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DOI: 10.3791/53645-v
William L. Slone*1, Blake S. Moses*1, Rebecca Evans1, Debbie Piktel1, Karen H. Martin1,2, William Petros1, Michael Craig1, Laura F. Gibson1,3
1Alexander B. Osborn Hematopoietic Malignancy and Transplantation Program of the Mary Babb Randolph Cancer Center, Robert C. Byrd Health Sciences Center,West Virginia University School of Medicine, 2Department of Neurobiology and Anatomy, Robert C. Byrd Health Sciences Center,West Virginia University School of Medicine, 3Department of Microbiology, Immunology and Cell Biology, Robert C. Byrd Health Sciences Center,West Virginia University School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Le présent rapport résume un protocole qui peut être utilisé pour modéliser l’influence de la niche du microenvironnement de la moelle osseuse sur les cellules leucémiques en mettant l’accent sur l’enrichissement de la sous-population la plus chimiorésistante.
L’objectif global de cette procédure est de mieux modéliser la leucémie lymphoblastique aiguë résistante, ou LAL, in vitro. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le traitement de la LAL réfractaire sur la façon dont le microenvironnement de la moelle osseuse influence la résistance chimiothérapeutique des cellules LAL. Les principaux avantages de cette technique sont qu’elle est considérablement moins chère et prend moins de temps que l’utilisation de modèles animaux traditionnels pour examiner la promotion de la drogue sur les cellules LLALES réfractaires.
Commencez par ensemencer cinq à 20 fois 10 à 10 cellules leucémiques dans 10 millilitres de milieu de culture spécifique à la tumeur sur une plaque de 100 millimètres de 80 à 90 % de cellules stromales confluentes de la moelle osseuse ou d’ostéoblastes. Tous les quatre jours, inclinez la plaque sur le côté et aspirez tout le milieu sauf un millilitre, en prenant soin de ne pas perturber la couche cellulaire adhérente. Ensuite, ajoutez soigneusement neuf millilitres de milieu de culture cellulaire leucémique frais dans le coin de la plaque sur le côté pour assurer une perturbation minimale des cellules adhérentes.
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