Récolte de sous-populations leucémiques : une méthode de séparation spatiale des sous-populations de cellules leucémiques à partir de la co-culture 2D

- Lorsque des cellules leucémiques sont co-cultivées avec des cellules stromales mésenchymateuses, elles interagissent avec les cellules stromales et forment trois sous-populations. Cellules suspendues flottant librement, cellules à luminosité de phase adhérent à la surface de la monocouche mésenchymateuse et cellules à atténuation de phase sous la monocouche mésenchymateuse. Pour séparer chaque sous-population, prélever une plaque de culture tissulaire avec une monocouche de cellules stromales mésenchymateuses.

Implantez les cellules leucémiques présentes dans des milieux de culture spécifiques à la tumeur sur la monocouche et incubez la plaque pendant la durée souhaitée. Ensuite, collectez les cellules tumorales en suspension en pipetant les cellules flottant librement dans un tube séparé. Maintenant, ajoutez le milieu frais dans la plaque et pipetez vigoureusement pour déloger les cellules tumorales en phase brillante de la surface monocouche mésenchymateuse.

Collectez ces cellules en les pipetant dans un tube séparé. Ajoutez de la trypsine dans la plaque pour éliminer les cellules mésenchymateuses adhérentes. Ajoutez du sérum fœtal bovin, ou FBS, pour arrêter l’action de la try