Name: 低密度好中球の効率的な精製のための迅速な磁気マイクロビーズ法 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-11T14:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 14 s
Description: 学ぶ低密度好中球の迅速な磁気マイクロビーズ精製法。密度勾配遠心と磁気分離を組み合わせ、高純度で生存率の高い細胞を効率的に分離できます。全身性エリテマトーデスやがんなどの免疫学研究に応用可能です。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>&nbsp;抗シトルリンウサギ多クローナル抗体</td><td>アブカム</td><td>AB100932</td><td>1/50希釈</td></tr><tr><td>96ウェル組織培養プレート</td><td>共演者;コーニング社</td><td>3596</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 抗ヒトCD11bマウス IgG1抗体</td><td>バイオレジェンド</td><td>301317</td><td>0.25 & μ;g/mL</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 抗ヒトCD66bマウスIgM抗体</td><td>バイオレジェンド</td><td>305109</td><td>0.05 & μ;g/mL</td></tr><tr><td>抗マウスIgG(H+L)ヤギ抗体、Alexa Fluor 488</td><td>インビトロジェン - サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>A-11001</td><td>1/50希釈</td></tr><tr><td>抗好中球エラスターゼマウスモノクローナルIgG1抗体</td><td>サンタクルーズ・バイオテクノロジー</td><td>SC-55549</td><td>10 & micro;g/mL</td></tr><tr><td>抗ウサギIgG(H+L)ロバ抗体、Alexa Fluor 555</td><td>インビトロジェン - サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>A-31572</td><td>1/50希釈</td></tr><tr><td>APC抗ヒトCD62LマウスIgG1抗体</td><td>バイオレジェンド</td><td>304809</td><td>0.03 & μ;g/mL</td></tr><tr><td>APC/シアニン7抗ヒトCD14マウスIgG1抗体</td><td>バイオレジェンド</td><td>367107</td><td>0.25 & μ;g/mL</td></tr><tr><td>Attune NxT フローサイトメーター&nbsp;</td><td>サーモ・フィッシャー・サイエンティフィック社</td><td>(青/赤レーザー)</td><td></td></tr><tr><td>牛血清アルブミン(BSA)フラクションV</td><td>MPバイオメディカル</td><td>810025</td><td></td></tr><tr><td>ブリリアント・バイオレット510抗体抗ヒトCD33マウスIgG1抗体</td><td>バイオレジェンド</td><td>366609</td><td>0.30 & mu;g/mL</td></tr><tr><td>ダピ</td><td>Calbiochem/EMD ミリポア</td><td>268298</td><td></td></tr><tr><td>デクトランT500</td><td>ファーマコスモスエアコン</td><td>5.51005E+11</td><td></td></tr><tr><td>ジヒドロロダミン-123</td><td>アナスペック社</td><td>AS-85711</td><td></td></tr><tr><td>FACSセルソーター</td><td>ベクトン・ディキンソン&nbsp;</td><td>モデルFACSAria</td><td></td></tr><tr><td>胎児用牛血清(FBS)</td><td>ギブコ</td><td>16000-044</td><td></td></tr><tr><td>フィコル・パーク</td><td>メルクKG</td><td>GE 17-1440-03</td><td></td></tr><tr><td>FITC 抗ヒトCD98マウス IgG1抗体</td><td>バイオレジェンド</td><td>315603</td><td>0.30 & mu;g/mL</td></tr><tr><td>フロージョソフトウェア</td><td>ベクトン・ディキンソン</td><td>バージョン10、2019年</td><td></td></tr><tr><td>蛍光倒立顕微鏡</td><td>オリンポス</td><td>モデルIX-70</td><td></td></tr><tr><td>ヘパリン</td><td>Inhepar - PiSA Farmaceutica</td><td>3660149</td><td>5000 UI/mL</td></tr><tr><td>ヘペス</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>H7006</td><td></td></tr><tr><td>MACSprep キメラ CD66b マイクロビーズ</td><td>ミルテニ・バイオテック</td><td>130-111-552</td><td></td></tr><tr><td>マグネット</td><td>ミルテニ・バイオテック</td><td>130-042-102</td><td></td></tr><tr><td>磁気分離カラム</td><td>ミルテニ・バイオテック</td><td>130-042-201</td><td></td></tr><tr><td>マイクロ遠心分離機</td><td>エッペンドルフ</td><td>モデル5415C</td><td></td></tr><tr><td>マイクロプレートリーダー</td><td>バイオテック・インスツルメンツ</td><td>モデルシナジーHT</td><td></td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>158127</td><td></td></tr><tr><td>PE抗ヒトCD10マウスIgG1抗体</td><td>バイオレジェンド</td><td>312203</td><td>0.05 & μ;g/mL</td></tr><tr><td>PE抗ヒトCD16bマウス IgG2a抗体</td><td>BD ファーミンゲン</td><td>550868</td><td>1/40希釈</td></tr><tr><td>PE/シアニン5抗体抗体(CD15マウスマウス)です</td><td>バイオレジェンド</td><td>323013</td><td>0.25 & μ;g/mL</td></tr><tr><td>フォボル12-ミリスタント13-酢酸(PMA)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>P8139</td><td></td></tr><tr><td>ポリLリジン</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>P2658</td><td></td></tr><tr><td>冷蔵遠心分離機</td><td>エッペンドルフ</td><td>モデル5702R</td><td></td></tr><tr><td>RPMI-1640組織培養培地</td><td>ギブコ</td><td>23400-021</td><td></td></tr><tr><td>SYTOX グリーン</td><td>モレキュラー・プローブス社</td><td>S-7020</td><td></td></tr><tr><td>トゥイーン20&nbsp;</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>P2287</td><td></td></tr><tr><td>ベクタシールド</td><td>ベクター研究所</td><td>H-1000</td><td></td></tr></tbody></table>

