Name: Visualizzazione neuroblasti Citocinesi Durante C. elegans Embriogenesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-03-12T18:05:00.000+00:00
Duration: 9 min 52 s
Description: Scopri come visualizzare la citocinesi dei neuroblasti durante l'embriogenesi di Caenorhabditis elegans usando marcatori transgenici e microscopia confocale. Questo metodo permette di studiare i geni che controllano la divisione cellulare.

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Gli autori vorrebbero riconoscere che questo lavoro è stato supportato dalle scienze naturali e ingegneria Research Council del Canada (NSERC) sovvenzione.

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<li>Chin-Sang, I. D., Moseley, S. L., Ding, M., Harrington, R. J., George, S. E., Chisholm, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+divergent+C.+elegans+ephrin+EFN-4+functions+in+embryonic+morphogenesis+in+a+pathway+independent+of+the+VAB-1+Eph+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">The divergent C. elegans ephrin EFN-4 functions in embryonic morphogenesis in a pathway independent of the VAB-1 Eph receptor.</a> Development. 129, 5499-5510 (2002).</li>
<li>Ghenea, S., Boudreau, J. R., Lague, N. P., Chin-Sang, I. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+VAB-1+Eph+receptor+tyrosine+kinase+and+SAX-3%2FRobo+neuronal+receptors+function+together+during+C.+elegans+embryonic+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">The VAB-1 Eph receptor tyrosine kinase and SAX-3/Robo neuronal receptors function together during C. elegans embryonic morphogenesis.</a> Development. 132, 3679-3690 (2005).</li>
<li>Bernadskaya, Y. Y., Wallace, A., Nguyen, J., Mohler, W. A., Soto, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((UNC-40%2FDCC%2C+SAX-3%2FRobo%2C+and+VAB-1%2FEph+polarize+F-actin+during+embryonic+morphogenesis+by+regulating+the+WAVE%2FSCAR+actin+nucleation+complex%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">UNC-40/DCC, SAX-3/Robo, and VAB-1/Eph polarize F-actin during embryonic morphogenesis by regulating the WAVE/SCAR actin nucleation complex.</a> PLoS Genet. 8, (2012).</li>
<li>Piekny, A. J., Werner, M., Glotzer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokinesis%3A+welcome+to+the+Rho+zone%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Cytokinesis: welcome to the Rho zone.</a> Trends Cell Biol. 15, 651-658 (2005).</li>
<li>Piekny, A. J., Maddox, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+myriad+roles+of+Anillin+during+cytokinesis%5BTitle%5D)+AND+%22Sem.+Cell+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">The myriad roles of Anillin during cytokinesis.</a> Sem. Cell Dev. Biol. 21, 881-891 (2010).</li>
<li>Zhao, W. M., Fang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anillin+is+a+substrate+of+anaphase-promoting+complex%2Fcyclosome+%28APC%2FC%29+that+controls+spatial+contractility+of+myosin+during+late+cytokinesis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Anillin is a substrate of anaphase-promoting complex/cyclosome (APC/C) that controls spatial contractility of myosin during late cytokinesis.</a> J. Biol. Chem. 280, 33516-33524 (2005).</li>
<li>Piekny, A. J., Glotzer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anillin+is+a+scaffold+protein+that+links+RhoA%2C+actin+and+myosin+during+cytokinesis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">Anillin is a scaffold protein that links RhoA, actin and myosin during cytokinesis.</a> Curr. Biol. 18, 30-36 (2008).</li>
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<li>Maddox, A. S., Lewellyn , L., Desai, A., Oegema, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anillin+and+the+septins+promote+asymmetric+ingression+of+the+cytokinetic+furrow%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Cell%22%5BJournal%5D)">Anillin and the septins promote asymmetric ingression of the cytokinetic furrow.</a> Dev. Cell. 12, 827-835 (2007).</li>
<li>Dorn, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actomyosin+tube+formation+in+polar+body+cytokinesis+requires+Anillin+in+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">Actomyosin tube formation in polar body cytokinesis requires Anillin in C. elegans.</a> Curr. Biol. 20, 2046-2051 (2010).</li>
<li>Calixto, A., Ma, C., Chalfie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+neuronal+RNAi+in+C.+elegans+using+SID-1%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Methods%22%5BJournal%5D)">Enhanced neuronal RNAi in C. elegans using SID-1.</a> Nat. Methods. 7, 554-559 (2010).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Questo protocollo descrive l&#39;uso di vari tipi di microscopia a divisioni cellulari immagine in media embriogenesi. In particolare, questo protocollo evidenzia come immagine la divisione dei neuroblasti, cellule che possono facilitare epidermica morfogenesi. Comunicazione cellula-cellula è importante per la formazione di tessuto durante lo sviluppo metazoi e C. elegans è un modello eccellente per studiare la formazione di tessuto in vivo. Un evento che ritrae bene l&#39;interazione dei tessuti è epi...

