Summary
In diesem Protokoll wurde ein Kniearthrosemodell mit der modifizierten Videman-Methode erstellt, und die Operationsverfahren und Vorsichtsmaßnahmen der Akupotomie werden detailliert beschrieben. Die Wirksamkeit der Akupotomie wurde durch Tests der mechanischen Eigenschaften von Quadrizeps femoris und Sehne sowie der mechanischen und morphologischen Eigenschaften des Knorpels nachgewiesen.
Abstract
Kniearthrose (KOA) ist eine der am häufigsten auftretenden Erkrankungen in der orthopädischen Abteilung, die die Lebensqualität von Menschen mit KOA stark beeinträchtigt. Unter mehreren pathogenen Faktoren ist das biomechanische Ungleichgewicht des Kniegelenks eine der Hauptursachen für KOA. Die Akupotomologie glaubt, dass die Wiederherstellung des mechanischen Gleichgewichts des Kniegelenks der Schlüssel zur Behandlung von KOA ist. Klinische Studien haben gezeigt, dass die Akupotomie Schmerzen wirksam lindern und die Beweglichkeit des Knies verbessern kann, indem sie die Adhäsion, die Kontraktur von Weichteilen und die Belastungskonzentrationspunkte in Muskeln und Sehnen um das Kniegelenk reduziert.
In diesem Protokoll verwendeten wir die modifizierte Videman-Methode, um ein KOA-Modell zu erstellen, indem wir die linke Hintergliedmaße in einer geraden Position immobilisierten. Wir haben die Operationsmethode und die Vorsichtsmaßnahmen im Zusammenhang mit der Akupotomie im Detail skizziert und die Wirksamkeit der Akupotomie in Verbindung mit der Theorie der "Modulation von Muskeln und Sehnen zur Behandlung von Knochenerkrankungen" durch die Erkennung der mechanischen Eigenschaften von Quadrizeps femoris und Sehne sowie der Knorpelmechanik und -morphologie bewertet. Die Ergebnisse zeigen, dass die Akupotomie eine schützende Wirkung auf den Knorpel hat, indem sie die mechanischen Eigenschaften der Weichteile um das Kniegelenk herum anpasst, die Knorpelbelastungsumgebung verbessert und die Knorpeldegeneration verzögert.
Introduction
Kniearthrose (KOA) ist die häufigste Form der Arthrose, die oft als Ganzgelenkserkrankung anerkannt wird, die durch Gelenkknorpeldegeneration gekennzeichnet ist, die sich klinisch als Schmerzen, Schwellungen und Bewegungseinschränkungen der betroffenen Gelenke manifestiert1. Jüngsten epidemiologischen Statistiken zufolge sind bis 2020 weltweit 654,1 Millionen Menschen von KOA betroffen, die 40 Jahre oder älter waren. Die Prävalenz und Inzidenz von KOA steigt mit dem Alter, ist bei Erwachsenen mittleren Alters und älteren Erwachsenen am höchsten und betrifft mehr Frauen als Männer2. Die Prävalenz von KOA wird wahrscheinlich aufgrund der alternden Bevölkerung und der weltweiten Adipositas-Epidemie zunehmen und eine wachsende Bedrohung für die globale öffentliche Gesundheit darstellen. Alter, Geschlecht, Fettleibigkeit, Trauma und andere komplizierte Risikofaktoren im Zusammenhang mit KOA wirken sich direkt auf die Knieinstabilität aus und machen ein biomechanisches Ungleichgewicht in den Kniegelenken zu einer der Hauptursachen für KOA3.
Unter normalen physiologischen Bedingungen befindet sich das Kniegelenk in einem Zustand des mechanischen Gleichgewichts, wodurch sichergestellt wird, dass die mechanischen Belastungen im Gelenk gleichmäßig auf den Knorpel verteilt werden. Jedes mechanische Ungleichgewicht im Kniegelenk kann zu einer abnormalen Belastung des Knorpels führen, was zu einer Knorpeldegeneration und dem Auftreten von KOA4 führt. Das Muskel-Sehnen-System ist das wichtigste dynamische System, das das mechanische Gleichgewicht des Kniegelenks aufrechterhält. Durch die koordinierte Bewegung des Streck- und Beugemuskel-Sehnen-Systems kann die durch die Bewegung erzeugte Last gleichmäßig auf die Knorpeloberfläche verteilt werden, wodurch das metabolische Ungleichgewicht lokaler Knorpelbelastungen über die physiologische Belastung hinaus vermieden wird, was zu Knorpelverlust führt5. Verminderte Muskelkraft ist die Hauptursache für intramuskuläre Bewegungsstörungen und Knorpelschäden, die vor symptomatischem KOA auftreten können.
KOA kann auch eine arthrogene Muskelhemmung (AMI) induzieren, die sich als Muskelschwäche und verminderte Muskelkraft um das Knie manifestiert6. Unter diesen Muskeln fungiert die Quadrizeps-femoris-Gruppe als einziger Kniestrecker, eine wichtige Struktur für die Aufrechterhaltung der Kniegelenkstabilität. Studien haben gezeigt, dass eine Abnahme der Querschnittsfläche des Quadrizeps und der Muskelkraft signifikant und positiv mit der KOA-Progression korreliert7. Der Rückgang der Quadrizepskraft wirkt sich auf das Gangbild, die Kniestabilität, die Bewegungsmuster und viele andere Funktionen aus. Darüber hinaus beeinträchtigt der Rückgang der Muskelkraft die Sehnenfunktion, was sich in einer Abnahme der Sehnensteifigkeit, des Elastizitätsmoduls und anderer biomechanischer Eigenschaften äußert8. Bei der langfristigen Belastungsreparatur können Veränderungen wie Adhäsion und Kontraktur in den Muskeln und Sehnen des Kniegelenks auftreten, die ihre mechanischen Eigenschaften beschädigen, Gelenkinstabilität verursachen und letztendlich einen Teufelskreis pathologischer Veränderungen von KOA bilden. Daher ist es für die KOA-Behandlung von entscheidender Bedeutung, die mechanischen Eigenschaften des Muskel-Sehnen-Systems zu verbessern und das mechanische Gleichgewicht der Gelenke wiederherzustellen.
