新生豚のリンパ節の腸リンパトランクやコレクションの長期カテーテル法

私たちは、遠心性リンパ液から大量の脂質代謝成分を採取するために、新生児ブタの腸管リンパ幹をカテーテル挿入する外科的処置を提示します。

リンパ管カテーテル法は、脂質代謝や薬物代謝、がんの転移、免疫機能に関与するメカニズムを調べるために使用される重要な技術であり、さまざまな動物モデルから大量のリンパ液を採取することで、研究者はこれらのプロセスを研究することができます。このビデオでは、腹側正中線アプローチを使用して新生児ブタの腸管リンパ幹をカテーテル挿入するために採用された外科的処置を詳細に示しています。すべての手続きは、アルバータ大学施設の動物管理および使用委員会によって承認されました。

リンパ管にアクセスするために、腹腔が開かれました。カット設定の電気焼灼は、筋肉層を開くために使用されました。手術期間中、腹壁を開いたままにするために、リトラクターを配置しました。

主要な腹部臓器は、リンパ管の局在化を助けるために特定されています。リンパ管へのアクセスを改善するために、小腸と結腸のセグメントは体の左側に外部化されています。リンパ管は、肝臓と門脈の右腹側セグメントを特定することによってランドマーク

新生児ブタでは、リンパ管は繊細で引き裂かれやすいため、綿棒と鈍器による細心の注意を払った解剖が必要です。これが腸のリンパ管です。現在、縫合糸は鈍い鉗子でリンパ管の下に通過しています。

現在、リンパ管の下に3つの2-0シルク縫合糸が通っています。尾側縫合糸は、血管を拡張し、カテーテルを血管に固定するために使用されます。頭蓋縫合糸は、カテーテルを血管内に固定するために使用されます。

リンパ管を小さく切開することで、鈍い鉗子で血管を拡張することができます。カテーテルを血管に挿入します。これは、リンパ管が裂けないように穏やかに行う必要があります。

カテーテルは、しっかりと固定されるように、頭蓋の最も縫合糸を超えて進める必要があります。3つの2-0シルク縫合糸がカテーテルをリンパ管に固定します。重要なのは、最初に2つの頭蓋縫合糸を使用してカテーテルを血管に固定し、次に尾側のほとんどの縫合糸を使用してカテーテルをつなぎ、安定性を高めることです。

腹腔を閉じる前に、リンパの流れが良好であることを確認することが重要です。カテーテルは、ブタの左中央脇腹に外部化されています。大きな鉗子を使用して、カテーテルを腹腔からブタの脇腹の外面に引っ張ります。

筋肉層は、単純な中断縫合パターンで先細りの針に2-0ビクリル縫合糸で閉じられます。皮膚は、ランニング皮下縫合パターンの切断針に2-0ビクリル縫合糸で閉じられます。出口切開により、カテーテルは皮膚を通過し、巾着縫合パターンの切断針に2-0ナイロン縫合糸で閉じられます。

この閉鎖は、カテーテルに沿って内側に追跡する上行感染を防ぐのに役立ちます。リンパ採取ボトルを保持するジャケットは、豚がまだ麻酔下にある間に豚の上に置かれます。カテーテルを採取ボトルに挿入し、ブタを目覚めさせる前に良好なリンパの流れを確保します。

ブタは手術からよく回復し、実験中も良好なリンパの流れが維持されます。この表は、リンパ管から採取されたリンパ液の成分を示しています。これらの成分には、アポリポタンパク質B48、トリグリセリド、コレステロールが含まれます。

ウェスタンブロットの図は、採取したリンパサンプル内にアポリポタンパク質B48と少量の血漿由来アポリポタンパク質B100の両方が存在することを示しています。若いブタのリンパ管カテーテル法は、リンパ管が繊細で砕けやすいため、技術的に困難な場合がありますが、このビデオは、若いブタに適切で慎重な外科的技術を使用することで、研究者が腸内リンパを採取するための優れたモデルを提供できることを示しています。