Mentre ci sono protocolli che descrivono come la divisione cellulare immagine nei primi C. elegans embrione, questo protocollo viene descritto come la divisione cellulare l&#39;immagine all&#39;interno di un tessuto durante la metà embriogenesi. Una delle principali sfide nel campo dell&#39;imaging organismi in fase di sviluppo è stata la loro sensibilità alla fototossicità. Tuttavia, una maggiore accessibilità alle filatura microscopio confocale disco o microscopi campo spazzato ha permesso applicazioni di imaging più diffuse. Entrambi i sistemi utilizzano laser a stato solido e luce diffusa, limitando i livelli di UV che gli organismi sono esposti. Tuttavia, stand widefield possono ancora essere utilizzati per l&#39;imaging in vivo, soprattutto se è provvisto di telecamere ad alta sensibilità (ad esempio EMCCD), controllo di apertura e di controllo della luce (ad esempio LED o lampade al mercurio regolabili). Questo protocollo descrive come utilizzare sia un sistema confocale o basato su un sistema widefield di divisione cellulare immagine all&#39;interno di sviluppo C. elegans &lt;/ Em&gt; embrioni. A titolo di esempio, descriviamo come immagine divisione cellulare neuroblasti. Neuroblasti possono facilitare epidermica morfogenesi fornendo segnali chimici o meccanici per le cellule epidermiche sovrastanti, e fornire un eccellente esempio dell&#39;importanza della comunicazione intercellulare nella formazione dei tessuti. Caenorhabditis elegans è un organismo modello ideale per studi basati microscopia essendo trasparente e semplice organizzazione tessuto 1. Inoltre, C. elegans è suscettibile di metodi genetici e RNAi, e dal momento che molti dei suoi geni hanno omologhi umani, può essere utilizzato per identificare i meccanismi conservati per formazione di tessuto 2-5. In C. elegans, la formazione dell&#39;epidermide avviene in media embriogenesi, quando l&#39;embrione ha&gt; 300 cellule. Epidermal morfogenesi consiste di diverse fasi principali, durante il quale l&#39;embrione è racchiuso in uno strato di cellule epidermiche che restringono e si estendono per trasformare il embryo da una forma ovoidale nella forma allungata di una vite senza fine 6. Contenitore ventrale descrive uno di questi eventi morfogenetici, quando le cellule epidermiche ventrali migrano verso la linea mediana ventrale per coprire la superficie ventrale dell&#39;embrione (Figura 1). In primo luogo, due coppie di anteriori situato cellule Leading Edge migrano verso la linea mediana ventrale, dove aderiscono e si fondono con i loro vicini controlaterale 6. Questa è seguita da migrazione delle cellule posteriori situato tasca, che formano cuneo come forme creando una tasca ventrale 6-7. Il meccanismo che chiude la tasca non è ben compreso. Una possibilità è che una struttura di actina miosina contrattile sovracellulari lega le cellule tasca insieme in una stringa di borsa come la moda, simile alla guarigione delle ferite 8. È interessante notare che la migrazione di alcune delle cellule tasca è mediata da specifici sottoinsiemi di neuroblasti sottostanti 9 (precursori neuronali che si trovano sotto il epidermis; Figura 1B). Studi precedenti hanno mostrato che i neuroblasti regolano ventrale migrazione delle cellule epidermiche e contenitore ventrale. VAB-1 (recettore Ephrin) e VAB-2 (Ephrin ligando) sono altamente espresso nei neuroblasti e facilitare lo smistamento delle anteriori e posteriori neuroblasti uno dall&#39;altro, e mutazioni nel VAB-1 o VAB-2 causa custodia ventrale fenotipi 10-13. Tuttavia, gli esperimenti di soccorso Promotore mostrato che è richiesta anche VAB-1 nelle sovrastanti cellule epidermiche