Polysome profilage en Leishmania, les cellules humaines et des testicules de souris

L’objectif global de cette technique est d’étudier l’engagement des ARNm individuels avec les polysomes pendant la traduction. Le profilage des polysomes est une technologie puissante pour étudier l’engagement de l’ARNm avec les ribosomes et les polysomes. Cette technique est importante pour l’étude de la régulation de la synthèse des protéines, de l’activation de la traduction et de la répression.

Notre équipe présente ici les techniques de fractionnement polysomal, et d’analyse des fractions sur l’exemple de trois organismes. Parasite Leishmania major, des cellules humaines cultivées et un tissu animal. Cette approche se compose de quatre étapes principales, la préparation du lysat, la préparation du gradient de saccharose et l’ultracentrifugation, le fractionnement des polysomes et la collecte d’échantillons.