Encyclopedia of Experiments: Biology
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- M9 버퍼가 들어 있는 튜브에서 원하는 개발 단계에서 최대 150개의 헤르마프로디테 웜을 수집합니다.
시료의 손실을 방지하기 위해 상복부을 제거할 때 해부 현미경으로 튜브를 본다.
벌레의 머리와 인두 또는 두 개의 전구 모양의 구조를 포함하는 전구 또는 전구를 찾습니다. 두 개의 바늘을 사용하여 인두 뒤에 있는 벌레를 잘라냅니다.
큐티클이 중단되면, 두 고나드 팔은 벌레의 내부 압력으로 인해 몸밖으로 압출되거나 밀려나게 됩니다.
이 예에서는 면역 형광 분석을 위해 성인 웜에서 생식구를 해부할 것입니다.
- 원하는 발달 단계에서 100~150개의 벌레를 선택하고 M9 버퍼 100마이크로리터를 포함하는 1.5밀리리터 미세원심분리기 튜브에서 수집합니다.
해부 현미경하에서 M9 버퍼의 900 마이크로리터를 부드럽게 제거한 다음, 부착된 박테리아의 대부분을 제거하기 위해 2회 더 세척을 반복합니다.
다음으로, 200 마이크로리터 마이크로파이프 팁을 사용하여 M9 버퍼 100마이크로리터의 웜을 평평한 하단 유리 시계 접시에 옮기고, 0.1 개의 어금니 레바솔의 1~3 마이크로리터를 접시에 넣고 부드럽게 소용돌이시킵니다.
해부 현미경으로 각 바늘을 각 웜 아래에 배치하고 움직임과 같은 가위를 사용하여 두 번째 인두 전구 근처의 각 웜에 미세하게 자른다.
- 요리에 담긴 동물의 해부를 5분 이내에 완성하는 것이 매우 중요합니다.
- 압출 된 고나드가 보이지 않는 경우, 그 동물을 건너 뛰기만 하면 됩니다.