ラテラル流体打楽器装置を用いたラットモデルにおける外傷性脳損傷の誘発

麻酔をかけたラットを定位固定フレームに置きます。

正中線を切開し、皮膚を引っ込めて頭蓋骨を露出させます。

頭蓋骨を消毒し、表面を乾燥させ、こすってカニューレ留置の対象領域を平らにします。

穴を開けて骨弁を取り外し、脳の外側の覆いである硬膜を露出させます。

綿棒で頭蓋骨をきれいにします。

穴の上にカニューレを置き、歯科用セメントで固定します。

硬膜の乾燥を防ぐために、人工脳脊髄液を充填します。

振り子と液体で満たされたリザーバーで構成される横方向の流体打診装置のチューブにラットを接続します。

ラットが離脱反射を取り戻すと、振り子を調整された角度から解放してリザーバーに衝突し、脳に当たる圧力波を生成します。

圧力は血管に損傷を与え、神経細胞死を引き起こし、外傷性脳損傷を引き起こします。

ラットが回復して、損傷誘発性の神経変性を評価するのを待ちます。

10番メスの刃を使って頭皮の皮膚と筋肉に1.5〜2.5センチの正中線を切開します。皮膚と筋肉を引っ込めて頭蓋骨を露出させ、明確な手術野を提供します。電気焼灼は、迅速な止血を達成するのに役立ちます。

次に、左頭頂骨の外側隆起を剃り、外科用キュレットを使用して滑らかで平らな表面を作り、女性と女性のルアーロックハブの基部が頭蓋骨と同じ高さに収まるようにします。頭蓋骨表面と周囲の組織を滅菌生理食塩水中のゲンタマイシン溶液1ミリリットルあたり2.0mgで洗浄し、滅菌綿棒で余分な溶液を吸い取ります。次に、頭蓋骨に3%過酸化水素を塗布して骨を乾燥させます。

この時点で、左頭頂骨を通して直径5ミリメートルの頭蓋切除部位を作成します。次に、外科用キュレットと平滑組織鉗子で骨弁を取り外します。

次に、実体顕微鏡を使用して、硬膜が破裂しないように注意しながら、滑らかな組織鉗子で残っている骨の薄い縁をそっと取り除きます。次に、頭蓋骨を70%エタノールで拭き取り、骨粉を取り除き、頭蓋骨を乾燥させます。ルアーロックハブの下端の周りにシアノアクリレート接着剤の薄層を塗布し、開口部を塞ぐことなく、接着剤が硬膜に接触しないように頭蓋切除術の上の頭蓋骨に固定します。次に、ハブの外側のベースの周りに接着剤の薄い層でルアーロックを所定の位置に密閉します。

次に、歯科用セメントのスラリーを準備し、これをルアー ロック ハブの基部の周囲と上の頭蓋骨の表面に塗布して所定の位置に固定します。次に、シリンジと針を使用して、複数の電解質を含む滅菌された防腐剤を含まない無菌溶液をルアーロックハブに充填します。生理食塩水の凸状のボーラスがリムの上部の上に見えるはずです。歯科用セメントが完全に硬化したら、ガス麻酔を中止し、ラットを定位固定フレームから取り出します。

骨横臥位で液体打診損傷装置の隣のプラットフォームにラットを置きます。次に、長さ 12 センチメートルの圧力チューブをデバイスの湾曲した先端の端に固定し、反対側の端を 2 センチメートルのオス ルアー ロック ツイスト コネクタで終端させます。ラットの頭蓋骨のハブのメス端をオスコネクタに接続して、ラットをデバイスに固定します。

動物が離脱反射の回復を繰り返しチェックします。ラットが離脱反射を取り戻すが、まだ鎮静されているとすぐに、デバイスの振り子を解放して、20ミリ秒の圧力パルスを1回発生させ、損傷を誘発します。次に、すぐにラットをFPIデバイスから外し、胸骨横臥位に置き、自発呼吸が戻るまでノーズコーンを介して酸素を補給します。

無呼吸は怪我の予想される結果であることに注意してください。必要に応じて、ラットが自発的に呼吸し始めるまで、バッグバルブマスクを介して定期的に手動呼吸を行います。継続的に監視し、正転反射の回復時間を記録します。