Unter den Ursachen von KOA ist ein biomechanisches Ungleichgewicht der Hauptinduktionsfaktor für Knieschmerzen, Funktionsstörungen, entzündliche Läsionen und Knorpeldegeneration9. Daher liegt der Schlüssel zur Behandlung von KOA in der Wiederherstellung des biomechanischen Gleichgewichts des Kniegelenks. Die Akupotomologie glaubt, dass die Ätiologie und Pathogenese von KOA ein "mechanisches Ungleichgewicht" sind. Wenn sich die mechanischen Eigenschaften der Weichteile um das Knie herum abnormal ändern, verliert das Kniegelenk sein mechanisches Gleichgewicht, und die abnormale mechanische Belastungsumgebung des Gelenks beschleunigt die Degeneration, was zu einer entzündlichen Stimulation führt, die die Weichteiladhäsionen, Kontrakturen und eine weitere Verschlechterung der Gelenkstabilität weiter verschlimmert. Dieser Teufelskreis entwickelt sich schließlich zu KOA. Durch die Lockerung von Weichteiladhäsionen und Kontrakturen sowie die Verringerung der Stresskonzentration in den Muskeln und Sehnen verbessert die Akupotomie in Verbindung mit der Theorie der "Modulation von Muskeln und Sehnen zur Behandlung von Knochenerkrankungen" die Weichteilmechanik und "moduliert Muskeln und Sehnen", wodurch die mechanische Belastung des Gelenks ausgeglichen wird, die Knorpeldegeneration wirksam gelindert und "Knochenerkrankungen behandelt werden"10. In Bezug auf die Auswahl des Tiermodells haben wir das KOA-Modell basierend auf dem Zweck dieser Studie mit der modifizierten Videman-Methode der Immobilisierung der linken Hintergliedmaße hergestellt.
In diesem Artikel wird die Etablierung des KOA-Modells unter Verwendung der modifizierten Videman-Methode zur Verlängerung der linken Hintergliedmaße, der Immobilisierung und der Operationsmethode und der Vorsichtsmaßnahmen der Akupotomie beschrieben. Wir demonstrieren die Wirksamkeit der Akupotomie, indem wir die mechanischen Eigenschaften von Quadrizeps femoris und Sehne testen und Veränderungen der Gelenkknorpelbelastung und -morphologie erkennen.
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Protocol
Alle Tierversuche wurden von der Tierethikkommission der Beijing University of Chinese Medicine (Nr. BUCM-4-2022010101-1097). In diesem Protokoll wurden 24 6 Wochen alte männliche neuseeländische Kaninchen unter einer bestimmten Bedingung untergebracht, nämlich 20-25 °C, 50-60 % Luftfeuchtigkeit und einem 12-stündigen hellen/12 Stunden dunklen zirkadianen Zyklus mit freiem Zugang zu einer normalen Futternahrung. Die Kaninchen wurden betäubt und durch eine Kombination aus Tiefenanästhesie und Luftembolisation geopfert. Schmerzen sind eines der typischen pathologischen Merkmale von KOA und auch einer der Schlüsselindikatoren, die zur Bewertung von Tiermodellen von KOA und Interventionsmethoden verwendet werden, so dass Analgetika bei der Modellvorbereitung nicht verwendet werden.
1. Das KOA-Kaninchenmodell
- Betäuben Sie Kaninchen mit 3% Pentobarbital-Natrium (30 mg/kg) intravenös am Ohrrand. Um das angemessene Anästhesieniveau zu bestätigen, achten Sie auf einen deutlich geschwächten oder fehlenden Hornhautreflex und das Fehlen von Schmerzen beim Einklemmen der Haut mit einer hämostatischen Pinzette. Geben Sie während der Narkose alle 15 Minuten 2-3 Tropfen Gleitmittel auf die Augen der Kaninchen, um ein Austrocknen der Augen der Kaninchen zu verhindern.
- Fixieren Sie nach der Anästhesie jedes Kaninchen in Rückenlage und ziehen Sie die linke Hintergliedmaße in eine vollständig ausgestreckte Position.
- Fixieren Sie die linke Hintergliedmaße jedes Kaninchens in der ausgestreckten Position.
- Verwenden Sie als erste Schicht medizinisches Klebeband, um die Haut des Kaninchens von der Leiste bis zum Sprunggelenk abzudecken.
- Als zweite Schicht wickeln Sie 36 mm breites, doppelseitiges Schaumstoffband über das medizinische Klebeband und wickeln Sie dann einen Polymerverband von der Leiste bis zum Sprunggelenk. Achten Sie darauf, dass das Kniegelenk um 180° gerade und das Sprunggelenk um 60° dorsalflexiert ist.
- Als dritte Schicht die Gelenke mit kleinen Schienen an der Vorder- und Rückseite der Knie- und Knöchelgelenke immobilisieren und Stahlgitter um die äußerste Schicht wickeln, um sie vor Bissen zu schützen. Legen Sie die Zehen der Kaninchen frei, um zu beobachten, ob die Durchblutung normal ist.
- Immobilisieren Sie die Tiere für 6 Wochen, um das KOA-Modell zu etablieren (Abbildung 1).
HINWEIS: 1) Überprüfen Sie während der Modellvorbereitung die Formen jeden zweiten Tag. Wenn Schimmelpilze locker oder abgelöst sind, betäuben Sie die Kaninchen und immobilisieren Sie die linken Hinterbeine in einer ausgestreckten Position wieder. 2) Legen Sie Schutzmatten auf den Boden der Käfige, um zu verhindern, dass die Gliedmaßen der Kaninchen stecken bleiben und Verletzungen verursachen.
2. Akototomie-Eingriff
HINWEIS: Betäuben Sie die Kaninchen vor Beginn der Akupotomie-Intervention mit 3% Pentobarbital-Natrium (30 mg/kg) durch intravenöse Injektion am Ohrrand.
- Bestimmen Sie die Behandlungspunkte.
- Rasieren Sie das Fell des Kniegelenks der linken Hintergliedmaße des Kaninchens ab.
- Berühren Sie den Ansatz der medialen Femurmuskelsehne des Kaninchenkniegelenks, des Ansatzes der geraden Femursehne, des Bizeps femoris-Sehnenansatzes und des Gänsefußschleimbeutels. Markieren Sie pathologische Verhärtungen lokaler Muskeln mit einem sterilen Hautmarker. Desinfizieren Sie das Kniegelenk dreimal abwechselnd mit medizinischem Jodophor und 75% medizinischem Alkohol.
- Operation der Akupotomie
- Halten Sie die Akupotomieklinge parallel zur Fahrtrichtung parallel zur Sehne und zur Längsachse der Extremität.
- Drücken Sie mit dem Daumen der linken Hand auf die Haut, die in den Markierungspunkt eintritt, und bewegen Sie sich seitlich, so dass Blutgefäße und Nerven auf der ventralen Seite des Daumens getrennt sind.
- Drücken Sie mit dem Akupotomiegriff in der rechten Hand mit einer kleinen Kraft schnell nach unten, damit die Akupotomieklinge sofort durch die Haut dringt. Schieben Sie die Akupotomieklinge langsam zu den lokalen Muskelverhärtungen vor und machen Sie Längsschnitte und seitliche Schwingungen.
