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DOI: 10.3791/60690-v
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This article presents a simple assay for quantifying metals in samples prepared using immobilized metal affinity chromatography. The method employs hydroxynaphthol blue as a colorimetric indicator and utilizes a UV-Vis spectrophotometer for detection.
Nous présentons un analyse pour la quantification facile des métaux introduits aux échantillons préparés utilisant la chromatographie immobilisée d'affinité de métal. La méthode utilise le bleu hydroxynaphthol comme indicateur de métal colorimétrique et un spectrophotomètre UV-Vis comme détecteur.
Notre méthode est significative, car elle permet au biochimiste moyen de déterminer rapidement si les échantillons isolés à l’aide de la chromatographie d’affinité métallique immobilisée sont contaminés par des métaux de transition. Le principal avantage est la facilité par laquelle l’analyse peut être effectuée. L’essai utilise l’instrumentation et les techniques communes à la plupart des laboratoires de biochimie, et il peut être facilement et rapidement mis en œuvre.
Alors que dans cet article, nous appliquons cette méthode pour les échantillons isolés avec une colonne nickel-NTA, la méthode peut être utilisée avec toute autre résine d’affinité métallique. Pour la première fois, les utilisateurs devraient essayer cette méthode avec une solution de stock de nickel de concentration connue. Cela les familiarisera avec le flux de travail, les couleurs de l’échantillon et les résines indiquées dans les changements spectraux.
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