Name: NlsGPS1 蛍光共鳴エネルギーを使用して可視化、細胞ジベレリン レベル移動 (FRET) バイオ センサー (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-12T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 53 s
Description: 学ぶFRETバイオセンサーnlsGPS1を用いてArabidopsisの細胞内ジベレリン動態を可視化・定量化する方法。この技術は植物成長調節とホルモンシグナル伝達研究に貢献します。

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この作品は、ホライゾン 2020年欧州連合の研究と技術革新 (グラント契約 n ° 759282) プログラムの下で欧州研究会議 (ERC) からの資金を受けています。

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フレット ベースがバイオ センサー nlsGPS1 は、報告し、ジョージア州多細胞植物ホルモン勾配を測定する定量法を提供します。Fret バイオ センサーは質量と転写記者やシグナル伝達タンパク質分解法12、によって間接測定による直接検出を改良された時空間分解能でダイナミクスを定量化できます。 13。多様な組織型で高解像度の細胞イメージングは、多細胞における GA 蓄積機能と規制に関する生物学とスパークの新しい仮説 GA に有意義な洞察力をもたらすことができます。たとえば、特定 GA 生合成、異化、およびトランスポートの変異だけでなく時空誘導摂動中に nlsGPS1 バイオ センサーの変化を監視できない可能性があります特に GA グラデーションの確立方法でテストするのには非常に有益ルート アドレスのルートは GA グラデーション レスポンスを細胞します。センサーは、種子の発芽、細胞伸長および開花の GA を介した制御機構の保全をテストする他のモデルと作物の種で使用できます。
NlsGPS1 バイオ センサーの fret イメージングで重要な手順は、1) ピクセル、定量的解析中に飽和してはいない、「検出器ゲイン」など 2) 撮像パラメーター必要がありますドナー排出 (DxDm) 一定とアクセプター発光 (DxAm) 買収、3) nlsGPS1 NR の制御線は工芸品と 4 を除外する使用する必要があります) のサンプルを用意する必要があるドリフトと焦点変動問題を最小限に。また、サンプルの育つ環境条件は GA レベル光期間および光強度14,15,16 などの環境条件に敏感であるために制御することが重要、17。このタイプの分析の重要な制限は、高い信号対雑音比がレシオ イメージングに固有のノイズの増加に伴いイメージングに必要なことです。したがって、nlsGPS1 イメージングは組織とシアンと黄色蛍光タンパク質を用いたレシオ メトリック蛍光顕微鏡に従順ではない臓器に便利されません-たとえば、深部組織の蛍光タンパク質が検出された悪い。その一方で、レシオ メトリック読み出し頻繁より優先されます intensiometric 情報読み出し装置、内部統制は、バイオ式、安定性、明るさ、または特定のセル、組織における信号検出能の変化に起因する工芸品を排除する役に立つので、または条件。たとえば、バイオ イメージングをフレットし、画像解析は、様々 な組織5,6,18,19,20,における配位子の様々 な研究に使用されています。イメージング実験と画像解析をここで報告は、光シート顕微鏡など深いルート組織型で新しい洞察力をもたらすことが可能など、新しい撮像方法に合うように変更できます。
第 1 世代の nlsGPS1 バイオ センサーは、外因性 GA 治療に続くジョージア州の細胞内の増加にも報告できる GA 勾配の高解像度のマップを提供高親和性センサーです。NlsGPS1 の現在の限定の 1 つは、センサー急速に戻すことはできませんし、したがって、定常状態のジョージア州レベルではなく、可能性があります興味のソリューションで最大最近 GA 濃度を報告です。センサーの正確な離職率はまた低可逆性と組み合わせていない知られていると、この起こっている可能性が内因性の GA 光線の検出を排除するいくつかの組織型で数時間に数分以内。その nlsGPS1 はジョージア州4に高い親和性を注意してください重要です (Kd = 24 nM) ジョージア州の他の形態と比較して (GA3 Kd= 240 nM、GA1Kd = 110 nM) その他の活性ガスをイメージングするとき7. 高い親和性を維持しながらの可逆性を増加するまたはさまざまな前駆物質、生理活性物質、またはガスの分解生成物の異なる特異性を展示する GA バイオ センサーの未来の世代を設計することができます。