- Nach Abschluss der Akupotomie-Operation das Kniegelenk erneut desinfizieren und ein Pflaster anbringen.
- Führen Sie diesen Vorgang 4 Wochen lang einmal pro Woche durch (Abbildung 2).
HINWEIS: 1) Wenn am Sehnenansatz des Vastus medialis, des Vastus lateralis, des Rectus femoris, des Bizeps femoris oder des Anserinschleimbeutels keine Verhärtung oder schnurartiges Gewebe berührt wird, sollte die Akupotomienadel verwendet werden, um die Sehnenansätze direkt zu lösen. 2) Immobilisieren Sie während der Akupotomie-Intervention nicht die linken Hintergliedmaßen von Kaninchen in der Akupotomiegruppe und der Modellgruppe in Streckposition.
3. Elastizitätsmodul des Quadrizeps femoris
HINWEIS: 1) In diesem Experiment wurde das Echtzeit-Scherwellen-Elastographie-Ultraschalldiagnoseinstrument (SWE) verwendet, um den Elastizitätsmodul des Quadrizeps femoris in vivo in jeder Gruppe von Kaninchen zu messen. 2) Der Tester sollte ein erfahrener Sonograph in der Ultraschalldetektion sein. Bei der Messung sollte die Ultraschallsonde sanft auf die Hautoberfläche des Quadrizeps gelegt werden, um lokale Muskelverspannungen zu vermeiden. Die Messungen müssen durchgeführt werden, wenn sich das Tier in einem ruhigen Zustand befindet, ohne zu kämpfen oder zu handeln. Wenn das Tier aktiv ist, warten Sie, bis es ruhig ist, bevor Sie den Test durchführen.
- Rasieren Sie das Fell, um die Haut im Quadrizepsbereich der linken Hintergliedmaße freizulegen.
- Verwenden Sie herkömmlichen zweidimensionalen Ultraschall, um den Quadrizeps-Muskel-Abdomen zu lokalisieren und die Region of Interest (ROI) zu bestimmen, die auf eine Tiefe von 1-2 cm eingestellt ist.
- Starten Sie den SWE-Modus für die Inspektion.
- Stellen Sie den interessierenden Bereich gleichmäßig auf einen kreisförmigen Bereich mit einem Durchmesser von 2 mm und den interessierenden Bereich auf ~0,5-1 cm tief von der Hautoberfläche ein.
- Verwenden Sie das Ultraschall-Diagnosegerät, um einen akustischen Strahlungskraftimpuls zu erzeugen, um das Muskelgewebe zu stimulieren und eine Gewebe-Elastographie zu erhalten.
- Warten Sie 2-3 s, bis sich das Bild stabilisiert hat, und frieren Sie das Bild dann ein. Aktivieren Sie die Q-BOX-Funktion des Instruments, um den Elastizitätsmodul des Quadrizepsmuskels zu messen.
- Warten Sie, bis das System automatisch die Maximal-, Minimal- und Durchschnittswerte (Einheit: KPa) des Elastizitätsmoduls des ROI berechnet. Wählen Sie drei ROIs in der gleichen Tiefe für drei Messungen aus und nehmen Sie den Durchschnittswert für die statistische Analyse.
HINWEIS: Der Tester sollte ein erfahrener Sonograph in der Ultraschalldetektion sein. Bei der Messung sollte die Ultraschallsonde sanft auf die Hautoberfläche des Quadrizeps gelegt werden, um lokale Muskelverspannungen zu vermeiden. Die Messungen müssen durchgeführt werden, wenn sich das Tier in einem ruhigen Zustand befindet, ohne zu kämpfen oder zu handeln. Wenn das Tier aktiv ist, warten Sie, bis es ruhig ist, bevor Sie den Test durchführen.
4. Messung der Kontraktionskraft des Quadrizeps femoris
HINWEIS: Nach der Messung der Kontraktionskraft des Quadrizeps femoris wurden die Kaninchen durch Luftembolie unter Narkose eingeschläfert.
- Betäuben Sie die Kaninchen mit 3% Pentobarbital-Natrium (30 mg/kg) intravenös am Ohrrand. Um zu bestätigen, dass das angemessene Anästhesieniveau erreicht wurde, achten Sie auf einen deutlich geschwächten oder fehlenden Hornhautreflex und das Fehlen von Schmerzen beim Einklemmen der Haut mit einer hämostatischen Pinzette. Geben Sie während der Narkose alle 15 Minuten 2-3 Tropfen Gleitmittel auf die Augen der Kaninchen, um ein Austrocknen der Augen der Kaninchen zu verhindern.
- Legen Sie die Quadrizepsmuskeln frei und befestigen Sie den Zugwandler.
- Schneiden Sie die Haut unterhalb der Patella entlang der Längsachse der Extremität nach oben bis zum Oberschenkelansatz und schneiden Sie die Haut weiter um 3-4 cm nach oben. Ziehen Sie die Haut und die Faszien vorsichtig ab und legen Sie den Muskel frei. Durchtrennen Sie das Patellaband und trennen Sie den Quadrizeps vorsichtig vom Beckenübergang, wobei der Quadrizeps in Verbindung mit dem Iliacium bleibt.
- Lizieren Sie die chirurgischen Nähte am Sehnenübergang zwischen Patella und Quadrizepsmuskel. Dehnen Sie den Muskel in seinem natürlichen Zustand auf seine volle Länge und befestigen Sie ihn dann am Zugwandler. Halten Sie die Ligaturlinie am Muskel in einer geraden Linie mit der Ligaturlinie auf dem Kraftaufnehmer.
- Befestigen Sie den Zugaufnehmer an der Halterung. Verbinden Sie die Signalerfassungsleitung am Zugaufnehmer mit dem Prozessor des Biosignalerfassungssystems.
- Messen Sie die kontraktile Leistung des Quadrizepsmuskels.
- Führen Sie die Elektroden parallel zum Quadrizeps-Bauch ein und vermeiden Sie jeglichen Kontakt zwischen den Elektroden.
- Drücken Sie die Oszilloskoptaste. Passen Sie die Position des Kraftaufnehmers an der Halterung an, um die Basislinie auf Null zu halten. Wählen Sie die Stimulationsparameter des Stimulators mit einer Wellenbreite von 5 ms und einer Verzögerung von 10 ms.
- Verwenden Sie zuerst einen einzelnen Stimulus und passen Sie die Stimulusintensität schrittweise von Null an jedes Mal mit einem Schritt von 0,1 V an. Beobachten Sie die Veränderungen der Muskelkontraktionskurve und der Kontraktionsamplitude, bis die maximale Einzelkontraktionsamplitude (Pt) des Quadrizeps bestimmt ist. Notieren Sie es für nachfolgende Statistiken.