低密度好中球の効率的な精製のための迅速な磁気マイクロビーズ法

Rapid Magnetic-microbead Method for Efficient Purification of Low-density Neutrophils

健康な人の低密度好中球(LDN)は、PBMCの約5%を占めます(図2A)。ここで説明するプロトコルは、通常、純粋な(&gt; 90%)LDNを提供します。細胞も効率的に回収され(収率約98%)、高い生存率(&gt;95%;図2B)。比較のために、LDNも、前述のように蛍光活性化細胞選別によって精製された22。簡単に言うと、PBMCは抗CD16b抗体で標識され、蛍光活性化細胞選別機で選別されました。LDNを3時間選別し、熱不活化FBSで回収しました(図2)。磁気的に精製された LDN は、好中球と同様の膜分子 (マーカー) を示す成熟細胞です。好中球は、膜マーカーCD10、CD11b、CD15、CD62L、およびCD66bを発現します(図3A)。同様に、磁気単離によって精製されたLDNは、同...

Neutrophils, important leukocytes of innate immunity, have traditionally been considered a homogeneous cell population. Nevertheless, recent evidence has ...

rapid-magnetic-microbead-method-for-efficient-purification-low

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

免疫学と感染症

好中球は炎症性免疫応答のサイトに到着する最初のセルの一つです、そしてその機能とメカニズムをin...

好中球単離プロトコル

このビデオでは、免疫磁気ターゲティングと末梢血単核細胞懸濁液からの分離によってB細胞を精製する方法を説明しています。この方法では、特定の細胞表面タンパク質を標的とする特異的な抗体またはリガンド(磁性粒子に結合)で不要な細胞タイプを標識し、磁気分離によって不均一な細胞懸濁液から枯渇させます。...

ネガティブ免疫磁気選択:末梢血単核細胞からB細胞を精製する方法

このビデオでは、術後のヒト患者の腹膜洗浄液から低密度好中球(LDN)を分離する手順を説明します。このようにして得られたLDNは、腫瘍の成長と進行におけるLDNの役割を理解するために、さらなる下流実験で使用することができます。...

腹膜低密度好中球単離:磁気活性化細胞選別法による腹膜洗浄液からの低密度好中球取得技術

我々は、密度勾配遠心分離によりCellTrackerと染料を用いて好中球標識のマウス骨髄からの好中球の単離および精製のためのプロトコールを述べる。これは、下流の機能研究または養子移入と追跡実験の好中球の多数を取得するための、簡易で、迅速かつ再現性のある経済的な方法を表しています。...

機能研究のためのマウス骨髄好中球と養子移入実験の分離、精製とラベリング

好中球は、侵入する微生物に対する宿主防御だけでなく、腫瘍細胞の免疫監視にも重要な役割を果たしています。ここでは、抗腫瘍特性を持つ好中球の単離に関連する技術と、in vitroおよびin...

抗腫瘍特性を有する好中球の単離とキャラクタリゼーション

好中球は最も豊富な種類の白血球です。ここでは、密度勾配分離法によるヒト血液からの好中球の単離と、顆粒球経路に沿ったヒト前骨髄球(HL60)細胞の分化について説明します。抗リンパ腫薬に対するリンパ腫細胞の感受性に対するそれらの役割をテストするため。...

治療薬にリンパ腫細胞の感度での役割を決定するために、好中球の単離と解析

ロイシンの変異は、リピートキナーゼ2遺伝子(LRRK2)が遺伝性パーキンソン病を引き起こす。我々はヒト末梢血中のRab10のLRRK2制御リン酸化を評価するための容易で、強い方法を開発した。これは、LRRK2キナーゼ経路活性の増加を有する個体を同定するのに役立つ可能性がある。...

Rab10リン酸化を評価してパーキンソン病関連LRRK2キナーゼ経路を尋問するためのヒト末梢血好中球分離

全血、バフィーコート、または白血病膜からの好中球の分離方法を詳述し、良好な収率、高純度、および最小限の細胞活性化を達成する。我々は、精製の勾配、赤血球(RBC)沈殿、RBC溶菌を利用して、高品質/純度好中球製剤を得る。...

全血とバフィーコートからのヒト好中球の分離

この研究では、ラットの骨髄から豊富な好中球細胞外トラップ(NET)を単離するための2つの技術について概説しています。1 つの方法は、市販の好中球分離キットと密度勾配遠心分離を組み合わせたもので、もう 1...

同等の容量を持つラット骨髄好中球を単離するためのユニークなアプローチ

このプロトコルは、バイオバンキングやその他の目的でヒト末梢血単核細胞を単離するためのハイスループット自動化互換の方法を詳述しています。...

ハイスループット免疫磁気ビーズ分離 による バフィーコートからのヒト末梢血単核細胞の単離

ここでは、磁気分離(ネガティブセレクション)と不連続密度勾配培地を使用して、全血から低密度および正常密度の好中球を分離するための信頼性の高いアプローチを提供します。高純度細胞(≥93%)を手つかずで分離し、健康や疾患における好中球亜集団の役割を理解するために重要な、好中球亜集団の正確な下流分析を促進します。...

全血からの低密度および正常密度好中球の単離と特性評価

学ぶ低密度好中球の迅速な磁気マイクロビーズ精製法。密度勾配遠心と磁気分離を組み合わせ、高純度で生存率の高い細胞を効率的に分離できます。全身性エリテマトーデスやがんなどの免疫学研究に応用可能です。

低密度好中球の効率的な精製のための迅速な磁気マイクロビーズ法

さらに動画を探す