植物ホルモンは植物の成長と開発の基本的な役割を果たします。これらの小型の可動式シグナリング分子は通常生合成、代謝、短距離と長距離輸送1,2,3,4など、いくつかのレベルで調整されます。長年にわたりホルモン シグナル伝達経路と下流の転写反応の理解を削っています。ただし、ホルモン分布の監督規制の入力を持つホルモン シグナル伝達経路の多様な細胞応答をリンクする細胞スケールでホルモン レベルの時空間的定量化が必要です。植物ホルモンを検出することができますフレット ベースのバイオ センサーは、細胞規模でホルモンのレベルを定量化する科学者の能力を進めることができます。Fret バイオ センサーは、特定リガンドの結合または生物学的刺激に応答する感覚のドメインにリンクされているフレット ペア (ドナーとアクセプタの蛍光タンパク質) で構成されます。小分子バイオ センサーのリガンドは、距離・方向をフレットのペアの 2 つの蛍光蛋白質間の変化の結果感覚ドメインの構造変化をトリガーします。FRET バイオ センサーのレシオ メトリック解析は、エキサイティングなドナーとドナー5,6受容体の蛍光放出比を測定によって行われます。リガンドはこの排出量比7の変化として検出します。
我々 は最近植物ホルモン ジョージア州ガス、種子の発芽、細胞伸長および開花段階に植物から発達の移行を促進することができますホルモンのクラスの fret バイオ センサーを開発しました。NlsGPS1 バイオ センサー核はローカライズし、多様な植物組織における ga に時空間の洞察を提供します。シロイヌナズナ細胞 GA 可溶性受容体、ジベレリンを区別しないドワーフ (GID) にバインドし、複雑な della GA2をシグナル伝達の負の制御因子としての劣化を誘発します。NlsGPS1 の GA 感覚ドメイン ・ デッラ ・蛋白質 (AtGAI) の 74 アミノ酸切り捨てにリンクされているシロイヌナズナGA 受容体 (AtGID1C) で構成され、フレットのペアから成る強化ドナー蛍光タンパク質としてセルリアンの二量体化亜種とアフロディーテ (コドン多様ヴィーナス) 受容体蛍光タンパク質8として。NlsGPS1 バイオ センサーは生理活性の GA4高親和性センサー (Kd = 24 GA4nM) 多様な組織型をマップし、GA グラデーションを定量化で利用できます。生体内でのシロイヌナズナジョージア州レベルの誤解を避けるためには、また nlsGPS1 の応答していないバリアントを開発しました (nlsGPS1 NR) ネガティブ コントロールとして使用します。NlsGPS1 NR タンパク質は、ジョージア州の結合を妨げる GA 結合ポケットの変異と GID 受容体タンパク質7,9との相互作用を妨げる・ デッラ ・蛋白質の変異を運ぶ。放射比パターンまたは nlsGPS1 と nlsGPS1 NR の線で観測された変化は工芸品 GA 結合イベントに直接関連しない考えられます。GA4 nlsGPS1 バインドが、急速に元に戻せる状態ではありません、したがって、細胞 nlsGPS1 排出量比はリアルタイムではなく、与えられた核の GA の最高最近集中を表すと解釈すべきことを注意してもです。定常状態レベル。結果として、落下のジョージア州レベルの解析は nlsGPS1 とできません。
ここで細胞モデル植物シロイヌナズナ、共焦点イメージング ベースのアプローチを使用して、高解像度の nlsGPS1 バイオ センサーを利用するための詳しいプロトコルを提供します。プロトコルでは、イメージングの植物の根と胚軸で定常状態と時間コースの両方について説明します。NlsGPS1 センサーはマップ、GA 分布を定量化し、植物の間でだけでなく、多様な組織型で利用される可能性があります。

