Name: Polysome profilage en Leishmania, les cellules humaines et des testicules de souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-08T15:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 32 s
Description: Découvrez le profilage des polysomes pour analyser l'engagement des ARNm avec les ribosomes chez Leishmania major, les cellules humaines et les testicules de souris. Cette méthode révèle les mécanismes de régulation de la synthèse protéique.

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Les auteurs remercient Ching Lee pour aide à l’enregistrement audio. La recherche a été soutenue par les fonds de démarrage de la Texas Tech University Health Sciences Center et par le centre d’Excellence pour la Neuroscience translationnelle et thérapeutique (CTNT) accorde le PN-CTNT 2017-05 AKHRJDHW à A.L.K. ; en partie par des subventions des NIH R01AI099380 K.Z. James C. Huffman et Kristen R. Baca étaient des érudits CISER (Centre pour l’intégration des souches éducation et recherche) et appuyés par le programme.

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Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Fractionnement de polysome par gradient de saccharose combinés avec de l’ARN et analyse des protéines des fractions est une méthode puissante pour analyser translationnelle statut des différents mRNAs ou le translatome entier ainsi que des rôles de facteurs protéiques régulant translationnelle machines au cours de l’état normal, physiologique ou une maladie. Polysomique de profilage est une technique particulièrement adaptée pour étudier la régulation traductionnelle organismes tels que les trypanosomatidés y compris <em...

Régulation de l’expression de gène dans les cellules est contrôlée par des mécanismes transcriptionnels, post-transcriptionnel et post-traductionnelle. Les progrès dans le séquençage en profondeur RNA permettent l’étude des niveaux d’ARNm stationnaire sur une échelle de tout le génome à un niveau sans précédent. Cependant, les découvertes récentes ont révélé que d’ARNm stationnaire n’est pas toujours corrélée avec la production de protéine1,2. Le sort d’un relevé de notes individuel est très complex et dépend de nombreux facteurs comme des stimuli internes/externes, stress, etc.. Régulation de l’expression génique au cours de la synthèse des protéines fournit une autre couche de contrôle d’expression nécessaire pour une réponse rapide dans des conditions changeantes. Polysome (ou « polyribosomique »), le profilage, la séparation et la visualisation de traduire activement des ribosomes, est une méthode puissante pour étudier la régulation de la synthèse protéique. Bien que, ses premières applications expérimentales est apparu dans les années 19603, polysome profilage est actuellement une des techniques plus importants en protéines translation studies4. Seul ARNm peut se traduire par plus d’un ribosome conduisant à la formation d’un polysome. Relevés de notes peuvent être calés sur les ribosomes avec cycloheximide5 et ARNm contenant des nombres différents de polysomes se distingue dans le processus de fractionnement polysome de saccharose ultracentrifugation dégradé6,7 , 8 , 9. l’analyse des fractions polysomique RNA puis permet de mesurer des changements dans les États translationnelles de différents mRNAs à l’échelle du