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DOI: 10.3791/61704-v
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This study details a protocol for preparing horizontal hippocampal-entorhinal cortex slices from mice, enabling investigation of network oscillations in acute brain slice preparations. The method emphasizes maintaining spontaneous activity through specific incubation and recording conditions using artificial cerebrospinal fluid.
Ce protocole décrit la préparation des tranches horizontales de cortex hippocampal-entorhinal (HEC) des souris présentant l’activité spontanée d’ondulation d’onde forte. Les tranches sont incubées dans une chambre de rétention d’interface simplifiée et les enregistrements sont effectués dans des conditions submergées avec un fluide céphalo-rachidien artificiel à écoulement rapide pour favoriser l’oxygénation des tissus et l’émergence spontanée de l’activité au niveau du réseau.
À l’aide de ce protocole, les chercheurs peuvent étudier les mécanismes sous-jacents aux oscillations du réseau hippocampique dans les préparations de coupes de cerveau de souris aiguës. Dans cette préparation, les enregistrements sont effectués dans des conditions immergées dans des coupes générant des oscillations spontanées du réseau, ce qui permet d’effectuer des techniques pharmacologiques et optogénétiques et de visualiser des enregistrements de cellules uniques. Pour la perfusion transcardique, immédiatement avant de retirer la souris de la chambre d’isoflurane, remplissez le couvercle d’une boîte de Pétri avec trois à cinq millimètres de solution de saccharose réfrigérée et remplissez le fond de la boîte de Pétri avec environ un centimètre de solution de saccharose réfrigérée.
Transférez rapidement la souris anesthésiée sur le tampon absorbant gauche et utilisez trois morceaux de ruban adhésif pour fixer les membres antérieurs et la queue. À l’aide de grandes pinces à tissus et de ciseaux chirurgicaux, tentez la peau et faites une incision dans le sens de la longueur du bas du sternum vers le haut de la poitrine. Utilisez la pince pour tirer sur le sternum et utilisez les ciseaux pour couper le diaphragme.
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