湖トラウトのPCB同族体の正味栄養の導入効率の実験室推定（イワナnamaycush）獲物から

次の実験の全体的な目標は、獲物からレイクトラウトへのPCB同族体の正味の栄養移動効率を推定し、PCB同族体の塩素化の程度または脂質溶解度の程度がその正味の栄養移動効率に影響を与えるかどうかを判断することです。これは、まず、レイクトラウトにブロなどの自然食品を少なくとも4か月にわたって与える実験室実験を行うことによって達成されます。第2ステップとして、抽出とクリーンアップを使用して、レイクトラウトとブロ組織からPCBを抽出し、定量手順のために抽出物を調製します。

次に、ネガティブ化学イオン化を使用したガスクロマトグラフィー質量分析を使用して、魚組織中のPCB同族体濃度を決定します。結果は、PCB同族体から獲物からのレイクトラウトへの正味の栄養移動効率は、PCB同族体の塩素化の程度によって大きく影響を受けないことを示しています。結果はまた、レイクトラウトの活動が正味の栄養移動効率に大きな影響を与えていないように見えることを示しています。

この技術の主な利点は、SIVsの魚に直接汚染物質を注入するような既存の方法やSIVsの魚の餌にかかる主な利点は、SS魚が、その自然環境における猛魚の汚染物質蓄積のプロセスを最もよく模倣する方法で汚染物質を蓄積することです。この方法の視覚的なデモンストレーションは、濃縮と抽出のステップを正しく実行するために細心の注意を払う必要があるため、非常に重要です。これらの手順は、目視で観察することで最もよく学習できます。

この手順を実演するのは、私の研究室の化学者であるJim O'Keefeです。まず、マイナス30°Cの冷凍庫に保存した獲物魚を適量解凍します。解凍した獲物は、シェフナイフを使って約1〜5gの重さに切ります。

これに続いて、各タンクに入れる獲物の量を量り、各タンクにピースを落とします。捕食者の魚に約1時間餌を与えた後、食べた食物を取り出し、約20分間風乾させます。une食品の計量が終わったら、各タンクに入れた食品の量と各タンクの食べた食品の量を記録します。

捕食者の魚を犠牲にして冷凍した後、解凍する捕食者、魚、または獲物魚の複合材料のセットを選択し、適切なサイズの均質化を使用して複合材料を部分的に解凍します。各複合材料。各複合材料について、ホモジネートの50〜100グラムのサンプルを、洗浄し、アセトンを洗い流し、ラベル付けした瓶に入れます。

瓶をキャッピングした後、抽出のための処理時まで摂氏マイナス30度で保管します。解凍した均質化された魚組織20グラムを200ミリリットルのビーカーで秤量し、次に約40グラムの硫酸ナトリウムで秤量し、へらでよく混ぜます。CONGENERS 30、61、161、および166を含有する代理スパイク溶液を、最終濃度が20ナノグラム/ミリリットルとなる濃度で添加します。

抜粋で。サンプルが乾燥砂の粘稠度に達した後、20分ごとに混合しながら、サンプルを室温で乾燥させます。テフロンボイルチップが入った500ミリリットルのフラスコ、ソックス、sl、コンデンサーでソリ抽出装置を設置。

次に、乾燥した魚の混合物を、粗いフリットディスクの底が付いたガラスの指ぬきに加えます。サンプルに使用したビーカーに、ヘキサン50%とクロロメタン50%のプレミックス溶液150ミリリットルを加え、ビーカーの壁を削りながら攪拌します。スパチュラで溶媒をソリットの上部に移し、ソリットを通ってフラスコに循環させます。

前の手順を繰り返した後、付属のフラスコで火をつけた靴下を発熱体に置き、コンデンサーを取り付けます。次に、発熱体をオンにして、溶媒を穏やかに沸騰させます。次に、溶媒を最低16時間抽出し、凝縮器に冷水が供給されていることを確認します。

溶媒が冷えたら、サンプルフラスコに水が含まれているかどうかを確認します。水が入ったフラスコは、硫酸ナトリウムを加え、水が吸収されるまで渦巻きます。これに続いて、窒素サンプル濃縮器を使用してサンプルを濃縮します。

