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DOI: 10.3791/51341-v
Donna Cvetković*1, Cameron Glenn-Franklin Goertzen*1, Moshmi Bhattacharya1,2,3
1Department of Physiology and Pharmacology, Schulich School of Medicine and Dentistry,University of Western Ontario, 2Department of Oncology, Schulich School of Medicine and Dentistry,University of Western Ontario, 3Lawson Health Research Institute
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
この資料は、乳癌細胞の浸潤を定量化するための3次元(3D)のアッセイの使用のための詳細な方法論を提供する。具体的には、細胞が侵入したときに発生する膜の完全性の喪失を検査するためにこのようなアッセイ、定量化、およびデータ分析だけでなく、メソッドを設定するために必要な手順を説明します。
次の手順の全体的な目標は、3次元浸潤アッセイを使用して癌細胞の侵襲能力を評価することです。これは、最初に基底膜マトリックスでがん細胞を培養することによって達成されます。次に、マトリックスの細胞浸潤を光学顕微鏡で5日以上観察します。
最終ステップでは、細胞を蛍光抗体で標識し、目的のタンパク質を局在化させます。最終的には、がん細胞の浸潤速度とそれに伴うタンパク質発現の変化を免疫蛍光顕微鏡で解析できます。この技術がトランズウェルチャンバー浸潤アッセイなどの既存の技術よりも優れている点は、3Dメジャーゲル浸潤アッセイが、がんが成長を解決するin vivo環境をよりよく模倣
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