génome et au cours de différentes conditions physiologiques4,7, 10. la méthode a été également utilisée pour révéler les rôles de 5' UTR et 3' UTR des séquences dans le contrôle de l’ARNm traduisibilité11, examiner le rôle des miARN dans la répression traductionnelle12, découvrir des défauts dans la biogenèse des ribosomes13 et comprendre le rôle des protéines associées aux ribosomes avec des maladies humaines14,15. Au cours de la dernière décennie, un rôle croissant pour la régulation de l’expression génique au cours de la traduction a émergé qui illustre son importance dans les maladies humaines. Les éléments de preuve pour le contrôle de la traduction dans le cancer, métabolique et maladies neurodégénératives est écrasante15,16,17,18. Par exemple, le dérèglement du contrôle de la traduction eIF4E dépendant contribue à autisme associés déficits15 et FMRP participe au blocage des ribosomes sur mRNA liés à l’autisme,14. Ainsi, polysomique de profilage est un outil très important pour l’étude des défauts de régulation traductionnelle dans plusieurs maladies humaines.
Analyse des protéines des fractions polysomique dans différentes conditions physiologiques dissèque la fonction des facteurs associés aux ribosomes pendant la traduction. La technique de profilage polysome a été utilisée dans de nombreuses espèces, y compris les levures, les cellules de mammifères, plantes et protozoaires10,19,20,21. Parasites protozoaires comme Trypanosoma et Leishmania pièce contrôle transcriptionnel limité de l’expression génique. Leurs génomes sont organisés en groupes de gènes polycistronique qui n’ont pas réglementés promoteur de transcription22. Au lieu de cela, l’expression des gènes du développement est surtout contrôlée au niveau de la traduction des protéines et à la stabilité des ARNm dans trypanosomatide espèce23,24. Compréhension du contrôle de la traduction en l’absence de régulation de la transcription est donc particulièrement importante pour ces organismes. Polysomique de profilage est un outil puissant pour étudier la régulation post-transcriptionnelle de l’expression génique à Leishmania25,26,27,28.
Les récents progrès dans la détection des niveaux d’ARNm individuels par le real time PCR quantitative (RT-qPCR) et pleine transcriptome par séquençage de nouvelle génération, ainsi que technologies de protéomique, apporte la résolution et les avantages du profilage polysomique à un nouveau niveau. L’utilisation de ces méthodes peut être étendue par l’analyse des différentes fractions polysomique par séquençage en RNA profondeur combiné à l’analyse protéomique pour surveiller l’État translationnelle de cellules sur une échelle de tout le génome. Cela permet l’identification de nouveaux acteurs moléculaires régissant la traduction dans différentes conditions physiologiques et pathologiques. Nous présentons ici un polysome universel profilage protocole utilisé sur trois modèles différents : le parasite Leishmania majeur, des cellules humaines cultivées et tissus d’origine animales. Nous présentons des conseils sur la préparation des lysats de cellules de différents organismes, l’optimisation des conditions du gradient, choix des inhibiteurs de la RNase et l’application de la RT-qPCR, Western blot et électrophorèse RNA pour analyser les fractions de polysome dans cette étude.