- Verwenden Sie einen Cluster-Stimulus und verwenden Sie die Stimulusamplitude, die die maximale einzelne Kontraktionsamplitude induziert, als Basislinie, um den Muskel kontinuierlich zu stimulieren und die Stimulusfrequenz allmählich zu erhöhen. Beobachten Sie die Veränderungen in der Muskelkontraktionskurve, bis die maximale Kontraktionsamplitude (Pt) des Quadrizeps bestimmt ist. Notieren Sie es für nachfolgende Statistiken.
HINWEIS: 1) Nach jeder Muskelkontraktion sollte dem Muskel 30 s Zeit gegeben werden, um sich zu entspannen, wobei die Muskelpufferlösung kontinuierlich auf den Muskel getropft wird. 2) Beurteilen Sie während der Operation den Anästhesiestatus, indem Sie den Augenlidreflex, den Atemrhythmus, die Muskelentspannung und die Reaktion des Einklemmens der Haut überwachen.
5. Die mechanische Leistung der Quadrizepssehne
- Vorverarbeitung: Messen Sie am Tag der Prüfung die Länge, Breite und Dicke der Quadrizepssehne mit einem Messschieber und installieren Sie eine spezielle Anti-Rutsch-Klemme in der Ermüdungsprüfmaschine. Wiederholen Sie das Be- und Entladen 15x zur Vorverarbeitung.
- Spannungsrelaxationstest: Verwenden Sie den Sensor im Bereich von 0 N bis 100 N, dehnen Sie ihn mit einer Geschwindigkeit von 5 mm/min , bis er die erforderliche Länge erreicht hat, und beginnen Sie dann mit der Datenerfassung. Stellen Sie die Computerdatenerfassungszeit von t (0) ein und sammeln Sie alle 0,1 s Daten, die 1.800 s dauern. Nach Erreichen der eingestellten Zeit Daten und Kurven aufzeichnen.
- Zugversuch: Verwenden Sie den Sensor im Bereich von 0 N bis 100 N und dehnen Sie ihn mit einer Geschwindigkeit von 5 mm/min bis zur maximalen Belastung, bis die Probe auseinandergezogen wird. Berechnen Sie nach der Prüfung die maximale Verschiebung, die Endlast und die Steifigkeit der Probe.
6. Gelenkkontaktflächendruck und Flächendruck des Knorpels
- Befestigen Sie die Femur- und Tibiaproben beidseitig in gerader Position auf der Vorrichtung und führen Sie einen Vorspannungstest durch. Messen Sie den ungefähren Bereich des Kniegelenks, schneiden Sie das druckempfindliche Papier in die gleiche Form und verschließen Sie es mit Plastikfolie.
- Legen Sie das versiegelte druckempfindliche Papier zwischen Tibia- und Femurgelenk und führen Sie eine Druckprüfung am Kniegelenk mit einem Druck von 5 mm/min und einem maximalen Druck von 50 N durch. Halten Sie den Druck 2 Minuten lang aufrecht, bis er 50 N erreicht, wenn das druckempfindliche Papier stabil gefärbt ist.
- Entfernen Sie nach 2 Minuten das druckempfindliche Papier, fixieren Sie die farbige Oberfläche auf einem A4-Blatt und nehmen Sie Bilder mit beiseite gelegtem Maßstab auf.
- Laden Sie das Bild auf den Computer hoch. Verwenden Sie die referenzierte Software für die Flächenmessung und die Mehrsegmentmessung für unregelmäßige Zahlen. Messen Sie den Druck auf die Innen- und Außenseite der Gelenke von Femur und Tibia und notieren Sie die Ergebnisse.
7. Safranin O/Fast Green Verfärbung des Kniegelenkknorpels
- Nehmen Sie nach dem Ende des Akupotomie-Eingriffs das Knorpel-subchondrale Knochenkomplexgewebe und betten Sie es in Paraffin ein. Schneiden Sie die vorbereiteten Gewebewachsblöcke in Scheiben und bereiten Sie Objektträger vor. Entparaffinisieren Sie die vorbereiteten Gewebeobjektträger jeweils 15 Minuten lang mit einer Entparaffinierungslösung (I) und einer Entparaffinierungslösung (II). Tauchen Sie sie dann nacheinander in Xylol und wasserfreies Ethanol (1:1), wasserfreies Ethanol (I), 95% Ethanol, 85% Ethanol und 75% Ethanol, 2-5 Minuten pro Schritt; und zum Schluss 15 Minuten in destilliertem Wasser einweichen.
- Führen Sie eine Färbung durch.
- Färben Sie die Objektträger 1 Minute lang mit Fast Green-Lösung. Nehmen Sie dabei die Objektträger aus der Lösung und beobachten Sie sie unter dem Mikroskop, bis das Gewebe dunkelgrün gefärbt ist.
- Farbtrennung: Spülen Sie die überschüssige Fast Green-Lösung mit Reinstwasser ab. Weichen Sie die Objektträger 5 - 10 Sekunden lang schnell in 1%iger Essigsäurelösung ein. Spülen Sie den Objektträger erneut mit Reinstwasser ab.
- Färben Sie die Objektträger 10-15 Minuten lang in Safranine O-Lösung, bis der Knorpel rot gefärbt ist.
- Dehydrieren und klären Sie das Gewebe, versiegeln Sie die Objektträger und betrachten Sie sie unter dem Mikroskop.
- Weichen Sie die Objektträger nacheinander 3 - 5 Sekunden lang in 75 % Ethanol, 85 % Ethanol, 95 % Ethanol und 100 % Ethanol ein.
- Tauchen Sie die Objektträger nacheinander 10 Minuten lang in Umweltentparaffinierungslösung (I) und Umweltentparaffinierungslösung (II). Nehmen Sie die Objektträger heraus und lassen Sie das neutrale harzige Medium auf die Vorderseite der Objektträger fallen, wobei Sie das Gewebe aussparen. Legen Sie den Rand des Deckglases auf den Objektträger und legen Sie ihn dann langsam ab, um den neutralen Balsam zu bedecken. Entfernen Sie die Luft und vermeiden Sie Luftblasen. Wischen Sie das zusätzliche Xylol und den neutralen Balsam ab und lassen Sie es über Nacht bei Raumtemperatur stehen.
- Betrachten Sie die Objektträger unter dem Mikroskop und nehmen Sie Bilder auf. Wählen Sie für jede Gruppe sechs Proben von Kaninchenknieknorpel aus und wählen Sie nach dem Zufallsprinzip vier verschiedene Betrachtungsfelder für jede Probe zur Auswertung aus. Bewerten Sie die Knorpelhistologie jeder Gruppe nach der Mankin-Methode (Tabelle 1).
8. Statistische Auswertung
- Expressdaten als Mittelwert ± Standardabweichung (
± s). - Führen Sie eine Einweg-Varianzanalyse (ANOVA) und einen LSD-Test durch, um die statistische Signifikanz mehrerer Gruppenvergleiche zu bestimmen.
- Betrachten Sie Unterschiede als statistisch signifikant, wenn P 0,05 <.
± s).Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Experimentelle Ergebnisse der mechanischen Eigenschaften von Quadrizeps femoris und Sehne
Um die Wirkung der Akupotomologie auf die mechanischen Eigenschaften des Quadrizeps femoris bei Kaninchen mit KOA zu bewerten, verwendeten wir eine elastische Echtzeit-Scherwellen-Ultraschallbildgebung bzw. einen Muskelspannungswandler. Im Vergleich zur Kontrollgruppe war der Elastizitätsmodul des Quadrizeps femoris in der KOA-Gruppe verringert (P < 0,05). Im Vergleich zur KOA-Gruppe war der Elastizitätsmodul der Akupotomiegruppe erhöht (P < 0,05, Abbildung 3A). In Bezug auf die Kontraktionsfähigkeit des Quadrizeps femoris waren im Vergleich zur Kontrollgruppe die einzelne Kontraktionsamplitude und die tetanische Kontraktionsamplitude des Quadrizeps femoris in der KOA-Gruppe signifikant verringert (P < 0,05, P < 0,01). Im Vergleich zur KOA-Gruppe waren die einzelne Kontraktionsamplitude und die tetanische Kontraktionsamplitude des Quadrizeps femoris in der Akupotomiegruppe signifikant erhöht (P < 0,05, P < 0,01, Abbildung 3B,C). Diese Ergebnisse zeigen, dass die Akupotomie den Elastizitätsmodul und die Muskelkontraktilität des Quadrizeps femoris bei Kaninchen mit KOA verbessern könnte.
Um die Wirkung der Akupotomie auf die mechanischen Eigenschaften der Quadrizepssehne bei Kaninchen mit KOA zu bewerten, führten wir einen Zugversuch und einen Stressrelaxationstest an der Quadrizepssehne durch. In Bezug auf die Zugeigenschaften der Quadrizepssehne waren im Vergleich zur Kontrollgruppe die Bruchlast und die maximale Verschiebung der Quadrizepssehne in der KOA-Gruppe signifikant verringert (P < 0,01, P < 0,01), während die Steifigkeit der Quadrizepssehne in der KOA-Gruppe einen Abwärtstrend zeigte (P > 0,05). Im Vergleich zur KOA-Gruppe waren die Endbelastung und die maximale Verschiebung der Quadrizepssehne in der Akupotomiegruppe signifikant verringert (P < 0,01, P < 0,01), und die Steifigkeit der Quadrizepssehne in der Akupotomiegruppe zeigte einen Aufwärtstrend (P > 0,05, Abbildung 4A-C). In Bezug auf die Stressrelaxationsrate war die Stressrelaxationsrate der Quadrizepssehne in der KOA-Gruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe verringert (P < 0,05). Im Vergleich zur KOA-Gruppe war die Stressrelaxationsrate der Quadrizepssehne in der Akupotomiegruppe erhöht (P < 0,05, Abbildung 4D). Diese Ergebnisse zeigen, dass die Akupotomie die Zug- und Spannungsrelaxationseigenschaften der Quadrizepssehne bei Kaninchen mit KOA verbessern könnte.
Experimentelle Ergebnisse von Druck und Flächendruck auf der Knorpelkontaktfläche und Knorpelmorphologie
In Bezug auf den maximalen Druck auf die Knorpelkontaktfläche gab es im Vergleich zur Kontrollgruppe keinen signifikanten Unterschied im maximalen Druck auf die Knorpelkontaktfläche in der KOA-Gruppe (P > 0,05), aber es gab einen Abwärtstrend. Im Vergleich zur KOA-Gruppe gab es keinen signifikanten Unterschied im maximalen Druck auf die Knorpelkontaktfläche in der Akupotomiegruppe (P > 0,05), aber es gab einen Aufwärtstrend (Abbildung 5A). In Bezug auf den Flächendruck der Knorpelkontaktfläche gab es im Vergleich zur Kontrollgruppe keinen signifikanten Unterschied im maximalen Flächendruck in der KOA-Gruppe (P > 0,05), aber es gab einen Abwärtstrend. Im Vergleich zur Kontrollgruppe gab es in der Akupotomiegruppe keinen signifikanten Unterschied im maximalen Flächendruck (P > 0,05), aber es gab einen Aufwärtstrend (Abbildung 5B). Diese Ergebnisse zeigen, dass die Akupotomie-Intervention dazu neigte, den maximalen Druck und den Druck pro Flächeneinheit der Knorpelkontaktfläche zu erhöhen, was auf positive Auswirkungen auf die Knorpelbelastungsumgebung hinweist.
Um die Wirkung der Akupotomie auf die Knorpelmorphologie zu bewerten, verwendeten wir die Safranin O-Fast Green-Färbung. In der Kontrollgruppe war die Knorpeloberfläche glatt; die Chondrozyten in allen Schichten waren ordentlich und ordentlich angeordnet; die oberflächlichen Chondrozyten waren spindelförmig angeordnet; die mittleren und tiefen Schichten der Chondrozyten waren säulenförmig angeordnet; die Gezeitenlinie war klar und vollständig; und es gab keine Pannusbildung (Abbildung 6A). In der KOA-Gruppe war die Oberfläche des Knorpels rau oder es gab Peeling-Defekte; die Anzahl der oberflächlichen Chondrozyten war reduziert; Chondrozytenhierarchie und -anordnung waren ungeordnet; die Chondrozyten der mittleren Schicht zeigten Anzeichen von Dehydration, Kontraktion und Nekrose; Chondrozyten-Clustering wurde beobachtet; Gezeitenlinien waren verschwommen oder verzerrte Brüche waren zu sehen; in einigen Gebieten waren wiederholte Gezeitenlinien zu sehen; Blutgefäße können durch die Gezeitenlinie in den nicht verkalkten Knorpel gelangt sein; oder es gab Pannusbildung (Abbildung 6B). In der Akupotomiegruppe war die Oberflächenschicht des Knorpels relativ glatt; die Struktur der Chondrozyten war normal; die Anordnung der Chondrozyten in allen Schichten war relativ sauber; die Gezeitenlinie war klar oder gelegentlich gab es wiederholte Gezeitenlinien; es gab keine Pannusbildung (Abbildung 6C). In Bezug auf die knorpelmorphologischen Scores war der Knorpelmarkin-Score der KOA-Gruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe signifikant erhöht (P < 0,01). Im Vergleich zur KOA-Gruppe war der Knorpelmarkin-Score der Akupotomie-Gruppe signifikant reduziert (P < 0,01, Abbildung 6D). Diese Ergebnisse zeigen, dass die Knorpelintegrität von Kaninchen mit KOA geschädigt war und dass ein Akupotomie-Eingriff die Degeneration des Knorpels verzögern und eine schützende Wirkung auf den Knorpel haben könnte.
Abbildung 1: Modifizierte Videman-Methode zur Erstellung eines Modells der Kniearthrose. (A) Materialien, die für die Erstellung des KOA-Modells erforderlich sind. (B) Verwenden Sie medizinisches druckempfindliches Klebeband, um die linke Hintergliedmaße von Kaninchen abzudecken. (C) Wickeln Sie Polymerbandagen um die linke Hintergliedmaße von Kaninchen. (D,E) Verwenden Sie Schienen, um die Knie- und Knöchelgelenke des Kaninchens ruhig zu stellen. (F) Wickeln Sie Drahtgeflecht ein, um zu verhindern, dass die Kaninchen nagen. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
Abbildung 2: Operationsmethode der Akupotomie. (A) Hautvorbereitung am Kniegelenk der linken Hintergliedmaße eines Kaninchens. (B) Wählen Sie Einstichpunkte aus und verwenden Sie einen chirurgischen Hautmarker, um die Positionen zu markieren. (C) Verwenden Sie zur Desinfektion einen medizinischen Jodophor. (D) Druck setzen und trennen, um Nerven und Blutgefäße zu vermeiden. (E) Durchstechen Sie die Akupotomie und operieren Sie. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
Abbildung 3: Mechanische Eigenschaften des Quadrizeps femoris. (A) Analyse des Elastizitätsmoduls des Quadrizeps femoris; (B) Analyse der einzelnen Kontraktionsamplitude des Quadrizeps femoris; (C) Analyse der tetanischen Kontraktionsamplitude des Quadrizeps femoris. Die Werte sind Mittelwerte ± SD. N = 6 pro Gruppe. Im Vergleich zur entsprechenden Kontrollgruppe: *P < 0,05 und **P < 0,01; im Vergleich zur entsprechenden Modellgruppe: #P < 0,05 und ##P < 0,01. Abkürzung: KOA = Kniearthrose. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
Abbildung 4: Mechanische Eigenschaften der Quadrizepssehne. (A) Analyse der Endbelastung der Quadrizepssehne; (B) Analyse der maximalen Verschiebung der Quadrizepssehne; (C) Analyse der Steifigkeit der Quadrizepssehne; (D) Spannungsrelaxation der Quadrizepssehne. Die Werte sind Mittelwerte ± SD. N = 6 pro Gruppe. Im Vergleich zur entsprechenden Kontrollgruppe: *P < 0,05 und **P < 0,01; im Vergleich zur entsprechenden Modellgruppe: #P < 0,05 und ##P < 0,01. Abkürzung: KOA = Kniearthrose. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
Abbildung 5: Druck auf die Kontaktfläche des Knorpels. (A) Analyse des maximalen Drucks auf die Knorpelkontaktfläche; (B) Analyse des Drucks pro Flächeneinheit der Knorpelkontaktfläche. Die Werte sind Mittelwerte ± SD. N = 6 pro Gruppe. Abkürzung: KOA = Kniearthrose. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
Abbildung 6: Knorpelfärbung mit Safranin O-Fast grün und Markin-Score des Knorpels. (A) Kontrollgruppe, (B) Modellgruppe, (C) Akupotomiegruppe, (D) Analyse des Markin-Scores des Knorpels. Die Werte sind Mittelwerte ± SD. N = 6 pro Gruppe. Im Vergleich zur entsprechenden Kontrollgruppe: **P < 0,01; im Vergleich zur entsprechenden Modellgruppe: ##P < 0,01. Maßstabsleisten = 50 μm (A-C). Abkürzung: KOA = Kniearthrose. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
| Ich. Struktur | III. Färbung | ||
| ein. Normal | 0 | ein. Normal | 0 |
| b. Oberflächenunregelmäßigkeiten | 1 | b. Leichte Reduzierung | 1 |
| c. Pannus und Oberflächenunregelmäßigkeiten | 2 | c. Moderate Reduktion | 2 |
| d. Spalten zur Übergangszone | 3 | d. Starke Reduktion | 3 |
| e. Spalten zur radialen Zone | 4 | e. Kein Farbstoff festgestellt | 4 |
| f. Spalten bis zur verkalkten Zone | 5 | ||
| g. Völlige Desorganisation | 6 | ||
| II. Zellen | IV. Integrität der Gezeitenmarke | ||
| ein. Normal | 0 | ein. Intakt | 0 |
| b. Diffuse Hyperzellularität | 1 | b. Von Blutgefäßen durchzogen | 1 |
| c. Klonen | 2 | ||
| d. Hypozellularität | 3 | ||
Tabelle 1: Modifizierter Mankin-Score.
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Discussion
Ein geeignetes Tiermodell ist einer der Schlüsselfaktoren, um experimentelle Ziele zu erreichen und eine bestimmte wissenschaftliche Fragestellung zu klären. Diese Studie basierte auf den Theorien "Zongjin kontrolliert Knochen und schmiert Gelenke" und "mechanisches Ungleichgewicht" in der Akupotomologie und zielte darauf ab, die wissenschaftliche Konnotation hinter der Behandlung von KOA durch "Modulation von Muskeln und Sehnen zur Behandlung von Knochenerkrankungen" in der Akupotomietherapie zu erklären. Mit anderen Worten, die Akupotomie verbessert die abnormale mechanische Umgebung des Knorpels, indem sie die mechanischen Eigenschaften der Weichteile um das Knie reguliert, um die Degeneration zu verzögern und den Knorpel zu schützen. KOA-Tiermodelle werden im Allgemeinen in zwei Kategorien eingeteilt: spontane und induzierte Modelle. Spontane KOA-Modelle werden aufgrund der relativ langen Modellierungsdauer und der größeren Einschränkungen weniger verwendet. Induzierte KOA-Modelle können durch chirurgische Ansätze (z. B. modifizierte Hulth-Methode, Meniskektomie, Ruptur des vorderen Kreuzbandes, intraartikuläre Injektion und Gelenkimmobilisierung) etabliert werden. Chirurgische Methoden, einschließlich des Schneidens des medialen Seitenbandes, des vorderen Kreuzbandes, der Entfernung des Innenmeniskus und anderer Strukturen, werden verwendet, um das Kniegelenk zu destabilisieren, was zu einem inneren mechanischen Ungleichgewicht und direkter Reibung zwischen den Gelenkoberflächen führt und dadurch KOA11 induziert. Diese Art von Modell eignet sich besser für die Untersuchung von traumatischer Arthritis. Die intraartikuläre Injektion gibt Medikamente in die Kniegelenkhöhle ab, um Entzündungen, Stoffwechselstörungen der Chondrozyten und toxische Reaktionen der Chondrozyten in der Gelenkhöhle zu induzieren und so KOA zu entwickeln, während sie wenig Einfluss auf die Gelenkbelastung hat12. Die Ruhigstellung der Gelenke entwickelt und verschlimmert die Degeneration des Gelenkknorpels, indem sie die Bewegung des Kniegelenks einschränkt und eine Atrophie der Muskeln und Bänder um das Knie verursacht, was zu Veränderungen der Gelenkbelastung führt und somit ein KOA-Modelletabliert 12.
Die modifizierte Videman-Methode ist eine Gelenkimmobilisierungsmethode, die eher dem pathologischen Prozess der KOA entspricht, der durch eine Schwäche der menschlichen Kniemuskulatur verursacht wird, wie bei der Nichtgebrauchsatrophie der Kniemuskeln und -bänder durch Immobilisierung des Knies in einer überdehnten Position, was zu Veränderungen der Gelenkbelastung und Knorpeldegeneration führt. Im Vergleich zu chirurgischen Methoden, die eine Gelenkinstabilität verursachen, die zu KOA führt, entspricht die modifizierte Videman-Methode eher der natürlichen Pathogenese von KOA, bei der die Sehnenverletzung die erste Phase ist, gefolgt von der Sehnen- und Knochenerkrankung; Es ist daher für diese Studie besser geeignet13. Da die Wirkung der Akupotomie bei der Behandlung von KOA im Frühstadium oder im mittleren Stadium offensichtlicher ist, beträgt die Formzeit 6 Wochen, was mit den pathologischen Veränderungen von KOA im mittleren Stadium übereinstimmt. Bei der Modellinduktion kann ein längeres Überstreckungsbremsen zu einer Atrophie der Muskeln um das Kniegelenk führen, und die Beschwerden in der linken Hintergliedmaße führen häufig dazu, dass Kaninchen an Modellgeräten nagen. Da Modellgeräte locker sein können, ist es notwendig, die Dichtheit des Kaninchengeräts regelmäßig zu überprüfen und rechtzeitig zu verstärken. Darüber hinaus ist es notwendig, immer auf die Blutversorgung der Gliedmaßen, Schwellungen, Hautläsionen und Symptome des Verdauungstrakts des Kaninchens zu achten und die Modellgeräte gegebenenfalls zu entfernen. Da sich die Kaninchen während dieses Prozesses in einem Narkosezustand befinden, ist es notwendig, die Kaninchen warm zu halten und in Echtzeit auf den Zustand der Kaninchen zu achten, bis die Kaninchen aufwachen.
Die Akupotomie beinhaltet eine Skalpellfunktion zusätzlich zur vorhandenen Akupunkturnadel, wobei das Konzept der Akupunktur verwendet wird, um in den Körper einzudringen, mit schneidenden und trennenden Effekten, die einer Akupunkturnadel überlegen sind, während sie dem menschlichen Körper weit weniger Traumata zufügen als ein Skalpell14. Die Akupotomologie glaubt, dass die Hauptursache von KOA das mechanische Ungleichgewicht aufgrund von Weichteilschäden um das Kniegelenk ist. Daher liegt der Schlüssel zur Behandlung von KOA mit Akupotomie darin, das mechanische Gleichgewicht des Kniegelenks wiederherzustellen. Hinsichtlich der Auswahl der Behandlungspunkte basiert die Akupotomie einerseits auf der Meridian- und Sehnentheorie und nimmt die schmerzhafte Lokalität als Akupunkturpunkt. Auf der anderen Seite orientiert sich die Akupotomie an der modernen Anatomie und Biomechanik und geht davon aus, dass Weichteilschäden um das Kniegelenk herum Adhäsion und Kontraktion verursachen, die das mechanische Gleichgewicht des Kniegelenks zerstören und hochbelastete Punkte im Gelenk erzeugen. Daher werden Gewebeadhäsions-, Kontraktions- und Hochspannungspunkte häufig als Behandlungspunkte angesehen15,16.
Die biomechanische Analyse von Weichteilen zeigt, dass die Ansatzpunkte von Sehnen und Knochen meist dort liegen, wo Weichteilspannungen konzentriert sind, auch Stresskonzentration genannt, und wo pathologische Produkte wie Adhäsionen, Kontrakturen und schnurartige Knötchen leicht produziert werdenkönnen 17. Darüber hinaus hat die klinische Praxis nachgewiesen, dass sich die durch Abtasten gefundenen Tenderpoints häufig mit den Ansatzpunkten von Sehnen und Knochen überschneiden. Daher entschied sich diese Studie für den Sehnenansatz von Vastus medialis, Vastus lateralis, Rectus femoris, Bizeps femoris und Anserine Bursa. Obwohl die Akupotomie weniger Traumata für das Gewebe verursacht, ist sie immer noch eine Methode des invasiven Eingriffs. Während des Eingriffs muss das vierstufige Verfahren der Akupotomie strikt befolgt werden: Ort, Richtung, Drücken-Loslassen und Punktion. Darüber hinaus müssen die Benutzer auf den Grad der Entspannung und die Behandlungshäufigkeit jedes Eingriffs achten. Es ist ratsam, jeden Behandlungspunkt einmal pro Woche 2-3 Mal freizugeben, um eine übermäßige Schädigung des Gewebes zu vermeiden. Nach Abschluss des Akupotomie-Eingriffs wird das Kniegelenk der linken Hintergliedmaße des Kaninchens erneut desinfiziert und Pflaster an der Akupotomie-Eintrittsstelle angebracht.
Stabile Kniegelenke sind eine Voraussetzung für die Aufrechterhaltung des mechanischen Gleichgewichts und die Ausführung normaler physiologischer Bewegungen18. Muskeln und Sehnen - wichtige Faktoren für die Aufrechterhaltung der Kniegelenkstabilität - sind viskoelastische Gewebestrukturen, die die unterschiedlichen mechanischen Eigenschaften der Muskeln bei Kontraktion und passivem Zug bestimmen, die wichtige Bestandteile der mechanischen Eigenschaften der Muskeln sind und die normale motorische Funktion der Muskeln gewährleisten. Der Elastizitätsmodul, ein Indikator für die mechanischen Eigenschaften von Weichteilen, korreliert positiv mit Veränderungen der mechanischen Funktion des Quadrizeps femoris19. Physiologisch umfasst die Kontraktion der Skelettmuskulatur zwei Formen: einfache Kontraktion und tetanische Kontraktion. Ersteres ist die Grundeinheit der Muskelaktivität, während letzteres hauptsächlich eine reibungslose Bewegung der Skelettmuskulatur bewirkt. Daher wird die maximale Amplitude der einfachen und tetanischen Kontraktion üblicherweise verwendet, um die kontraktile Muskelfunktion zu bewerten.