ventrali e recettori per altri segnali di orientamento secreti dai neuroblasti sono espressi nelle cellule epidermiche ventrali 9. Anche se le mutazioni in nessuno di questi recettori causano fenotipi recinzione ventrale, non è chiaro se i difetti sorgono a causa di problemi nel posizionamento neuroblast o dovuti a mancanza delle cellule epidermiche ventrale per rispondere alle linee guida spunti 14. Alterare la divisione dei neuroblasti wiThout alterano la capacità di secernere spunti di orientamento potrebbe far luce sul ruolo dei neuroblasti e la loro capacità di fornire un contributo meccanica durante la morfogenesi epidermica. Recentemente, è stato scoperto che un gene divisione cellulare, ani-1 (anillin) è altamente espresso in neuroblasti (Figura 2A) e il suo esaurimento causa difetti divisione neuroblasti. È interessante notare che questi embrioni mostrano ventrali fenotipi di recinzione (Fotopoulos, Wernike e Piekny, osservazioni non pubblicate). Anillin è necessaria per la divisione cellulare, e in particolare per citochinesi, che descrive il processo in cui una cellula madre si divide fisicamente in due cellule figlie. Citochinesi è guidato dalla formazione di un anello contrattile actomyosin, che deve essere strettamente controllato nello spazio e nel tempo per assicurare che esso sia correttamente accoppiato con cromatidi fratelli segregazione. Il principale regolatore della citochinesi metazoi è RhoA (RHO-1 in C. elegans), una piccola GTPasi che è unctive nella sua forma GTP-bound. Il GEF Ect2/ECT-2 attiva RhoA, dopo di che RhoA-GTP interagisce con effettori a valle che formano l&#39;anello contrattile e mediano suo ingresso di 15. Anillin è una proteina che si lega a più dominio di RhoA tramite il suo C-terminale e di actina e miosina attraverso il suo N-terminale. Anillin è necessario per stabilizzare la posizione dell&#39;anello contrattile in cellule di mammifero o Drosophila S2 16. Anillin esaurimento provoca anelli contrattili a subire oscillazioni laterali, e cytokinesis alla fine non riesce formando cellule multinucleate 17-19. Curiosamente, sebbene C. elegans ani-1 Coordinate actomyosin contrattilità in embrione precoce, ma non è essenziale per la citochinesi. Tuttavia, come sopra descritto, è necessario ani-1 per neuroblast citochinesi durante la metà embriogenesi (Fotopoulos, Wernike e Piekny, osservazioni non pubblicate). Fallimento Citocinesi altererebbe il numero e la posizione dei neuroblasti e potrebbe influenzare il loczione dei segnali di orientamento chimici, o potrebbe alterare le proprietà meccaniche del tessuto. Entrambi i modelli evidenziano il ruolo non autonomo di neuroblasti per custodia ventrale, e l&#39;importanza della comunicazione tessuto dei tessuti durante lo sviluppo embrionale. Questo protocollo sperimentale descritto come la divisione cellulare immagini durante la C. elegans metà embriogenesi usando la microscopia a fluorescenza. La maggior parte degli esperimenti che studiano i meccanismi di divisione cellulare sono stati eseguiti in singole cellule all&#39;interno piastre di coltura (per es. HeLa o cellule S2) o in embrioni precoci con un numero limitato di cellule (ad esempio C. elegans embrione unicellulare, Xenopus, o echinoderm embrioni). Tuttavia, è importante studiare la divisione cellulare nei tessuti, in quanto vi sono segnali esterni che possono influenzare la sincronizzazione e il posizionamento del piano di divisione. Inoltre, le cellule possono fornire segnali chimici o meccanici di influenzare lo sviluppo del tessuto limitrofos, ed è importante capire come la comunicazione intercellulare aiuta a formare tessuti durante lo sviluppo.

