité microbiologique ou les hottes pour la culture de tissus protègent les deux, l’utilisateur et l’expérience. Comme vous l’avez déjà deviné, la culture de tissus est typiquement réalisée sous hotte pour la culture de tissus. Ces unités maintiennent la stérilité de l’espace de travail expérimental ; tout l’air est filtré par un filtre à particules à haute efficacité, ou filtre HEPA, qu’il entre ou sorte de la zone.
Beaucoup de laboratoires de recherche biomédicale ont des hottes pour la culture de tissus qui sont équipées avec un système d’aspiration par le vide pour aspirer le milieu de culture tissulaire.
Il y a beaucoup de types de postes de sécurité biologique et de hottes pour la culture de tissus ; regardez quel classement BSL est votre hotte avant d’y commencer une nouvelle expérience.
Vous venez de regarder l’introduction de JoVE sur le travail sous hotte. Dans cette vidéo, nous avons parlé du principe sous-jacent au fonctionnement d’une hotte, l’écoulement laminaire, les composants d’une hotte typique, comment travailler à l’intérieur de l’instrument et différents types de hotte.
Merci de nous avoir regardé, et n’oubliez pas de fermer la fenêtre à guillotine !!
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En plus de protéger les échantillons expérimentaux de l’environnement, les hottes protègent aussi le chercheur des échantillons dangereux ou infectieux.
« La hotte » est un terme qui peut inclure les bancs à flux laminaires, les hottes à fumées, les hottes à culture de tissus ou les postes de sécurité microbiologique. Choisissez toujours la bonne pour vos expériences.
La plupart des hottes utilisent le principe de base de l’écoulement laminaire, qui est l’écoulement fuselé et continu d’air en couches parallèles.
En opposition à l’écoulement turbulent, l’écoulement laminaire autorise l’air à progresser autour des objets à l’intérieur de la hotte de manière à ce que la stérilité de l’environnement de travail soit maintenue, et que les fumées nocives puissent être contenues.
Les hottes peuvent être construites pour avoir un écoulement laminaire soit horizontal soit vertical.
Dans les hottes à flux horizontal, l’air entrant est filtré, et l’air se propage alors horizontalement depuis l’arrière de l’unité, vers l’avant.
Dans les hottes à flux vertical, l’air entrant est filtré, mais l’air est ici tiré verticalement du haut vers le bas, et l’échappement est à nouveau filtré lorsqu’il sort. Ces unités maintiennent en général la stérilité de l’environnement de travail.
Toutes les hottes ont les mêmes composants de base. Un composant principal est la fenêtre à guillotine. C’est une barrière protectrice coulissante en verre qui joue le rôle de bouclier contre les éclaboussures et fumées. Elle peut être orientée horizontalement ou, pour certaines unités, verticalement.
La surface de travail à l’intérieur de la hotte est généralement un matériau non-poreux tel que de l’acier inoxydable.
Toutes les unités ont aussi une entrée d’air, où l’air est amené à l’intérieur de l’unité, et une sortie. La localisation de l’entrée et de la sortie varie, en fonction du type et modèle exact de hotte.
Adjacent à la vitre guillotine, un panneau est souvent présent avec des contrôles pour ajuster l’air entrant, les lumières et d’autres caractéristiques. Quelques modèles sont équipés d’une lampe UV, qui peut être utilisée pour désinfecter l’unité lorsqu’elle n’est pas utilisée.
Ne laissez jamais la lampe UV allumée pendant que quelqu’un est dans le labo ou utilise la hotte ! Cela peut provoquer des dommages à la rétine, des brûlures de la peau et accroitre le risque de cancer.
Après le choix du type de hotte approprié pour votre expérience, assurez-vous d’utiliser l’équipement de protection individuel ou EPI approprié. Mettez des gants, lunettes et un masque si nécessaire.
Si un environnement aseptisé est requis pour l’expérience, comme dans une hotte pour la culture de tissus, commencez par asperger la surface de la hotte avec de l’éthanol à 70%. Ceci désinfecte la surface, et s’évapore rapidement ne laissant pas de résidus.
Aussi, assurez-vous d’asperger chaque objet avec l’éthanol à 70%, lorsque vous les placez dans la hotte, pour maintenir un environnement propre.
Lorsque vous placez des objets dans la hotte, gardez le flux d’air à l’esprit. Ne bloquez pas le flux d’air à l’arrière et laissez 15 cm de libre sur le devant de la hotte.
Assurez-vous d’utiliser la hauteur appropriée de guillotine pendant l’expérience pour maintenir l’écoulement d’air laminaire optimal. La plupart des hottes sont équipées d’une alarme qui se déclenchera si la hauteur de la vitre n’est pas optimale.
Lorsque la hotte n’est pas utilisée, souvenez-vous de toujours fermer la vitre, pour économiser l’énergie précieuse du laboratoire, et les ressources institutionnelles.
Maintenant que nous avons vu comment travailler sous hotte, passons en revue quelques types différents de hotte et les nombreuses procédures qui peuvent être réalisées sous celles-ci.