<table><tbody><tr><td>nlsGPS1 Col0 シロイヌナズナの種子</td><td>NASC</td><td>N2107734</td><td></td></tr><tr><td>nlsGPS-NR Col0 シロイヌナズナの種子</td><td>NASC</td><td>N2107735</td><td></td></tr><tr><td>ジベレリン A4 (GA4)</td><td>Σ</td><td>G7276</td> は <td>EtH 70% に溶解し、-20 °C に保ちます。C</td></tr><tr><td>次亜塩素酸ナトリウム溶液(漂白剤)</td><td>フィッシャー S/5040</td><td>HSRA 064</td><td></td></tr><tr><td>水素クロライドHCl</td><td>Sigma</td><td>31434</td><td></td></tr><tr><td>マイクロポアテープ</td><td>3M</td><td>1530-1</td><td></td></tr><tr><td>イビディ スティッキースライド</td><td>イビディ</td><td>81128</td><td>ルアー 0.1 ルートイメージング用</td></tr><tr><td>イビディ スティッキースライド</td><td>イビディ</td><td>80168</td><td>ルアー 0.2 胚軸イメージング用</td></tr><tr><td>粘着性スライド用ガラスカバースリップ</td><td>イビディ</td><td>10812</td><td></td></tr><tr><td>エルボールアーコネクタ</td><td>イビディ</td><td>10802</td><td></td></tr><tr><td>シリコーンチューブ</td><td>イビディ</td><td>108401</td><td></td></tr><tr><td>ルアーロックコネクタ</td><td>イビディ</td><td>10826</td><td></td></tr><tr><td>プログラマブルシリンジポンプ</td><td>ワールドプレシジョンズ</td><td>AL-1000</td><td></td></tr>真空<tr><td>グリース</td><td>シグマ</td><td>18405</td><td></td></tr><tr><td>Murashige and Skoog Basal Salts</td><td>Duchefa</td><td>M0221</td><td></td></tr><tr><td>寒天植物、1 kg</td><td>Melford</td><td>P1001</td><td></td></tr><tr><td>顕微鏡スライド グランドエッジ、76 mm x 26 mm、厚さ 1.0 mm から 1.2 mm</td><td>フィッシャーサイエンティフィ</td>ック <td>12383118</td><td></td></tr><tr><td>カバースリップ No.1 1/2 ガラス 22 mm x 22 mm</td><td>フィッシャーサイエンティフィ</td>ック <td>12363138</td><td></td></tr><tr><td>ルアースリップ シリンジ 20 mL</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td></td><td></td>10785126</tr><tr><td>3M Micropor 外科用ペーパー テープ</td><td>フィッシャー サイエンティフィ</td>ック <td>12787597</td><td></td></tr><tr><td>水酸化カリウム、500 g</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>221473-500G-D</td><td></td></tr><tr><td>無水エタノール</td><td>フィッシャー サイエンティフィ</td>ック <td>10428671</td><td></td></tr><tr><td>鉗子 時計職人 5 StSteel</td><td>科学研究所用品</td><td></td> INS4340 <td></td></tr><tr><td>はさみ、125 mm、ステンレス鋼</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>12338099</td><td></td></tr><tr><td>フィッティングレデューサー0.5〜1.6</td><td>Ibidi</td><td>10829</td><td></td></tr><tr><td>Leica SP8</td><td></td><td></td><td>共焦点レーザー顕微鏡 1</td></tr><tr><td>Zeiss LSM 780</td><td></td><td></td><td>共焦点レーザー顕微鏡 2</td></tr><tr><td>Imaris</td><td>Bitplane</td><td></td><td>3D視覚化および分析ソフトウェア</td></tr><tr><td>フィジー</td><td></td><td></td><td>画像分析ソフトウェア</td></tr><tr><td>OriginPro</td><td>Origin Lab</td><td></td><td>統計分析ソフトウェア</td></tr></tbody></table>

nlsgps1 蛍光共鳴エネルギーを使用して可視化、細胞ジベレリン レベル移動 (fret) バイオ センサー

Visualizing Cellular Gibberellin Levels Using the nlsGPS1 F&#246;rster Resonance Energy Transfer (FRET) Biosensor

