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DOI: 10.3791/66717-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Questo protocollo delinea l'isolamento di progenitori fibro-adipogenici (FAP) scheletrici e cardiaci da topi spinosi (Acomys) tramite dissociazione enzimatica e smistamento cellulare attivato dalla fluorescenza. I FAP ottenuti da questo protocollo possono essere efficacemente espansi e differenziati a miofibroblasti e adipociti.
La nostra visione generale è quella di comprendere e comprendere meglio la comunicazione cellulare e il comportamento cellulare che portano alla metastasi tissutale e come i processi cellulari siano mal regolati nella riparazione dell'alimentazione. Per fare ciò, stiamo utilizzando vari modelli di cui uno è il topo spinoso. Uno dei problemi principali di questo nuovo modello murino è la mancanza di strumenti per studiarlo.
Qui forniamo un nuovo protocollo, che contiene una digestione enzimatica affidabile e la colorazione degli anticorpi. Questo ci permette di selezionare con successo i progenitori fibro-adipogenici e di coltivarli in vitro per un'ulteriore analisi del loro destino. Abbiamo testato varie combinazioni e concentrazioni di enzimi, nonché più anticorpi, e il nostro metodo fornisce riferimenti per il protocollo più affidabile e robusto.
Poiché ora disponiamo di una digestione enzimatica affidabile, continueremo a testare altri marcatori e anticorpi per analizzare con successo le cellule endoteliali, i periciti, le cellule immunitarie e le cellule miogeniche.
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