<table><tbody><tr><td>Instruments :</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gradient master</td><td>Biocomp Instruments Inc.</td><td>Fractionneur</td> à gradient de piston 108 <td></td></tr><tr><td></td><td>Biocomp Instruments Inc.</td><td>152</td><td></td></tr><tr><td>Collectionneur de fractions</td><td>Gilson, Inc.</td><td>FC203B</td><td></td></tr><tr><td>NanoDrop One</td><td>Thermo Scientific</td><td>NanoDrop One</td><td></td></tr><tr><td>Microscope inversé</td><td>Nikon</td><td>ECLIPSE Ts2-FL/Ts2</td><td></td></tr><tr><td>2720 Thermocycleur</td><td>Applied Biosystems by Life Technologies</td><td>4359659</td><td></td></tr><tr><td>Incubateur CO2</td><td>Panasonic Healthcare Co.</td><td>MCO-170A1CUV</td><td></td></tr><tr><td>Incubateur HERATHERM</td><td>Thermo Scientific</td><td>51028063</td><td></td></tr><tr><td>Enceinte de Sécurité Biologique, classe II, type A2</td><td>NuAire Inc.</td><td>NU-543-400</td><td></td></tr><tr><td>Congélateur Revco</td><td>Technologies</td><td>ULT1386-5-D35</td><td></td></tr><tr><td>Beckman L8-M Ultracentifuge</td><td>Beckman Coulter</td><td>L8M-70</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugeuse</td><td>Eppendorf</td><td>5810R</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugeuse</td><td>Eppendorf</td><td>5424</td><td></td></tr><tr><td>Rotor d’ultracentrifugeuse SW41</td><td>Beckman Coulter</td><td>331362</td><td></td></tr><tr><td>Rotor à godets oscillants</td><td>Eppendorf</td><td>A-4-62</td><td></td></tr><tr><td>Rotor à angle fixe</td><td>Eppendorf</td><td>F-45-30-11</td><td></td></tr><tr><td>Quant Studio 12K Flex Machine PCR en temps réel 285880228</td><td>Applied Biosystems by life technologies</td><td>4470661</td><td></td></tr><tr><td>TC20 Compteur de cellules automatisé</td><td>Bio-Rad</td><td>145-0102</td><td></td></tr><tr><td>Hémacytomètre</td><td>Hausser Scientific</td><td>02-671-51B</td><td></td></tr><tr><td><Logiciel >fort&nbsp ; </td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Triax software&nbsp ;</td><td>Biocomp Instruments Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Matériaux :</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lames de comptage, double chambre pour compteur de cellules</td><td>Bio-Rad</td><td>145-0011</td><td></td></tr><tr><td>Tube de microcentrifugation de 1,5 mL</td><td>USA Scientific</td><td>1615-5500</td><td></td></tr><tr><td>Tubes à centrifuger polyclear ouverts, (14 mm x 89 mm)</td><td>Seringue Seton Scientific</td><td>7030</td><td></td></tr><tr><td>, 5 mL</td><td>BD</td><td></td><td></td>309646</tr><tr><td>Seringue BD 3 mL23 Calibre 1 pouce Aiguille</td><td>BD</td><td>10020439</td><td></td></tr><tr><td>Nunclon Delta Surface, 14 cm</td><td>Thermo Scientific</td><td>168381</td><td></td></tr><tr><td>Nunclon Delta Surface, 9 cm</td><td>Thermo Scientific</td><td>172931</td><td></td></tr><tr><td>Nalgene unité de filtration à débit rapide 90 mm, 500 mL, 0,2 aPES</td><td>Thermo Scientific</td><td>569-0020</td><td></td></tr><tr><td>BioLite 75 cm3</ flacons sup></td><td>Thermo Scientific</td><td>130193</td><td></td></tr><tr><td>Nunc 50 mL tubes à centrifuger coniques</td><td>Thermo Scientific</td><td>339653</td><td></td></tr><tr><td>Chemicals :</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Trizol LS</td><td>Ambion by Life Technologies</td><td>10296028</td><td></td></tr><tr><td></td><td>HEPES Fisher Scientific</td><td>BP310-500</td><td></td></tr><tr><td>Trizma base</td><td>Sigma</td><td>T1378-5KG</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium-high glucose (DMEM)</td><td>Sigma</td><td>D6429-500ML</td><td></td></tr><tr><td>Sérum fœtal bovin (FBS)</td><td>Sigma</td><td>F0926-50ML</td><td></td></tr><tr><td>Pénicilline-Streptomycine (P/S)</td><td>Sigma</td><td>P0781-100ML</td><td></td></tr><tr><td>Lipofectamine 2000</td><td>Invitrogen</td><td>11668-019</td><td></td></tr><tr><td>Solution saline tamponnée au phosphate Dulbecco’s ( DPBS)</td><td>Sigma</td><td>D8537-500ML</td><td></td></tr><tr><td>Chlorure de