Analisi precisa e ad alta produttività della crescita batterica utilizzando un lettore di microplacche

Si inizia con batteri conservati in un stock di gliceroli, precedentemente cresciuti fino alla fase esponenziale iniziale per garantire stati fisiologici uniformi e una crescita riproducibile.

Aggiungi materiale di crescita e vortice per risospendere uniformemente i batteri.

Diluire serialmente la sospensione usando un mezzo fresco per ottenere un intervallo di densità cellulari iniziali.

Caricare i campioni nei pozzi interni di una piastra multi-pozzetto, lasciando i pozzi di bordo riempiti con mezzi vuoti per minimizzare la variabilità legata all'evaporazione.

Inserire la piastra in un set di lettura micropiastra per mantenere un movimento costante e una temperatura ottimale per la crescita batterica.

Man mano che i batteri si moltiplicano, la densità ottica o OD della coltura aumenta.

Misura il diametro esterno a intervalli fissi.

Si sottraggono i valori iniziali di OD ottenuti dai pozzi vuoti per correggere l'assorbenza di fondo.

Successivamente, calcola il tasso di crescita a partire dai valori consecutivi di OD misurati a intervalli di tempo definiti, consentendo una quantificazione ad alto rendimento e precisa della dinamica della crescita batterica.

Per la registrazione in tempo rea