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DOI: 10.3791/64212-v
Linlin Zhang1,2, Mengjia Liu1,2, Meng Zhang1,2, Junhong Ai1,2, Jiao Tian1,2, Ran Wang1,2, Zhengde Xie1,2
1Beijing Key Laboratory of Pediatric Respiratory Infectious Diseases, Key Laboratory of Major Diseases in Children, Ministry of Education, National Clinical Research Center for Respiratory Diseases, Laboratory of Infection and Virology, Beijing Pediatric Research Institute, Beijing Children's Hospital,Capital Medical University, National Center for Children's Health, 2Research Unit of Critical Infection in Children, 2019RU016,Chinese Academy of Medical Sciences
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Nous décrivons une méthode combinant des billes immunomagnétiques et le tri cellulaire activé par fluorescence pour isoler et analyser des sous-populations de cellules immunitaires définies de cellules mononucléaires du sang périphérique (monocytes, lymphocytes T CD4+, lymphocytes T CD8+, lymphocytes B et cellules tueuses naturelles). En utilisant cette méthode, les cellules marquées magnétiquement et par fluorescence peuvent être purifiées et analysées.
Cette méthode permettra de caractériser différentes cellules immunitaires dans les mêmes états de maladie des personnes atteintes de MI, ce qui élargira notre compréhension du mécanisme de l’infection par le VEB. La démonstration de la procédure sera Linlin Zhang, un médecin de notre laboratoire. Pour commencer, prenez les PBMC isolés précédemment dans un tube microcentrifuge de 1,5 millilitre et faites-les tourner à 300 G pendant 10 minutes à température ambiante.
Jeter le surnageant et remettre les cellules en suspension avec 80 microlitres du tampon préparé. Ensuite, ajoutez 20 microlitres de microbilles CD 14 à la suspension cellulaire, bien mélangée par pipetage, et incuber le tube pendant 15 minutes sur de la glace. Ensuite, lavez les PBMC à l’aide d’un millilitre de tampon et centrifugez à 300 G pendant 10 minutes à température ambiante.
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