サンプルの容量が2ミリリットル未満になったら、サンプルを5ミリリットルの容量フラスコに移します。次に、ヘキサンを5〜7回少量洗浄して、前のガラス器具からの残留サンプルをメスフラスコに移すことにより、最終容量を5ミリリットルにします。この時点で、サンプルを10ミリリットルのバイアルに移し、サンプル情報でラベル付けします。

100グラムの活性シリカゲルに44グラムの濃硫酸を加えて酸性化シリカゲルを調製します。次に、10グラムの酸性化シリカゲルを、底にグラスウールの小さな栓が入った小さなクロマトグラフィーカラムに加えます。10ミリリットルのヘキサンでカラムを予備洗浄した後、1ミリリットルのサンプル抽出物をそれに加え、20ミリリットルのヘキサンでカラムを溶出し、先細りの20ミリリットルのガラス管にサンプルを回収します。

次に、ガラス管を窒素の流れの下にある窒素蒸発器またはNVAP装置に置き、お湯に浸します。サンプルが1ミリリットル未満に濃縮されたら、1ミリリットルのメスフラスコに移します。次に、ヘキサンを2〜3回少量洗浄して、残留サンプルをチューブからメスフラスコに移すことにより、最終容量を1ミリリットルにします。

これに続いて、サンプル情報をラベル付けした1.8ミリリットルの自動サンプラーバイアルにサンプルを移します。適切な内部標準(この場合はデカクロロフェンネル)をバイアルに4マイクロリットル加えます。適切な標準器を使用して、機器を校正します。

次に、クロマトグラフィー質量分析システムを、水素をキャリアガスとして1分間に1ミリリットル、試薬ガスとしてメタンを使用して、負の化学イオン化モードにセットアップします。DB XLBを0.25でコーティングしたフューズドシリカキャピラリーカラムを使用してください。分離のためのマイクロメートルの膜厚。

スプリットインジェクションモードを使用して、サンプルの1〜2マイクロリットルを注入します。この時点で、炭素13とラベル付けされたDECAクロロbフェンネルを使用した内部標準法により、すべての標準とサンプルを分析します。2 番目のソース標準試料と Arrow Chlor 1242 および 1260 を実行して初期キャリブレーションのチェックを行い、次に arrow chlor 同族体の予測値とこのチェック手順で観察された量を比較します。

初期キャリブレーション手順が正常に完了したら、すべてのサンプルの分析を完了します。最初のキャリブレーションのキャリブレーション混合物のいずれかを使用して、10サンプルごとにキャリブレーションチェックを実行します。トレ湖のマスは、最初の湖のマスとして大幅な成長を示しました。

平均重量は694〜907グラムの範囲でしたが、最終的なレイクトラウトの平均重量は853〜1,566グラムの範囲でした。レイクトラウトの平均PCB同族体濃度は、実験中にすべてのPCB同族体について増加しました。活動的なレイクトラウトの平均正味栄養移動効率は、活動していないレイクトラウトと有意差はありませんでした。

活動的なレイクトラウトは、75のPCB同族体のうち66の非アクティブなレイクトラウトとほぼ同じ効率で消費した食物からのPCB同族体を保持しました。正味の栄養移動効率の平均推定値に関する標準誤差は、他の9つのPCB同族体のうち6つで小さかった。正味栄養移動効率の平均推定値に関する標準誤差はかなり低く、塩素処理の程度が増加するにつれて正味栄養移動効率の推定値がわずかに低下した。

しかし、正味の栄養移動効率は、PCB同族体の塩素化の程度が大きくなるにつれて大きく変化せず、log KOWが増加するにつれて、正味の栄養移動効率は指数関数的に低下した。この減少率はゼロとは有意に異なりましたが、丸太KOWの単位あたり7%に等しくなりました。このビデオを見た後、OUS魚に天然食品を与える実験室実験を使用して、獲物からOUS魚へのCB同族体の正味栄養移動効率を推定する方法を十分に理解しているはずです。

ヘキサンやジクロロメタンなどの有機溶剤での作業は危険な場合があり、この手順を実行するときは常に適切な換気などの予防措置を講じる必要があることを忘れないでください。