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Une méthode de perméabilisation de Drosophila Embryons pour dosages de petites molécules...
Une méthode de perméabilisation de Drosophila Embryons pour dosages de petites molécules...
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JoVE Journal Biology
A Method of Permeabilization of Drosophila Embryos for Assays of Small Molecule Activity

Une méthode de perméabilisation de Drosophila Embryons pour dosages de petites molécules activité

Full Text
13,055 Views
10:04 min
July 13, 2014

DOI: 10.3791/51634-v

Matthew D. Rand1

1Department of Environmental Medicine,University of Rochester School of Dentistry and Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Introduction de petites molécules à l'embryon de drosophile en développement offre un grand potentiel pour la caractérisation de l'activité biologique des nouveaux composés, des médicaments et des toxines ainsi que pour sonder les voies fondamentales de développement. Procédés décrits ici donnent un aperçu des mesures qui surmontent les barrières naturelles de cette approche, l'expansion de l'utilité du modèle de l'embryon de drosophile.

L’objectif général de l’expérience suivante est de préparer des embryons de drosophile viables avec une coquille d’œuf perméable pour tester la bioactivité de petites molécules médicamenteuses ou de toxines introduites. Pour ce faire, il faut d’abord traiter les embryons en phase de développement avec de l’eau de Javel diluée pour éliminer les couches externes de la coquille choriale de l’œuf. La deuxième étape consiste à permer les embryons avec un solvant qui épuise la fine couche cireuse de coquille d’œuf qui bloque les solutés à petites molécules.

La troisième étape consiste à traiter les embryons avec un médicament ou une toxine et un colorant pour évaluer simultanément la perméabilité de la coquille de l’œuf et introduire un composé d’intérêt. Après un développement ultérieur, les embryons peuvent être soit directement imagés, soit traités pour l’immunohistochimie. En fin de compte, les résultats peuvent montrer l’activité d’un médicament ou d’une toxine sur le développement des tissus, telle que déterminée par la microscopie fluorescente avec des immunoréactifs ou des liens vitaux.

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