L'obiettivo di questo protocollo è quello di presentare un metodo standard per eseguire test orale di tolleranza al glucosio per via endovenosa (IVGTTs) per valutare il controllo glicemico nei primati non umani e valutare il loro stato metabolico da sano a dismetabolica.
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Articolo metodologico
Caratterizzazione di metabolica Stato a non umani Primati con il endovenosa glucosio test di tolleranza
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il test di tolleranza al glucosio per via endovenosa (IVGTT) svolge un ruolo chiave nella caratterizzazione di omeostasi del glucosio. Quando prese insieme con i profili sierici biochimici, comprensivo dei livelli di glucosio nel sangue sia la Fed e digiunato stato, HbA1c, i livelli di insulina, la storia clinica di dieta, la composizione corporea, e lo stato di peso corporeo, una valutazione del controllo glicemico normale e anormale può essere fatto . Interpretazione di un IVGTT avviene attraverso la misurazione delle variazioni dei livelli di glucosio e insulina nel tempo in relazione alla sfida destrosio. I componenti critici da considerare sono: i livelli di picco di glucosio e di insulina raggiunti in relazione a T0 (termine dell'infusione di glucosio), il tasso di clearance del glucosio K derivato dal versante della clearance del glucosio rapida nei primi 20 minuti (T1 a T20), il tempo per tornare al basale del glucosio, e l'area sotto la curva (AUC). Queste misure IVGTT mostrerà cambiamenti caratteristici come mosse omeostasi del glucosio da un t sanoOA malata stato metabolico 5. Qui descriveremo la caratterizzazione dei primati non umani (Rhesus e Cynomolgus macachi), che sono il modello più rilevante degli animali di diabete di tipo II (T2D) negli esseri umani e la IVGTT e profili clinici di questi animali da un magro sano, a dismetabolica obesi, e lo stato 8, 10, 11 T2D.
Introduzione
Il IVGTT è un saggio funzionale conveniente che viene normalmente utilizzato per determinare la funzione β-cellule nell'uomo a diversi stati metaboliche 5, 7. In modelli animali di DT2, è ben riconosciuto come uno strumento per caratterizzare animali che mostrano progressione della malattia metabolica una sana ad un dismetabolica stato hyperglycemic 8, 9. Il modello animale più vicino di T2D è dimostrata nei primati non umani (NHPs), di cui rhesus e cynomolgus macachi sono esempi notevoli. Questi animali naturalmente sviluppano T2D con gli stessi fattori di rischio di età e obesità contribuendo alla sua incidenza come negli esseri umani
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Protocollo
Tutte le procedure di animali sono stati approvati dal David H. Murdock Research Institute IACUC trova nel campus North Carolina Research (NCRC), in base al protocollo 14-017, Caratterizzazione di un modello di primate non umano di diabete e prediabete / insulino-resistenza e l'efficacia di terapie per migliorare la sensibilità all'insulina e la funzione metabolica.
1. Selezione degli animali e Studio Preparazione
- Selezionare la dieta e il peso degli animali stabili sulla base delle registrazioni mensili assunzione di cibo e il peso corporeo.
NOTA: Gli animali che hanno presentato una recente diminuzione dell'....
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Risultati
I risultati mostrati nella Figura 1 sono dimostrative di glucosio e di insulina curve tipiche maturi, sani e diabetici macachi Cynomolgus nel corso di un 30 min IVGTT. I dati provenienti da scimmie diabetiche sane e avanzate sono mostrati al fine di contrastare le ovvie differenze tra gli animali da entrambe le estremità estreme della gamma di caratterizzazione metabolica. Questo protocollo IVGTT è stato usato con successo da in macachi Rhesus con risultati simili gli au.......
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Discussione
Il IVGTT valuta la capacità di rilascio di insulina glucosio-stimolata da una singola infusione di destrosio base al peso corporeo 5, 12, 13. Dal test, il livello di glucosio nel sangue a digiuno e il livello di insulina è raggiunta, e permette una valutazione della capacità degli animali alla rilascio di insulina e restituire il livello di glucosio elevata nei confronti della linea di base. Questo fornisce all'utente informazioni per caratterizzare l'animale come un livello normale e controllo sano l.......
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Dichiarazioni
Gli autori sono affiliati a una organizzazione di ricerca a contratto (Corona Bioscience) attiva nel campo delle malattie metaboliche.
Ringraziamenti
Gli autori vorrebbero riconoscere il forte sostegno del personale cura degli animali DHMRI CLAS, Facility Manager Daniel Peralta e veterinario curante, il dottor Ignacio Glicerio, DVM MRCVS.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Allegra X-15R Centrifuga | al plasma: 4 ° C a 3.000 giri/min per 10 min | ||
| Siero per centrifuga | : 22 ° C a 3.000 giri/min per 10 min | ||
| Thermo Scientific -86 ° C Congelatore, serie Forma 88000 | Modello: 88500A | ||
| I.V. D50 | |||
| 2 x 2 | Midwest Veterinary Suppy | 366.23000.4 | Usato a secco, con 70% di alcol e 2% di soluzione di clororex |
| 4 ml di provette per separatore di siero | Provetta per la raccolta del sangue | Midwest Veterinary Supply | 366.45000.4 |
| K2EDTA, 2 ml | VWR | 95057-239 | provette per la raccolta del sangue |
| Aprotinina, 100 mg | Sigma | A1153-100MG | per la raccolta del sangue additivo per proteasi |
| 22 G x 1" Cateteri | Midwest Veterinary Suppy | 193.75250.2 | Catetere per via endovenosa |
| Tappo di iniezione con tappo | Midwest Veterinary Suppy | 001.11500.2 | %50 porta per infusione di destrosio |
| Nastro poroso, 1/2" x 10 yd | Midwest Veterinary Suppy | 001.85000.2 | mantiene l'aderenza dei cateteri e dell'epatite. Serrature |
| Soluzione di clorexidina 2% | Midwest Veterinary Suppy | 193.08855.3 | sito del catetere di preparazione |
| 70% Etanolo | VWR | 71001-654 | sito del catetere di preparazione |
| laccio emostatico | Webster | 07-8003432 | |
| rubinetto a 3 vie | Midwest Veterinary Supply | 366.28510.4 | |
| set di prolunga da 37" | Webster | 07-8454200 | Exel |
| 50-60cc LL Siringhe | Midwest Veterinary Suppy | 001.12250.2 | Soluzione salina eparinizzata Flush |
| 250 ml Sacca 0,9% soluzione salina | Webster | 07-8365593 | Flush |
| 1.000 U Eparina, 10 ml | Webster | 07-883-4916 | |
| Ketamina (Ketaset) 100 mg / ml | Fort Dodge | (AV ordinato) | |
| Strisce reattive per glucosio Precision Xtra 50 / bx | Abbott (American Diabetes Wholesale) | 9381599728K7 | test baseline / livelli di glucosio nel sangue T3 |
| Masimo Rad 57 | DRE | 6052057V | pulsossimetro |
| Pavia termometro rettale | Patterson | 07-8391335 | |
| Glucometro Precision Xtra | Abbott | 9381599728K7 | Glucometro portatile |
Riferimenti
- Bergman, R., Phillips, L., Cobelli, C. Physiologic evaluation of factors controlling glucose tolerance in man. J. Clin. Invest. 68, 1456-1457 (1981).
- Bergman, R., Prager, R., Volund, A., Olefsky, J. M. Equivalence of the insulin....
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Ristampe e permessi
