אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 7:02 דק׳ • April 30th, 2023
מחסום הדם-מוח, או BBB, הוא מחסום סלקטיבי של תאי אנדותל ותאי מוח כגון אסטרוציטים המווסת את הובלת החומרים בין הדם למוח.
כדי לפתח מודל BBB, הפוך תוספת ממברנה על מכסה צלחת תרבית.
זרע אסטרוציטים מעל הממברנה. הניחו את צלחת התרבות מעל התוספת ודגרו.
זה לוכד את האסטרוציטים בין הממברנה למשטח הבאר.
החזירו את הצלחת כדי להביא אסטרוציטים לתחתית והוסיפו מדיום מתאים לבאר.
לתוספת, הוסף תאי אנדותל המבטאים חלבוני צומת הדוקים אופטימליים המשפרים את המגעים בין תא לתא הנחוצים להיווצרות מחסום.
דגירה כדי לאפשר לתאי אנדותל להיצמד לממברנה.
הסר את המדיום המושקע והעביר את התוספת למדיום אסטרוציטים אחר המכיל היטב ללא גורמי גדילה.
לאחר מכן, הוסף מדיום תאי אנדותל נטול גורם גדילה לתוספת ודגירה.
היעדר גורמי גדילה מעכב את חלוקת התאים, שומר על מגעים בין תאים ומייצב את תכונות המחסום.
תאי האנדותל והאסטרוציטים מתקשרים ויוצרים קרום בסיסי עם צמתים הדוקים כמו ה-BBB.
לאחר מכן, זרעי גליומה ספרואידים בבאר תרבית חדשה.
העבירו את מודל ה-BBB על הספרואידים הללו ודגרו ליצירת מחסום גידול הדם-מוח או מודל BBTB.
הוסף מולקולות מטרה למודל BBTB כדי להעריך את מסירתן לאתר הגידול.
מתחת למכסה המנוע של תרבית תאים סטרילית, שטפו בזהירות את האסטרוציטים המתורבתים עם 5 מיליליטר PBS סטרילי. השתמש במשאבת ואקום כדי להשליך בעדינות את ה-PBS ולהוסיף 2 מיל
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים