Enumerazione delle alghe tramite metodo di coltivazione

1. Pesare un campione di 10 g di terreno che è stato raccolto umido dal campo o che ha aggiunto acqua in modo che rimanga umido per 2-3 giorni. Si noti che il terreno dovrebbe essere umido ma non saturo.
2. Preparare una serie di diluizione 10 volte aggiungendo i 10 g di terreno in 95 ml di soluzione di Bristol modificata (Figura 1). Per creare la soluzione di Bristol modificata, sciogliere quanto segue in 1.000 ml di acqua: 0,25 g NaNO₃, 0,025 g CaCl₂, 0,075 g MgSO^-₄ · 7H₂O, 0,075 g K₂HPO₄, 0,018 g KH₂PO₄, 0,025 g NaCl e 0,5 mg FeCl_3.
3. Continua la serie di diluizioni con l'aggiunta di 1 mL di Sospensione A a 9 mL della Soluzione bristol e ulteriori diluizioni sequenziali.
4. Inoculare 5 tubi replicati contenenti ciascuno 9 mL di Soluzione di Bristol Modificata con 1 mL ciascuna delle diluizioni da 10^-2 a 10^-6 (Tabella 1).
5. Incubare i tubi tappati per un massimo di 4 settimane in un'area esposta alla luce solare.
6. Osservare i tubi per la crescita algale una volta ogni 7 giorni. I tubi con crescita algale appaiono verdi.

Figura 1. Come realizzare una serie di diluizione 10 volte.

Tubo	Diluizione
B	10-2
C	10-3
D	10-4
E	10-5
F	10-6

Tabella 1. Tubi e diluizioni.