<table><tbody><tr><td>Agar</td><td>BioShop Canada Inc.</td><td>#AGR001.1</td><td>Per la produzione di piastre C. elegans NGM e RNAi</td></tr><tr><td>Agar</td><td>Bio Basic Inc.</td><td>#9002-18-0</td><td>Per la produzione di piastre di agar LB batteriche</td></tr><tr><td>Agarose</td><td>BioShop Canada Inc.</td><td>#AGA001.500</td><td></td></tr><tr><td>Anti-topo Alexa Fluor 488 anticorpo</td><td>Life Technologies Corporation (Invitrogen)</td><td>#A11029</td><td></td></tr><tr><td>Anti-topo anti-anti-GFP anticorpo</td><td>Roche Applied Science</td><td>#11814460001</td><td></td></tr><tr><td>Anti-coniglio Alexa Fluor 568 anticorpo</td><td>Life Technologies Corporation (Invitrogen)</td><td>#A11011</td><td></td></tr><tr><td>Ampicillin</td><td>BioShop Canada Inc.</td><td>#AMP201.5</td><td>Conservare la polvere a 4 gradi; C e ampicillina disciolta a -20 &deg; C</td></tr><tr><td>Bactopetone&nbsp; (peptone-A)</td><td>Bio Base Inc.</td><td></td><td></td>#G213</tr><tr><td>CaCl2 (cloruro di calcio)</td><td>BioShop Canada Inc.</td><td>#C302.1</td><td></td></tr><tr><td>Colesterolo</td><td>BioShop Canada Inc.</td><td>#CHL380.25</td><td>Sciogliere in etanolo</td></tr><tr><td>DAPI&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>#D9542</td><td>Utilizzare per colorare gli acidi nucleici (DNA)</td></tr><tr><td>Glicerolo</td><td>BioShop Canada Inc.</td><td>#GLY001.1</td><td></td></tr><tr><td>IPTG (isopropiltio-beta;-galattoside)</td><td>Bio Basic Inc.</td><td>#367-93-1</td><td>Conservare la polvere e l'IPTG disciolto a -20 gradi C</td></tr><tr><td>KH2PO4 (fosfato di potassio, monobasico)</td><td>BioShop Canada Inc.</td><td>#PPM666.1</td><td></td></tr><tr><td>K2HPO4 (fosfato di potassio, dibasico)</td><td>BioShop Canada Inc.</td><td>#PPD303.1</td><td></td></tr><tr><td>L4440&nbsp; (vettore di alimentazione)</td><td>Addgene</td><td>#1654</td><td>Mantenere come stock di glicerolo a -80 &deg; C</td></tr><tr><td>MgSO4&nbsp; &nbsp; (solfato di magnesio)</td><td>BioShop Canada Inc.</td><td>#MAG511.500</td><td></td></tr><tr><td>NaCl (cloruro di sodio)</td><td>Bio Basic Inc.</td><td>#7647-14-5</td><td></td></tr><tr><td>Na2HPO4 (fosfato di sodio, bibasico)</td><td>Bio Basic Inc.</td><td>#7558-79-4</td><td></td></tr><tr><td>Siero d'asino normale (NDS)</td><td>Wisent Bioproducts</td><td>#035-110</td><td></td></tr><tr><td>n-propil-3,4,5-triidrossibenzoato (gallato di propile)</td><td>Alfa Aesar</td><td>#A10877</td><td></td></tr><tr><td>Poli-L-lisina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>#P8920</td><td>Per risultati ottimali rivestire i vetrini del microscopio tre volte&nbsp;</td></tr><tr><td>Streptomicina</td><td>BioShop Canada Inc.</td><td>#STP101.50</td><td>Conservare la polvere a 4 gradi; C e streptomicina disciolta a -20 &deg; C</td></tr><tr><td>Tetraciclina</td><td>BioShop Canada Inc.</td><td>#TET701.10</td><td>Conservare la polvere a 4 gradi; C e tetraciclina disciolta a -20 &deg; C</td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Bio Base Inc.</td><td>CAS#9005-64-5</td><td></td></tr><tr><td>Tryptone</td><td>BioShop Canada Inc.</td><td>#TRP402.500</td><td></td></tr><tr><td>Estratto di lievito</td><td>Bio Basic Inc.</td><td>#8013-01-2</td><td></td></tr></tbody></table>