植物ホルモンのジベレリン (GA) 植物の種子の発芽、細胞伸長と発達的変化に重要な役割を果たしている小型の可動式シグナル伝達分子であります。ジベレリン認識センサー 1 (GPS1) は、最初の蛍光共鳴エネルギー移動 (FRET)-バイオ センサーの開発生体内で細胞のジョージア州レベルの監視を可能にします。核局在 GPS1 (nlsGPS1) の蛍光放出比を測定することにより様々 な組織における内因と外因に指定された GA 勾配の時空間マッピングは、細胞規模で可能です。このプロトコルは、3 例の実験における nlsGPS1 放出比をイメージする方法を説明します: 定常状態前に、と後ジベレリン A4 (GA4) 治療と治療の経過。我々 は、フィジーと商業の三次元 (3 D) 顕微鏡可視化と解析ソフトウェアを使用して nlsGPS1 排出量比を分析し、制限とジベレリン レベルを定量化する nlsGPS1 を使用しての可能性がある落とし穴を説明するメソッドもあります。

NlsGPS1 を使用すると、ルート ヒントや暗所で育てた胚軸 (図 2) などの蛍光イメージングに従う組織の細胞の GA4レベルを測定することが可能です。シロイヌナズナの根の nlsGPS1 排出量比グラデーションは分裂および部門ゾーンで低 GA レベルと後半の伸びゾーン (図 2 aおよび2 b) GA 高値を表しています。対照的に、放出比グラデーション内生 GA グラデーションが (図 2および2 D) アーチファクトではないことを示唆している nlsGPS1 NR 根で観察されなかった。NlsGPS1 排出量比グラデーションも暗所で育てた胚軸、子葉と根尖部のフックで低レベルと高レベル (図 2 eおよび2 f) 胚の急激に伸長の基底部に形成されました。対照的に、放出比グラデーション (図 2と2 H) nlsGPS1 NR 胚軸で観察されなかった。シロイヌナズナ根と暗所で育てた胚細胞内生 GA の蓄積は細胞の伸長速度と相関。
さらに、外指定された GA4蓄積優先的にシロイヌナズナ根 (図 3)、分裂帯と比較して伸長帯で内因性と外因性 GA を勉強するその nlsGPS1 を使用することができますを示すパターニング。
時間コース実験、nlsGPS1 の苗が粘着性があるスライド室に置かれ、¼ MS 液で灌流中に GA4 30 分間を 0.1 μ m 処理が続きます。ビデオは、分裂帯 (ビデオ 1) に比べて根伸長域の外因性 GA4の高速蓄積を示しています。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58739/58739fig1.jpg"> 図 1: 共焦点イメージングのための試料調製します。これらのパネル表示サンプル準備定常実験、(B) (A) 前に、と後外因性 GA4治療、および治療時間コース実験 (C) を使用するための概略図粘着性があるスライド (C)。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58739/58739fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58739/58739fig2.jpg"> 図 2:シロイヌナズナの根と胚軸の暗所で育てたジョージア州グラデーションします。ImageJ のソフトウェアを使用して nlsGPS1 (A) と (C) nlsGPS1 NR 根の二次元画像を分析し、nlsGPS1 (B) と (D) nlsGPS1 NR の三次元三次元商業を用いて分析を行いました画像解析ソフト。両方の分析は、シロイヌナズナの根の勾配の内因性の GA4を示した。ImageJ のソフトウェアを使用して (E) nlsGPS1 (G) nlsGPS1 NR 暗所で育てた胚軸の 2次元画像を分析し、(F) nlsGPS1 (H) nlsGPS1 NR の三次元イメージを行った、市販の三次元画像解析ソフトウェア。両方の分析は、内因性の GA4暗所で育てた胚軸勾配を示した。LUT バー nlsGPS1 排出量比の偽色が表示されます。YFP 画像は式コントロールとして報告されます。2 段階位置を使用して胚画像に買収されました。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58739/58739fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58739/58739fig3.jpg"> 図 3: 根の外因性 GA グラデーションします。最初 2 つのパネルを (A) 二次元と前に nlsGPS1 ルートと外因性 GA4 (1 μ M) の治療後 20 分 (B) 三次元画像。YFP 画像は式コントロールとして報告されます。最後の 2 つのパネルの表示 (C)、平均と標準偏差と伸長帯 (白枠と定義されている地域) の核の nlsGPS1 排出量比率の (D) beeswarm、ボックス プロット。GA4治療後 nlsGPS1 排出量比率は有意に高い伸長帯 (マン-ホイットニーの U 検定 * * * P-値 &lt; 0.0001)。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58739/58739fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Video 1" src="/files/ftp_upload/58739/58739movie1.jpg"> ビデオ 1: 粘着性があるスライドを使用して、nlsGPS1 ルートの灌流実験。このビデオは、nlsGPS1 ¼ MS 液で灌流、30 分の 0.1 μ M GA4で治療における三次元画像を示しています。イメージング時間コースで以下の間隔で 3 時間 10 分毎に買収された: モック ソリューションの 30 分 ( tをフレーム = 1、 t = 2 t = 3)、GA4治療の 30 分 (フレームt = 4、 t = 5、 t = 6)、モックの 2 h ので箇所 (フレームのt = t 7 = 18) ソリューション。買収前にサンプルあったモック 2 h.<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58739/Movie1.mov" target="_blank">このビデオを表示するのにはここをクリックしてくださいソリューションで灌流。(右クリックしてダウンロード)</a>

