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Isolamento, espansione e differenziazione dei progenitori fibro-adipogenici dal modello murino sp...
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Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Fibro-Adipogenic Progenitor Isolation, Expansion, and Differentiation from the Spiny Mouse Model

Isolamento, espansione e differenziazione dei progenitori fibro-adipogenici dal modello murino spinoso

Full Text
4,815 Views
07:00 min
November 15, 2024

DOI: 10.3791/66717-v

Bruce Lin1, Hesham Soliman1,2, Fabio M. V. Rossi1, Marine Theret1

1School of Biomedical Engineering and Department of Medical Genetics,University of British Columbia, 2Aspect Biosystems

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Questo protocollo delinea l'isolamento di progenitori fibro-adipogenici (FAP) scheletrici e cardiaci da topi spinosi (Acomys) tramite dissociazione enzimatica e smistamento cellulare attivato dalla fluorescenza. I FAP ottenuti da questo protocollo possono essere efficacemente espansi e differenziati a miofibroblasti e adipociti.

La nostra visione generale è quella di comprendere e comprendere meglio la comunicazione cellulare e il comportamento cellulare che portano alla metastasi tissutale e come i processi cellulari siano mal regolati nella riparazione dell'alimentazione. Per fare ciò, stiamo utilizzando vari modelli di cui uno è il topo spinoso. Uno dei problemi principali di questo nuovo modello murino è la mancanza di strumenti per studiarlo.

Qui forniamo un nuovo protocollo, che contiene una digestione enzimatica affidabile e la colorazione degli anticorpi. Questo ci permette di selezionare con successo i progenitori fibro-adipogenici e di coltivarli in vitro per un'ulteriore analisi del loro destino. Abbiamo testato varie combinazioni e concentrazioni di enzimi, nonché più anticorpi, e il nostro metodo fornisce riferimenti per il protocollo più affidabile e robusto.

Poiché ora disponiamo di una digestione enzimatica affidabile, continueremo a testare altri marcatori e anticorpi per analizzare con successo le cellule endoteliali, i periciti, le cellule immunitarie e le cellule miogeniche.

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