visualizzazione neuroblasti citocinesi durante<em&gt; c. elegans</em&gt; embriogenesi

Visualizing Neuroblast Cytokinesis During C. elegans Embryogenesis

Questo protocollo descrive l&#39;uso di microscopia a fluorescenza a immagine divisione delle cellule all&#39;interno di sviluppare Caenorhabditis elegans embrioni. In particolare, questo protocollo si concentra su come un&#39;immagine dividendo neuroblasti, che si trovano sotto le cellule epidermiche e possono essere importanti per epidermico morfogenesi. Formazione di tessuto è cruciale per lo sviluppo metazoi e si basa su stimoli esterni da tessuti vicini. C. elegans è un ottimo organismo modello per studiare morfogenesi dei tessuti in vivo a causa della sua trasparenza e semplice organizzazione, rendendo i tessuti facile da studiare tramite microscopia. Contenitore ventrale è il processo in cui la superficie ventrale dell&#39;embrione è coperto da un singolo strato di cellule epiteliali. Questo evento è pensato per essere facilitato dai neuroblasti sottostanti, che forniscono spunti di orientamento chimica di mediare la migrazione delle cellule epiteliali sovrastanti. Tuttavia, i neuroblasti sono altamente proliferative, oppure possono agirecome substrato meccanico per le cellule epidermiche ventrali. Gli studi che utilizzano questo protocollo sperimentale potrebbe scoprire l&#39;importanza della comunicazione intercellulare durante la formazione del tessuto, e potrebbero essere utilizzati per rivelare i ruoli dei geni coinvolti nella divisione cellulare nei tessuti in via di sviluppo.

Questo protocollo sperimentale descritto come immagine divisione cellulare in C. elegans embrioni in media embriogenesi. In particolare, si descrive come neuroblasti immagine, che può facilitare epidermica morfogenesi. Epidermal morfogenesi verifica a causa di una combinazione di cambiamenti di forma delle cellule epidermiche, la migrazione e l&#39;adesione, ma anche si basa su segnali chimici o meccanici dai neuroblasti sottostanti (Figura 1B). I neuroblasti secernono spunti di orientamento ch...

Questo protocollo descrive come immagine divisione delle cellule all&#39;interno di un tessuto in Caenorhabditis elegans embrioni. Mentre diversi protocolli descrivono come la divisione cellulare l&#39;immagine in embrione precoce, questo protocollo viene descritto come immagine divisione cellulare all&#39;interno di un tessuto in via di sviluppo durante la metà tarda embriogenesi.

Visualizzazione neuroblasti Citocinesi Durante<em&gt; C. elegans</em&gt; Embriogenesi

This protocol describes the use of fluorescence microscopy to image dividing cells within developing Caenorhabditis elegans embryos. In particular, this ...

L'obiettivo generale del seguente esperimento è osservare cellule in divisione all'interno di un tessuto in via di sviluppo durante l'embriogenesi di C. elegans. Per studiare i geni che controllano la divisione cellulare, ciò si ottiene creando o ottenendo una linea di C. elegans che esprima stabilmente marcatori transgenici in grado di etichettare le cellule di interesse. Come secondo passaggio, si procede a inibire selettivamente un gene di interesse somministrando D-S-R-N-A per via orale a larve di stadio L4 per un periodo compreso tra 24 e 48 ore.Gli embrioni RNAI vengono raccolti da ermafroditi grafici e trasferiti su un supporto aros per l'acquisizione di immagini in vivo. Successivamente, utilizzando microscopia a campo ampio o confocale, gli embrioni vengono analizzati per visualizzare i fenotipi della divisione cellulare. I risultati mostreranno come i neuroblasti si dividono durante l'embriogenesi di sea elgin e il ruolo dei geni necessari per la loro divisione.Questo metodo può contribuire a chiarire domande fondamentali nel campo della biologia dello sviluppo e della biologia cellulare. Ad esempio, questo metodo potrebbe rivelare geni e meccanismi coinvolti nella regola

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Descriviamo la procedura per preparare in...

Visualizzazione del sistema nervoso embrionale in Whole-mount Drosophila Embrioni

Imaging C. elegans Gli embrioni utilizzando un microscopio epifluorescente e Software Open Source

Questo articolo descrive una tecnica per la visualizzazione degli eventi precoci dell'embriogenesi nel...