ジベレリン認識センサー 1 (GPS1) は最初蛍光共鳴エネルギー移動に基づくバイオ センサー ジベレリン植物生長ホルモン高時空間解像度の携帯電話のレベルを測定するため。このプロトコルは視覚化し、シロイヌナズナの胚軸と根の遺伝的コード化 nlsGPS1 バイオ センサーを用いた細胞ジベレリン レベルを定量化する手法について報告します。

NlsGPS1 蛍光共鳴エネルギーを使用して可視化、細胞ジベレリン レベル移動 (FRET) バイオ センサー

The phytohormone gibberellin (GA) is a small, mobile signaling molecule that plays a key role in seed germination, cellular elongation, and developmental ...

この方法は、成長調節フィトホルモンの分布に関する植物開発分野の主要な質問に答えることができます。.ジベレリンを検出する例えばnlsGPS1の遺伝的にコードされたFRETバイオセンサーを用いることによって、細胞液におけるシロイヌナプシス組織における重要な化合物の動的分布を測定することができる。一般的に、FRETバイオセンサーを分析するには、意図メトリックイメージングと比較してノイズと追加の分析ステップを増加させるレシオメトリックイメージングが含まれるため、この問題に新しい個人は苦労します。まず、約20種の殺菌したシロイヌナズナの種を1/2のムラシゲとスクーグまたはMS寒天広場プレートにまきます。プレートを細孔外科テープで密封し、成層のために摂氏4度で1〜3日間のインキュベーションのためにアルミニウム箔で包みます。ルートイメージングの場合、示された条件下で3日間垂直方向の成長チャンバーにプレートを移します。暗く成長した低血糖の場合は、発芽を同期させるために1〜4時間の光パルスのためにプレートを成長チャンバーに移します。その後、アルミニウム箔でプレートを包み、3日間垂直に成長室に置きます。定常状態の測定のために、きれいな顕微鏡のスライドに50マイクロリットルの模擬溶液を加え、3つの核局在性ジベレリンの知覚センサー1かnlsGPS1をスライドに静かに置く。その後、きれいなカバースリップの各コーナーに真空グリースを落とし、苗の上に滑りをカバーするために穏やかに置きます。慎重に必要に応じて、任意の気泡を除去するために余分な模擬溶液を追加します。ジベレリン4またはGA4処理の前に、真空グリースで満たされ、1ミリメートルの直径の開口部を備えた修正された200マイクロリットルピペットチップを装備した20ミリリットルのシリンジを使用して、きれいなガラススライドに長さ3.5センチメートルの幅を均一に重ねています。長方形の中央に50マイクロリットルの模擬溶液を加え、きれいな鉗子を使用して、コチレドンの下側で苗を発現するnlsGPS1を持ち上げ、慎重にモック溶液に移します。真空グリースの長方形の中央に実演したように、真空グリースで覆われたカバースリップを置き、苗を邪魔することなく慎重に余分な模擬溶液で貯水池を満たします。その後、エキサイティングなCFPとYFP用の適切なレーザーを搭載した共焦点顕微鏡で苗の画像を取得し、Forster共鳴エネルギー移動イメージングを行います。治療用のGA4の場合は、顕微鏡ステージからスライドを取り外し、タイマーを20分間セットします。カバースリップの右側からモック溶液を直ちに取り外し、1/4MS液体の17マイクロモルGA4をカバースリップの左側に17マイクロリットルを添加し、すべてのモック溶液が交換されるまで取り替えます。次に、ガラススライドを顕微鏡ステージに戻し、さらに10分間待ってから、後のGA4処理画像を取得します。目的の組織のタイムコースを設定するには、200マイクロリットルの模擬溶液をibidi付着スライドの灌流チャネルの中心に追加し、実証したようにnlsGPS1苗をモック溶液にそっと配置します。鉗子を使用して、鉗子の裏側を使用して苗の上にカバースリップをそっと置き、粘着スライドの周囲に粘着性のある材料と強い結合を形成するまで、カバースリップの外側の端をそっと押します。