Die Nichtbenutzung der Skelettmuskelatrophie führt zu einer verminderten tetanischen Kontraktion und einer maximalen willkürlichen Kontraktion, was auf eine Abnahme der Muskelkontraktionsfähigkeit hinweist20. Der Rückgang der Muskelkraft kann die Funktion der Sehnen beeinträchtigen, was sich in einer Abnahme der Viskoelastizität der Sehnen und einer Abnahme der Verformungsfähigkeit der Sehnen äußert8. Unter pathologischen Bedingungen können die Spannungsentspannung und die Zugeigenschaften der Sehnen abnehmen, wodurch das Kniegelenk das Gleichgewicht verliert und die Entwicklung von KOA beschleunigt wird. Daher wurden in dieser Studie der Elastizitätsmodul, die Amplitude der Einzelkontraktion, die Amplitude der tetanischen Kontraktion des Quadrizeps, die Zugeigenschaften der Quadrizepssehne wie Endbelastung, maximale Verschiebung, Steifigkeit sowie die Spannungsrelaxation der Quadrizepssehne ausgewählt, um die Wirkung der Akupotomie auf die mechanischen Eigenschaften des Quadrizeps zu bewerten. Mit dem Belastungs- und Drucktest der Auflagefläche des Knorpels und der Safranin O/Fast Green-Färbung des Kniegelenksknorpels wurde untersucht, ob die Akupotomietherapie die mechanischen Eigenschaften des Quadrizeps femoris verbessert und eine schützende Wirkung auf den Knorpel ausübt. Die experimentellen Ergebnisse zeigen, dass die Akupotomie in Kombination mit der Theorie der "Modulation von Muskeln und Sehnen zur Behandlung von Knochenerkrankungen" das Stressumfeld des Knorpels verbessern, die Knorpeldegeneration verzögern und eine schützende Wirkung auf den Knorpel haben kann, indem sie die mechanischen Eigenschaften von Muskeln und Sehnen des Quadrizeps moduliert.
Es gibt bestimmte Einschränkungen für dieses Experiment. Einerseits haben wir die Kniefehlstellung und ihre Auswirkungen auf die biomechanischen Ungleichgewichte des Knies nicht untersucht. Andererseits wählte diese Studie die modifizierte Videman-Methode der Immobilisierung der linken Hintergliedmaße für die KOA-Modellierung, um die Rolle der Akupotomie bei der Verzögerung der Knorpeldegeneration durch Modulation der mechanischen Eigenschaften von Weichteilen um das Knie aufzuklären. Die Rolle der Akupotomie bei Kniearthrose, die durch traumatische Faktoren wie Bänder- und Meniskusrisse verursacht wird, wurde jedoch nicht untersucht. Darüber hinaus ist die Akupotomie eine Art geschlossene, minimalinvasive Chirurgie. In dieser Studie wurden sowohl Palpations- als auch Akupotomie-Eingriffe durchgeführt, ohne das erkrankte Gewebe unter nicht-direkten Sehbedingungen freizulegen. Um den Einfluss subjektiver Faktoren auf die experimentellen Ergebnisse zu reduzieren, wurden sowohl Palpations- als auch Akupotomie-Eingriffe vom gleichen Personal durchgeführt. Obwohl es bestimmte Einschränkungen gibt, beeinträchtigen diese nicht die Zuverlässigkeit der Schlussfolgerungen dieser Studie.
Zusammenfassend beschreibt diese Arbeit detailliert die Induktion des KOA-Modells mit der modifizierten Videman-Methode (Immobilisierung der linken Hintergliedmaße) und die Akupotomie-Intervention. Es zeigt auch die Analyse des Mechanismus der Akupotomiebehandlung für KOA durch Experimente zum Elastizitätsmodul und zur kontraktilen Funktion des Quadrizeps, zu den mechanischen Eigenschaften der Quadrizepssehne, zur Kraft und zum Druck des Auflagebereichs des Gelenkknorpels und zur Safranin O/Fast Green-Färbung des Kniegelenksknorpels. Die Untersuchung des Mechanismus der Akupotomie zur Verbesserung der biomechanischen Eigenschaften von Weichteilen kann neue Einblicke in die Behandlung von KOA und anderen sportbedingten systemischen Verletzungen liefern.
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Disclosures
Die Autoren haben keine Interessenkonflikte offenzulegen.
Acknowledgments
Diese Arbeit wurde von der National Natural Science Foundation of China unterstützt (Nr. 82074523,82104996).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Acupotomy | Beijing Zhuoyue Huayou Medical Devices Co., Ltd. | 0.4 x 40 mm | |
| Connect Cast Orthopedic Casting Tape | Suzhou Connect Medical Technology Co.,Ltd. | KCP06 | 15.0 cm x 360 cm |
| Double-sided Foam Tape | Deli Group Co.,Ltd. | NO.30416 | 36 mm x 5 yard x 2.5 mm |
| Environmental Dewaxing Solution | Wuhan Servicebio Technology Co.,Ltd. | G1128 | |
| Ethanol absolute | Beijing Hengkangda Medicine Co., Ltd. | ||
| Fast Green solution | Wuhan Servicebio Technology Co.,Ltd. | G1031 | |
| Fast grenn FCF | Sigma,America | 2353-45-9 | |
| Fatigue testing machine | BOSE, America | Bose Electro Force 3300 | |
| Four-channel physiological recorder | Chengdu Instrumeny Frctory | RM-6420 | |
| FPD-305E | Fuji, Japan | ||
| FPD-306E | Fuji, Japan | ||
| Hematoxylin solution | Wuhan Servicebio Technology Co.,Ltd. | G1005 | |
| Medical iodophor disinfectant | Shan Dong Lircon Medical Technology Co., Ltd. | ||
| Medical Tape | Shandong Rongjian Sanitary Products Co., Ltd. | 200402 | 1.5 x 500 cm |
| Muscle tension transducer | Chengdu Instrumeny Frctory | JH-2204005, 50 g | |
| Prescale | Fuji, Japan | ||
| Real-time SWE ultrasound diagnostic instrument | SuperSonic Imagine SA,France | SuperSonic Imagine AixPlorer | |
| Rhamsan gum | Wuhan Servicebio Technology Co.,Ltd. | WG10004160 | |
| Safranine O | Sigma,America | 477-73-6 | |
| Safranine O solution | Wuhan Servicebio Technology Co.,Ltd. | G1015 | |
| Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) | IBM, America |
References
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