Microscopia time-lapse di Embriogenesi All&#39;inizio del Caenorhabditis elegans

Fonte: Williams, A. L., et al. Imaging time-lapse multi-fotone per visualizzare lo sviluppo in tempo reale: visualizzazione delle cellule neurali in cresta in migrazione negli embrioni di zebrafish. J. Vis. Exp. (2017)Questo video mostra un protocollo di imaging time-lapse multi-fotone per visualizzare la migrazione delle cellule della cresta neurale in un embrione di zebrafish in tempo reale con alta risoluzione.

Visualizzazione della migrazione delle cellule della cresta neurale in un embrione di pesce zebra utilizzando l'imaging time lapse multi-fotone

Fonte: Jeong, S. Visualizzazione del modello di proiezione assonale dei motoneuroni embrionali in Drosophila. J. Vis. Exp. (2017)Questo video dimostra la visualizzazione delle proiezioni assonali negli embrioni  Drosophila. L'immunomarcatura dei motoneuroni, la dissezione precisa per esporre le strutture neuronali e la microscopia a contrasto interferenale-differenziale rivelano collettivamente un'architettura neuronale dettagliata, enfatizzando i modelli di proiezione assonale.

Visualizzazione dei modelli di proiezione assonale dei motoneuroni embrionali in Drosophila

Progenitrici neurali mitosi è un parametro critico della neurogenesi. Gran parte della nostra comprensione delle progenitrici neurali mitosi si basa sull'analisi del tessuto fisso. Vivo imaging in fettine cerebrali embrionali è una tecnica versatile per valutare mitosi con alta risoluzione temporale e spaziale in un ambiente controllato.

Immagini dal vivo della mitosi in via di sviluppo embrionali di topo Cortex

Qui viene mostrato come tracciare e quantificare i processi di sviluppo in C. elegans. I metodi presentati si basano su strumenti open source che possono essere facilmente implementati. Viene dimostrato come ricostruire modelli 3D di forma cellulare, come tracciare manualmente le strutture subcellulari e come analizzare il flusso contrattile corticale.

Monitoraggio e quantificazione processi di sviluppo in<em&gt; C. elegans</em&gt; Utilizzo strumenti open-source

Questo lavoro descrive un metodo immunohistochemistico standard per visualizzare le proiezioni dei neuroni motori degli embrioni di Drosophila melanogaster a tarda fase 16. La preparazione filettata di embrioni fissi macchiati con FasII anticorpo fornisce un potente strumento per caratterizzare i geni richiesti per la ricerca del percorso dell'assone motore e il riconoscimento del bersaglio durante lo sviluppo neurale.

Visualizzazione del modello di proiezione Axonal dei motoni embrionali in<em&gt; Drosophila</em

Qui, presentiamo un approccio combinatorio utilizzando microscopia ad alta risoluzione, strumenti computazionali, e l'etichettatura a cella singola in vivente embrioni C. elegans per comprendere le singole dinamiche delle cellule durante il neurosviluppo.

Microscopia isotropica leggera e analisi di lignaggio cellulare automatizzate al catalogo Caenorhabditis elegans embriogenesi con risoluzione subcellulare

Questo lavoro descrive un protocollo semi-alto-velocità che consente l'imaging simultaneo 3D time-lapse di embriogenesi in 80-100 C. elegans embrioni in un singolo periodo notturno. Inoltre, sono inclusi strumenti di elaborazione e visualizzazione delle immagini per semplificare l'analisi dei dati. La combinazione di questi metodi con ceppi di reporter personalizzati consente un monitoraggio dettagliato dell'embriogenesi.

Un metodo di imaging semi-alto e un toolkit di visualizzazione dei dati per analizzare lo sviluppo embrionale C. elegans

Qui, presentiamo protocolli e strumenti per visualizzare il calcio durante la fecondazione e l'embriogenesi precoce utilizzando un reporter di calcio geneticamente codificato espresso nella linea germinale del nematode modello C. elegans.

Visualizzazione in vivo dei transitori di calcio durante la fecondazione e lo sviluppo precoce in C. elegans

Scopri come visualizzare la citocinesi dei neuroblasti durante l'embriogenesi di Caenorhabditis elegans usando marcatori transgenici e microscopia confocale. Questo metodo permette di studiare i geni che controllano la divisione cellulare.

Visualizzazione neuroblasti Citocinesi Durante

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