次に、2つの0.8ミリメートル内径エルボーエルルアーコネクタと0.8ミリメートルのシリコーンチューブの内側の直径の部分を使用して、粘着性スライドを模擬溶液で満たされた20ミリメートルのシリンジに接続し、スライドを流出溶液を収集するための出口容器に接続します。気泡がないことを確認するためにチャンバーに十分な溶液を分配するために、プランジャーを静かに押し落とし、プログラム可能なシリンジポンプに注射器をロードします。次に、ポンプを起動してタイムコースを開始します。時間経過中のGA4治療の場合、ポンプを一時停止して灌流を停止し、注射器を含むモックバッファーをGA4で補充された4分の1のMS液体で満たされた注射器に交換します。3D 画像解析の場合は、ファイルを IMARIS 画像解析ソフトウェア プログラムにインポートし、サーフェス ウィザードを開きます。バックグラウンド減算を 3 ミクロンに設定し、しきい値をデフォルトに設定します。核のセグメンテーション中は、近いバックグラウンドレベルのシグナルを持つ物体の信号対雑音の配給がレシオメトリック画像解析には低すぎるため、薄暗い蛍光を有する多くの核を含めないように注意してください。次に、YFP 放出を使用して作成されたサーフェスに基づいて、CFP および FRET 放出チャネルをマスクします。XT平均強度比拡張を使用して、ドナー励起アクセクサ放出の比率を、ドナー励起ドナー放出で割った値を、2つのチャネル内の個々の表面の平均強度値の間で計算する。nlsGPS1 の放出比率で個々のサーフェスを色分けするには、統計情報を使用して色分けを選択し、平均強度比を統計タイプとして設定します。統計アイコンの下で、テーブルから個々の値の比率をエクスポートし、データをグラフィカルに表現するためにスプレッドシートに値をコピーして貼り付けます。シロイヌナズナのルートでは、nlsGPS1の放出比勾配は、有糸学および除算ゾーンにおける低GA4レベルと後期伸長帯の高いGAレベルを示す。対照的に、発光比勾配はnlsGPS1の無応答根では観察されず、内因性GA4勾配はアーティファクトではないことを示唆している。nlsGPS1発光比勾配は、コチルドンの低レベルと、低コチルの急速に伸びる基底領域における典型的なフックおよび高レベルの暗成長した低コチルでも形成される。これに対して、nlsGPS1非応答性低コチルでは発光率勾配は認められない。さらに、外因的に供給されたGA4は、内因性および外因性GAパターニングを研究するためにnlsGPS1を使用できることを示す、シロイヌナズナの分裂ゾーンと比較して伸び帯に優先的に蓄積する。さらに、GA4処理nlsGPS1苗の経時解析は、除算ゾーンと比較して根伸びにおける外因性GA4のより速い蓄積を明らかにする。この手順を試みる間、イメージングパラメータを一定に保ち、サンプルの灌流中のドリフトと焦点変化の問題を最小限に抑えるために、定量イメージング中に飽和ピクセルを避けることを忘れないでください。この手順に従って、ルートチップ型制御拡散装置で成長するイメージングルーツのような、異なる速度で成長するシロイナズナプシスの根先端のGA勾配がどのように変化するか、または開発後のストレスに応じて、この技術は、植物の成長分野における研究の道を開き、追加のアラビナプソピスタリアの組織および器官におけるジベレリンの動的分布を探求する道を開いた。

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Research

JoVE Journal

Developmental Biology

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学ぶFRETバイオセンサーnlsGPS1を用いてArabidopsisの細胞内ジベレリン動態を可視化・定量化する方法。この技術は植物成長調節とホルモンシグナル伝達研究に貢献します。

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