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Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Purifying DNA From Agarose Gels
Description
Purifying DNA from agarose gels lets students recover a separated DNA fragment after electrophoresis. The DNA is first isolated from the gel, then moved through a silica column for cleanup.
The process has three main steps: binding, washing, and eluting. DNA is believed to bind to silica when hig...
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Transcript
ゲルを用いた精製は、電気泳動による分離後にアガロースゲルから目的のDNA断片を回収するための一般的な手法です。ゲル断片を溶解し特殊なフィルターを通すと、塩、遊離ヌクレオチド、酵素などの不純物から単離されたDNAを回収でき、ダウンストリームアプリケーションに適用可能となります。
アガロースゲルからのDNA回収の基本工程には、ある配列への結合、洗浄、溶出のステップが含まれます。ゲルを可溶化バッファーに加え、「スピンカラム」に入れます。これは遠心分離機を用いて不純物をコレクションチューブへと通過させ、DNA分子を選択的にシリカフィルターへと結合させる手法です。
可溶化バッ...
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