Co-immunoprecipitation Assay for Studying Functional Interactions Between Receptors and Enzymes

Michael Peled; Marianne Strazza; Adam Mor

doi:10.3791/58433

JoVE Journal
Immunology and Infection

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JoVE Journal Immunology and Infection

Co-immunoprecipitation Assay for Studying Functional Interactions Between Receptors and Enzymes

受容体と酵素間の機能的相互作用を研究するため Co 免疫沈降分析

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09:40 min

September 28, 2018

DOI: 10.3791/58433-v

Michael Peled¹, Marianne Strazza², Adam Mor²

¹Pulmonary Department,The Chaim Sheba Medical Center, ²Columbia Center for Translational Immunology, Department of Medicine,Columbia University Medical Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ここでは、co 免疫沈降法及び酵素採用し酵素活性細胞膜受容体の特定のタンパク質ドメインの貢献を同時に勉強するビーズの酵素活性測定のためのプロトコルを提案する.

この方法は、受容体酵素相互作用および酵素活性化における異なるタンパク質ドメインの重要性など、細胞シグナル伝達分野における重要な質問に答える手助けとなる。この技術の主な利点は、受容体酵素相互作用の併用試験と酵素活性に対するこの相互作用の機能的影響を可能にすることです。各プレートに対して、10%FBS と 1%ペニシリンおよびストレプトマイシンを補った DMEM の 10 ミリリットルを使用してください。

トランスフェクションの前日、ヒト胚性腎臓293-T細胞をヘモサイトメーターを使用して12個の10センチメートルプレートに播種して細胞を数える。5%C02で摂氏37度でインキュベートします。細胞が80〜90%コンフルエントになったら、脂質ベースのトランスフェクション剤を使用して5枚のプレートをトランスフェクトする。

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