magnésium hexahydraté (MgCl2x6H2O)</td><td>Acros Organics</td><td>AC413415000</td><td></td></tr><tr><td>Chlorure de potassium (KCl)</td><td>Sigma</td><td>P9541-500G</td><td></td></tr><tr><td>Nonidet P 40 (NP-40)</td><td>Fluka (Sigma-Aldrich)</td><td>74385</td><td></td></tr><tr><td>Rnasine recombinante Inhibiteur de la ribonucléase</td><td>Promega</td><td>N2511</td><td></td></tr><tr><td>Héparine sel de sodium</td><td>Sigma</td><td>H3993-1MU</td><td></td></tr><tr><td>cOmplete Mini inhibiteurs de protéase sans EDTA</td><td>Roche Diagnostics</td><td>11836170001</td><td></td></tr><tr><td>Glycogen</td><td>Thermo Scientific</td><td>R0551</td><td></td></tr><tr><td>Water</td><td>Sigma</td><td>W4502-1L</td><td></td></tr><tr><td>Cycloheximide</td><td>Sigma</td><td>C7698-1G</td><td></td></tr><tr><td>Chloroform</td><td>Fisher Scientific</td><td>194002</td><td></td></tr><tr><td>Dithiotreitol (DTT)</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP172-5</td><td></td></tr><tr><td>Bromure d’éthidium</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP-1302-10</td><td></td></tr><tr><td>Acide éthylènediaminetétraacétique disodique déshydraté (EDTA)</td><td>Fisher</td><td>Scientific S316-212</td><td></td></tr><tr><td>Optimem</td><td>Life Technologies</td><td>22600050</td><td></td></tr><tr><td>dichlorhydrate de puromycine</td><td>Sigma</td><td>P8833-100MG</td><td></td></tr><tr><td>Saccharose</td><td>Fisher Scientific</td><td>S5-3KG</td><td></td></tr><tr><td>Solution trypsine-EDTA</td><td>Sigma</td><td>T4049-100ML</td><td></td></tr><tr><td>Capacité Hgh Kit d’ADNc Transcriptase inverse</td><td>Biosystèmes appliqués par technologies du vivant</td><td>4368814</td><td></td></tr><tr><td>Power SYBR Green PCR Master Mix</td><td>Biosystèmes appliqués par technologies du vivant</td><td>4367659</td><td></td></tr><tr><td>HCl</td><td>Fisher Scientific</td><td>A144SI-212</td><td></td></tr><tr><td>Isopropanol</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP26324</td><td></td></tr><tr><td>Hydroxyde de potassium (KOH)</td><td>Sigma</td><td>221473-500G</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps anti-RPL11</td><td>Abcam</td><td>ab79352</td><td></td></tr><tr><td>Protéine ribosomique S6 (C-8) Anticorps</td><td>Santa Cruz Biotechnology Inc.</td><td>sc-74459</td><td></td></tr><tr><td>1xM199</td><td>Sigma</td><td>M0393-10X1L</td><td></td></tr><tr><td>Cloure de lithium</td><td>Sigma</td><td>L-9650</td><td></td></tr><tr><td>Diméthylsulfoxyde (DMSO)</td><td>Fisher Scientific</td><td>D128-500</td><td></td></tr><tr><td>Gel Loading Buffer II</td><td>Thermo Scientific</td><td>AM8546G</td><td></td></tr><tr><td>Agarose UltraPure</td><td>Thermo Scientific</td><td>16500-100</td><td></td></tr><tr><td>Acide trichloracétique (TCA)</td><td>Fisher Scientific</td><td>A322-100</td><td></td></tr><tr><td>Substrat chimiluminescent SuperSignal West Pico PLUS Thermo</td><td>Scientific</td><td>34580</td><td></td></tr><tr><td>Formaldéhyde</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP531-500</td><td></td></tr><tr><td>Dodécylsulfate de sodium (SDS)</td><td>Sigma</td><td>L5750-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Fluorure de phénylméthylsulfonyle (PMSF)</td><td>Sigma</td><td>P7626-5G</td><td></td></tr><tr><td>RNeasy Mini kit</td><td>Qiagen</td><td>74104</td><td></td></tr><tr><td>Adénosine 5&prime ;-triphosphate hydraté de sel disodique (ATP)</td><td>Sigma</td><td>A1852-1VL</td><td></td></tr><tr><td>Cytosine 5'-triphosphate hydraté de sel disodique (CTP)</td><td>Sigma</td><td>C1506-250MG</td><td></td></tr><tr><td>Uridine 5'-triphosphate hydrate de sel trisodique (UTP)</td><td>Sigma</td><td>U6625-100MG</td><td></td></tr><tr><td>Guanosine 5'-triphosphate sodium hydrate (GTP)</td><td>Sigma</td><td>G8877-250MG</td><td></td></tr><tr><td>SP6 ARN polymérase</td><td>NEB</td><td>M0207S</td><td></td></tr><tr><td>Pyrophoshatase</td><td>Sigma</td><td>I1643-500UN</td><td></td></tr><tr><td>Spermidine</td><td>Sigma</td><td>S0266-1G</td><td></td></tr></tbody></table>

