Isolamento semi-automatico della frazione vascolare stromale dal tessuto adiposo bianco murino mediante un dissociatore tissutale

Siamo interessati ai sottotipi di adipociti marroni e beige che dissipano energia sotto forma di calore, mentre gli adipociti bianchi generalmente immagazzinano energia come Il nostro obiettivo è sviluppare un nuovo trattamento per l'obesità e il diabete basato sulla promozione del dispendio energetico, piuttosto che sulla soppressione dell'assunzione di energia. Abbiamo identificato un fattore di trascrizione, NFI, come regolatore critico della differenziazione degli adipociti bruni mediante un'analisi della cromatina aperta a livello di genoma. NFI e il principale regolatore trascrizionale dell'adipogenesi, PPAR-gamma, co-localizzano come potenziatori specifici del grasso bruno.

Nel processo di isolamento della frazione vascolare stromale dal tessuto adiposo del topo, la tritatura manuale e la digestione della collagenasi del tessuto adiposo possono portare a variabilità e contaminazione sperimentali. Il nostro metodo utilizza un dissociatore tissutale per la digestione della collagenasi, che facilita l'isolamento SVF, riduce la variabilità sperimentale e la contaminazione e migliora la riproducibilità. Gli esperimenti con adipociti differenziati individualmente sono indispensabili per la ricerca nel nostro campo.

Il nostro protocollo offrirebbe un isolamento SVF facile e riproducibile per la successiva differenziazione degli adipociti e accelererebbe la ricerca nella nostra comunità. Attualmente, stiamo studiando il ruolo delle NFI del metabolismo di tutto il corpo, come il peso corporeo e il glucosio, utilizzando modelli murini di guadagno e perdita di funzione. Esploreremo anche altre attivazioni farmacologiche di NFI per ogni via a valle nel prossimo futuro.