Этот хирургический метод иллюстрирует введение генной терапии векторы и стволовых клеток в субретинальной пространство мыши глаз.
Потеря зрения затрагивает около 3,4 млн. человек в США и, как ожидается, увеличится в ближайшие годы. 1 Недавно, генной терапии и трансплантации стволовых клеток стали ключевыми лечебного средства для лечения слепоты в результате дегенеративных заболеваний сетчатки. Несколько форм аутотрансплантации для возрастной макулярной дегенерации (ВМД), таких, как ирис пигментного эпителия клеточной трансплантации, вызвали обнадеживающие результаты, и человеческие клинические испытания начались для других форм терапии генов и стволовых клеток. 2 Они включают в себя ген RPE65 замены терапии у пациентов с врожденным амаврозом Лебера и НПП трансплантации клеток с использованием человеческих эмбриональных стволовых (ЭС) клеток при болезни Штаргардта. 3-4 Теперь, когда есть генной терапии векторы и стволовых клеток для лечения пациентов с заболеваниями сетчатки, важно, чтобы проверить этих потенциальных методов лечения на животных моделях, прежде чем применятьING их в исследованиях на человеке. Мышь стала важной научной модели для проверки терапевтической эффективности генной терапии векторы и трансплантации стволовых клеток в глазу. 5-8 В этом видео статье мы представляем технику для введения генной терапии векторы или стволовых клеток в субретинальной пространстве мышь глаз при сведении к минимуму повреждение окружающих тканей.
Это видео техника дает инструкции по заполнению субретинальной инъекции хирургическую процедуру успешно, и обеспечение того, чтобы вектор генная терапия или стволовые клетки находятся в том месте, необходимо эффективное лечение офтальмологических заболеваний. Эта техника позволяет…
The authors have nothing to disclose.
Исследования по профилактике слепоты; экспериментальной помощь от Такаюки Нагасаки; Это исследование соответствует ARVO Заявление для использования животных в офтальмологический и визуальных исследований. KJW поддерживается грантами NIH 5T32EY013933 и 5T32DK007647-20. ВБМ поддерживается NIH грант K08EY020530.
Name | Company | Catalog | Comments |
0.8-1.10 x 100 mm Capillary Tube (glass) | Kimble Glass, Inc. | 34502 99 | |
Flaming/Brown Micropipette Puller | Sutter Instrument | P-97 | Narishige microforge can be used instead. Catalog #MF-900 |
Sigmacote | Sigma Aldrich | SL2-25ML | Silicone |
Dubecco’s Phosphate Buffered Saline with Calcium Chloride and Magnesium Chloride | Gibco-Invitrogen | 14040-133 | |
Safety-Lok 25 3/4G x 12″; Blood Collection Set | B-D Vacutainer | 367298 | |
1 ml Sub-Q 26 5/8G Slip-Tip Syringe | Becton-Dickinson | 309597 | |
0.5-10 μl Finnpipette II Adjustable-Volume Pipetter | Fisherbrand | 21-377-815 | |
1-200 μl Natural Beveled Tips | USA Scientific, Inc. | 1111-1700 | |
Discovery.V8 Stereo Microscope | Zeiss | MC1500 | |
60 mm x 15 mm Style Treated Polystyrene Cell Culture Dish | Corning Incorporated | 430166 | |
Vannas Straight Scissors | Storz Ophthalmics | E3383 S | |
Curved Dressing Forceps with Serrations Delicate | Storz Ophthalmics | E1408 | |
15 Degree Microsurgery Knife | Wilson Ophthalmic Corp. | 091204 | |
Ketamine | Ketaset III | NADA #45-290 | |
Xylazine | Lloyd Laboratories | NADA #139-236 | |
Bupivacaine (Marcaine) | AstraZeneca | N/A | |
Buprenorphine | Sigma Aldrich | B9275 |