polysome profilage en leishmania, les cellules humaines et des testicules de souris

Polysome Profiling in Leishmania, Human Cells and Mouse Testis

Expression de la protéine appropriée au bon moment et dans les bonnes quantités est la base de la fonction des cellules normales et de survie dans un environnement en évolution rapide. Pendant longtemps, les études d’expression de gène étaient dominées par la recherche au niveau transcriptionnel. Cependant, les niveaux d’équilibre des ARNm ne concordent pas bien avec la production de protéines et la traductibilité du mRNA varie grandement selon les conditions. Chez certains organismes, comme le parasite Leishmania, l’expression de la protéine est réglementée principalement au niveau traductionnel. Des études récentes ont démontré que le dérèglement de cette protéine traduction est associé avec le cancer, métabolique, neurodégénératives et autres maladies humaines. Polysome profilage est une méthode puissante pour étudier la régulation traduction protéique. Il permet de mesurer l’État translationnelle des ARNm individuels ou examiner la traduction sur une échelle de tout le génome. La base de cette technique est la séparation des polysomes, ribosomes, leurs sous-unités et l’ARNm libre lors de la centrifugation d’un cytoplasme lysat par un gradient de saccharose. Nous présentons ici un polysome universel profilage protocole utilisé sur trois modèles différents - parasite Leishmania majeur, des cellules humaines cultivées et tissus d’origine animales. Leishmania cellules poussent librement en suspension et des cellules humaines cultivées croissent en monocouche adhérente, tandis que des testicules de souris représentent un échantillon de tissus d’origine animale. Ainsi, la technique est adaptée à l’ensemble de ces sources. Le protocole pour l’analyse des fractions polysomique permet la détection des ARNm individuels par RT-qPCR, protéines par Western blot et l’analyse des ARN ribosomiques par électrophorèse. La méthode peut être étendue par examen des mRNAs association avec le ribosome au niveau du transcriptome par profonde RNA-seq et analyse des protéines associées aux ribosomes par spectrométrie de masse des fractions. La méthode peut être facilement ajustée aux autres modèles biologiques.

Dans cette étude, nous décrivons l’application de la technique de profilage polysomique à trois sources différentes : parasite Leishmania majeurdes cellules humaines cultivées et des testicules de souris. Leishmania cellules poussent librement dans les milieux liquides en suspension, des cellules humaines cultivées se développent dans la monocouche adhérente sur les plaques et les testicules de souris représentent un échantillon de tissu. La méthode peut être facilement ...

L’objectif global de la technique de profilage polysome est analyse de l’activité traductionnelle de différents mRNAs ou transcriptome ARNm au cours de la synthèse des protéines. La méthode est importante pour les études de règlement de la synthèse de protéine, l’activation de la traduction et répression en santé et les maladies humaines multiples.

Polysome profilage en Leishmania, les cellules humaines et des testicules de souris

Proper protein expression at the right time and in the right amounts is the basis of normal cell function and survival in a fast-changing environment. For ...

L’objectif global de cette technique est d’étudier l’engagement des ARNm individuels avec les polysomes pendant la traduction. Le profilage des polysomes est une technologie puissante pour étudier l’engagement de l’ARNm avec les ribosomes et les polysomes. Cette technique est importante pour l’étude de la régulation de la synthèse des protéines, de l’activation de la traduction et de la répression.Notre équipe présente ici les techniques de fractionnement polysomal, et d’analyse des fractions sur l’exemple de trois organismes. Parasite Leishmania major, des cellules humaines cultivées et un tissu animal. Cette approche se compose de quatre étapes principales, la préparation du lysat, la préparation du gradient de saccharose et l’ultracentrifugation, le fractionnement des polysomes et la collecte d’échantillons.Analyse des fractions. Les cellules de différentes sources sont recueillies, lavées et lysées dans un tampon de lyse par passage à travers une aiguille ou un homogénéisateur Dounce. La centrifugation est utilisée pour éliminer les débris cellulaires, clarifiant ainsi le lysat.Un gradient continu de saccharose est formé par le mélange de solutions de saccharose à 10 % et 50 %

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JoVE Journal

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Biochimie

Un test parasite de sauvetage et de la transformation des cellules infectées...

Un test Parasite sauvetage et à la transformation pour le dépistage anti-leishmaniose contre intracellulaire<em&gt; Leishmania donovani</em&gt; Amastigotes dans THP1 humaines ligne leucémie aiguë monocytaire cellulaire

Ici, nous décrivons une méthode pour analyser l'évolution de l'initiation de la traduction de l'ARNm de cellules eucaryotes en réponse à des conditions de stress. Cette méthode est basée sur la séparation de vitesse sur des gradients de saccharose de la traduction à partir de ribosomes ribosomes non translating.