Un type spécifique de hotte est la hotte à fumées (ou sorbonne). Comme son nom l’indique, ce type d’unité devrait être utilisé pour les procédures produisant des fumées toxiques ou impliquant des réactifs chimiques qui émettent des fumées toxiques. La hotte à fumées protège l’utilisateur, mais pas l’environnement expérimental, donc des échantillons biologiques ne sont PAS protégés dans ces unités et la stérilité n’est PAS maintenue.
Une hotte à fumées devrait être utilisée pour la fixation, ainsi que pour le traitement de tissus, et les techniques d’histologie. Ces procédures impliquent typiquement des toxiques ainsi que des produits chimiques corrosifs.
Un autre type de hotte est le banc à écoulement laminaire. Cette unité protège l’expérience, mais pas nécessairement l’utilisateur. Ces unités peuvent utiliser un flux horizontal ou vertical, et peuvent être utilisées pour des expériences de BSL1 sans danger biologique connu, comme la culture de cellules sans risque d’exposition à des agents pathogènes.
Souvent, les dissections sont réalisées sous banc à écoulement laminaire, lorsque la sécurité de l’utilisateur n’est pas concernée mais que la stérilité des tissus disséqués est importante.
Les postes de sécurité microbiologique ou les hottes pour la culture de tissus protègent les deux, l’utilisateur et l’expérience. Comme vous l’avez déjà deviné, la culture de tissus est typiquement réalisée sous hotte pour la culture de tissus. Ces unités maintiennent la stérilité de l’espace de travail expérimental ; tout l’air est filtré par un filtre à particules à haute efficacité, ou filtre HEPA, qu’il entre ou sorte de la zone.
Beaucoup de laboratoires de recherche biomédicale ont des hottes pour la culture de tissus qui sont équipées avec un système d’aspiration par le vide pour aspirer le milieu de culture tissulaire.
Il y a beaucoup de types de postes de sécurité biologique et de hottes pour la culture de tissus ; regardez quel classement BSL est votre hotte avant d’y commencer une nouvelle expérience.
Vous venez de regarder l’introduction de JoVE sur le travail sous hotte. Dans cette vidéo, nous avons parlé du principe sous-jacent au fonctionnement d’une hotte, l’écoulement laminaire, les composants d’une hotte typique, comment travailler à l’intérieur de l’instrument et différents types de hotte.
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Q1: What is laminar flow and how does it work in laboratory hoods?
Laminar flow is the streamlined, undisrupted flow of air in parallel layers. Unlike turbulent flow, laminar flow allows air to flow around objects within the hood, maintaining sterility of the work environment and containing noxious chemical fumes. This principle is fundamental to all hood operations.
Q2: What are the main differences between horizontal and vertical laminar flow hoods?
Horizontal flow hoods have filtered air intake flowing horizontally from back to front toward the user. Vertical flow hoods pull filtered air vertically away from the user, with exhaust filtered as it exits. Both designs maintain work environment sterility, but vertical flow provides better user protection from airborne hazards.
Q3: What basic components do all laboratory hoods share?
All hoods include a window sash, a sliding protective glass barrier shielding against splashes and fumes. They have a non-porous work surface, typically stainless steel, an air intake where air enters, and an exhaust. Many include control panels for adjusting air intake and lights, and some feature UV disinfection capabilities.
Q4: How should you prepare a hood before beginning tissue culture work?
Spray the hood surface with 70% ethanol to disinfect it; the solution quickly evaporates leaving no residue. Spray each object with 70% ethanol as you place it in the hood to maintain a clean environment. Wear appropriate personal protective equipment including gloves, goggles, and a mask as necessary for the procedure.
Q5: When should you use a fume hood versus a laminar flow bench?
Use a fume hood for procedures producing toxic fumes or involving corrosive chemicals, such as fixation, tissue processing, and histological sample preparation for light microscopy. Fume hoods protect the user but not the experimental environment. Laminar flow benches protect the experiment but not the user, making them suitable for sterile work with non-hazardous samples.
Q6: What is the purpose of a tissue culture hood or biosafety cabinet?
Tissue culture hoods and biosafety cabinets protect both the user and the experiment. All air is high-efficiency particulate air (HEPA) filtered as it enters and exits the cabinet, maintaining sterility of the experimental workspace. Many are equipped with vacuum aspiration systems for aspirating tissue culture media, and each has a specific biosafety level rating.
Q7: What safety precautions should you follow when working with hood UV lights?
Never leave UV lights on while anyone is in the lab or using the hood. UV exposure can cause retina damage, skin burns, and increased cancer risk. UV lights should only be used to disinfect the hood unit when the space is unoccupied and all personnel have left the laboratory.
Chapitres dans cette vidéo
0:00
Overview
0:40
The Principle of Laminar Flow
1:43
Parts of the Hood and Hood Types
2:59
Hoods: Basic Use
4:17
Applications
6:37
Summary