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Neuroscience
Le cerveau aigu de souris tranche pour étudier l’activité spontanée de réseau hippocampal
Le cerveau aigu de souris tranche pour étudier l’activité spontanée de réseau hippocampal
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JoVE Journal Neuroscience
Acute Mouse Brain Slicing to Investigate Spontaneous Hippocampal Network Activity

Le cerveau aigu de souris tranche pour étudier l’activité spontanée de réseau hippocampal

Full Text
10,454 Views
07:58 min
August 28, 2020

DOI: 10.3791/61704-v

Alexander C. Whitebirch1

1Department of Neuroscience, Mortimer B. Zuckerman Mind Brain Behavior Institute,Columbia University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study details a protocol for preparing horizontal hippocampal-entorhinal cortex slices from mice, enabling investigation of network oscillations in acute brain slice preparations. The method emphasizes maintaining spontaneous activity through specific incubation and recording conditions using artificial cerebrospinal fluid.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Electrophysiology
  • Neurobiology

Background

  • Horizontal hippocampal-entorhinal cortex slices are critical for studying neural network activity.
  • Study of sharp-wave ripple activity provides insights into hippocampal function.
  • Pharmacological and optogenetic manipulations can be performed in this model.
  • Spontaneous network oscillations are vital for understanding neural communication.

Purpose of Study

  • To investigate mechanisms underlying hippocampal network oscillations.
  • To refine a protocol for generating viable slices that maintain network activity.
  • To enable localized electrophysiological recordings in a controlled environment.

Methods Used

  • The protocol includes the preparation of ex vivo brain slices from mice.
  • It focuses on horizontal hippocampal-entorhinal cortex tissue.
  • No multiomics workflows are mentioned in the study.
  • Slices are incubated under precise conditions to promote spontaneous activity.
  • The timing for recovery and the setup required for electrophysiological recordings are detailed.

Main Results

  • The slices exhibit spontaneous sharp-wave ripple activity under the specified conditions.
  • Electrical stimulation leads to characteristic field post-synaptic potentials, indicating healthy slices.
  • In suboptimal conditions, altered electrophysiological responses are observed.
  • The findings validate the protocol's effectiveness for studying local field potentials in a dynamic neuronal network.

Conclusions

  • This study demonstrates a robust protocol for preparing and recording from mouse brain slices.
  • The insights gained contribute significantly to understanding hippocampal oscillatory dynamics.
  • The implications extend towards improved investigation of neuronal mechanisms and potential disease models.

Frequently Asked Questions

What are the advantages of using horizontal hippocampal slices?
Horizontal hippocampal slices allow for localized electrophysiological recordings and maintenance of spontaneous neural activity, providing insights into network dynamics.
How is the biological model implemented in this study?
The model involves preparing slices from the hippocampal-entorhinal cortex of mice, enabling researchers to study network-level oscillations under controlled conditions.
What types of data are obtained from this procedure?
Electrophysiological data such as local field potentials and responses to electrical stimulation are collected, reflecting neuronal health and activity.
Can this method be adapted for different neural circuits?
Yes, the protocol can be modified for various brain regions or conditions by adjusting dissection and incubation parameters.
What are some limitations of this approach?
Potential limitations include variability in slice quality and the need for precise environmental control during experiments.
How can this research inform potential therapeutic approaches?
Understanding oscillatory dynamics in the hippocampus may contribute to developing strategies for treating neurological disorders involving network dysfunction.

Ce protocole décrit la préparation des tranches horizontales de cortex hippocampal-entorhinal (HEC) des souris présentant l’activité spontanée d’ondulation d’onde forte. Les tranches sont incubées dans une chambre de rétention d’interface simplifiée et les enregistrements sont effectués dans des conditions submergées avec un fluide céphalo-rachidien artificiel à écoulement rapide pour favoriser l’oxygénation des tissus et l’émergence spontanée de l’activité au niveau du réseau.

À l’aide de ce protocole, les chercheurs peuvent étudier les mécanismes sous-jacents aux oscillations du réseau hippocampique dans les préparations de coupes de cerveau de souris aiguës. Dans cette préparation, les enregistrements sont effectués dans des conditions immergées dans des coupes générant des oscillations spontanées du réseau, ce qui permet d’effectuer des techniques pharmacologiques et optogénétiques et de visualiser des enregistrements de cellules uniques. Pour la perfusion transcardique, immédiatement avant de retirer la souris de la chambre d’isoflurane, remplissez le couvercle d’une boîte de Pétri avec trois à cinq millimètres de solution de saccharose réfrigérée et remplissez le fond de la boîte de Pétri avec environ un centimètre de solution de saccharose réfrigérée.

Transférez rapidement la souris anesthésiée sur le tampon absorbant gauche et utilisez trois morceaux de ruban adhésif pour fixer les membres antérieurs et la queue. À l’aide de grandes pinces à tissus et de ciseaux chirurgicaux, tentez la peau et faites une incision dans le sens de la longueur du bas du sternum vers le haut de la poitrine. Utilisez la pince pour tirer sur le sternum et utilisez les ciseaux pour couper le diaphragme.

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Neurosciences numéro 162 hippocampe souris tranche électrophysiologie ondulation à ondes vives activité spontanée réseau de cortex hippocampal-entorhinal chambre d’interface

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