Analyse de la traduction Initiation Pendant conditions de stress par polysome profilage

Les ribosomes jouent un rôle central dans la synthèse des protéines. Polyribosome (polysome) fractionnement par gradient de saccharose de densité centrifugation permet la détermination directe de l'efficacité de la traduction des ARNm individuels à l'échelle du génome entier. En outre, cette méthode peut être utilisée pour l'analyse biochimique des ribosomes et des facteurs de polysomes associées telles que les chaperons et les molécules de signalisation.

Polysome Fractionnement et analyse des mammifères Translatomes sur une échelle de l&#39;ensemble du génome

La capacité des cellules à s’adapter au stress est cruciale pour leur survie. La régulation de la traduction de l’ARNm est l’une de ces stratégies d’adaptation, permettant une régulation rapide du protéome. Ici, nous fournissons un protocole standardisé de profilage des polysomes pour identifier des ARNm spécifiques qui sont traduits sélectivement dans des conditions de stress.

Évaluation de la sélective ARNm traduction dans les cellules de mammifères par polysome profilage

Ce protocole décrit une méthode simple pour extraire et fractionner les transcrits des tissus végétaux sur la base du nombre de ribosomes liés. Il permet une estimation globale de l’activité de traduction et la détermination de l’état de traduction d’ARNm spécifiques.

Une méthode facile pour des plantes polysomes Profiling

Ici, nous présentons un protocole eCLIP pour déterminer les principales cibles d’ARN des candidats du RBP dans les testicules.

Méthode améliorée d’Immunopréprécipitation de réticulation (eCLIP) pour l’identification efficace de l’ARN lié aux protéines dans les testicules de souris

Ici nous avons présenté une méthode multiplexée de séquençage d'ARNm de cellules simples pour profiler l'expression de gène dans les tissus embryonnaires de souris. La méthode de séquençage de l'ARNm à cellule unique à base de gouttelettes (scRNA-Seq) combinée à des stratégies de multiplexage peut dresser le profil des cellules uniques à partir de plusieurs échantillons simultanément, ce qui réduit considérablement les coûts des réactifs et minimise les effets expérimentaux des lots.

Analyse du séquençage de l'ARNm à cellule unique multiplexée des cellules embryonnaires de souris

Le développement du cerveau mammifère nécessite un contrôle approprié de l’expression des gènes au niveau de la traduction. Ici, nous décrivons un système de profilage polysome avec une plate-forme facile à assembler de gradient de saccharose et de fractionnement pour évaluer l’état translationnel des ARNM dans le cerveau en développement.

Analyse de la traduction dans le cerveau de souris en développement à l’aide du profilage polysome

Ce protocole décrit comment générer un profil polysomique sans utiliser de générateurs de gradient automatisés ou de systèmes de fractionnement de gradient.

Profilage des polysomes sans générateurs de gradient ni systèmes de fractionnement

Ici, nous décrivons la méthodologie utilisée pour générer des souches de L. panamensis et de L. donovani exprimant le gène de l’eGFP en tant que transgène intégré stable à l’aide du système pLEXSY. Les parasites transfectés ont été clonés par dilution limite, et les clones ayant l’intensité de fluorescence la plus élevée chez les deux espèces ont été sélectionnés pour une utilisation ultérieure dans les tests de dépistage de médicaments.

Développement de souches d’espèces de Leishmania avec expression constitutive de eGFP

Nous présentons ici une évaluation longitudinale de hamsters dorés infectés par voie intrapéritonéale (IP) ou intragingivale (IG) par L. infantum-Luc par imagerie bioluminescente et par PCR. Les hamsters ont été évalués 1 jour après l’infection (1 dpi), 1 semaine après l’infection (8 dpi) et 3 semaines après l’infection (22 dpi) et euthanasiés à la 50e dpi et 8 mois après l’infection.

In vivo Imagerie de hamsters infectés par Leishmania infantum par inoculation gingivale d’amastigotes axéniques exprimant la luciférase

Découvrez le profilage des polysomes pour analyser l'engagement des ARNm avec les ribosomes chez Leishmania major, les cellules humaines et les testicules de souris. Cette méthode révèle les mécanismes de régulation de la synthèse protéique.

Polysome profilage en Leishmania, les cellules humaines et des testicules de souris

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