Name: 豚脂肪組織から脂肪由来幹細胞および脂肪細胞の効率的な単離 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-05-26T13:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 2 s
Description: 学ぶ豚脂肪組織からのADSC単離法。酵素処理と200Hz正弦波による機械的解離を組み合わせ、約30分で高生存率（80～95%）の細胞を得られます。再生医療研究に有用です。

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<ol><li>Qin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+update+on+adipose-derived+stem+cells+for+regenerative+medicine%3A+where+challenge+meets+opportunity%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci%22%5BJournal%5D)">An update on adipose-derived stem cells for regenerative medicine: where challenge meets opportunity.</a> Adv Sci. 10 (20), 1-27 (2023).</li>
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<li>Cohen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose+tissue+explant+culture+using+PDMS+flow+chambers%3A+an+alternative+to+static+explant+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Adipocyte%22%5BJournal%5D)">Adipose tissue explant culture using PDMS flow chambers: an alternative to static explant culture.</a> Adipocyte. 14 (1), (2025).</li>
<li>Liu, Y., Zhao, H., Yu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+laboratory-based+strategy+for+single+adipocyte+and+adipose-derived+stem+cells+extraction+for+transplantation%3A+an+experimental+research%5BTitle%5D)+AND+%22Aesthet+Plast+Surg%22%5BJournal%5D)">A novel laboratory-based strategy for single adipocyte and adipose-derived stem cells extraction for transplantation: an experimental research.</a> Aesthet Plast Surg. 49, 367-379 (2025).</li>
<li>Tangkanjanavelukul, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cartilage+regeneration+potential+in+early+osteoarthritis+of+the+knee%3A+a+prospective%2C+randomized%2C+open%2C+and+blinded+endpoint+study+comparing+adipose-derived+mesenchymal+stem+cell+%28ADSC%29+therapy+versus+hyaluronic+acid%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Cartilage regeneration potential in early osteoarthritis of the knee: a prospective, randomized, open, and blinded endpoint study comparing adipose-derived mesenchymal stem cell (ADSC) therapy versus hyaluronic acid.</a> Int J Mol Sci. 26 (17), 8476(2025).</li>
<li>Qayyum, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+allogeneic+adipose+tissue-derived+mesenchymal+stromal+cell+treatment+in+chronic+ischaemic+heart+failure+with+reduced+ejection+fraction+%E2%80%93+the+SCIENCE+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Heart+Fail%22%5BJournal%5D)">Effect of allogeneic adipose tissue-derived mesenchymal stromal cell treatment in chronic ischaemic heart failure with reduced ejection fraction – the SCIENCE trial.</a> Eur J Heart Fail. 25 (4), 576-587 (2023).</li>
<li>Arab, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+and+feasibility+of+intravenous+fresh+adipose-derived+mesenchymal+stem+cells+in+secondary+progressive+multiple+sclerosis%3A+phase+I%2FIIa+clinical+results%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Safety and feasibility of intravenous fresh adipose-derived mesenchymal stem cells in secondary progressive multiple sclerosis: phase I/IIa clinical results.</a> Stem Cell Res Ther. 17, 120(2026).</li>
<li>Sheykhhasan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+potential+and+mechanistic+insights+into+adipose-derived+stem+cells+and+mesenchymal+stem+cell-derived+exosomes+in+patients+with+Crohn%E2%80%99s+disease-associated+fistulas%3A+challenges+and+future+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Therapeutic potential and mechanistic insights into adipose-derived stem cells and mesenchymal stem cell-derived exosomes in patients with Crohn’s disease-associated fistulas: challenges and future perspectives.</a> Stem Cell Res Ther. 16, 664(2025).</li>
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<li>Zhu, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+methods%2C+proliferation%2C+and+adipogenic+differentiation+of+adipose-derived+stem+cells+from+different+fat+depots+in+bovines%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">Isolation methods, proliferation, and adipogenic differentiation of adipose-derived stem cells from different fat depots in bovines.</a> Mol Cell Biochem. , (2023).</li>
<li>Benitez, G. J., Shinoda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+adipose+tissue+nuclei+for+single-cell+genomic+applications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation of adipose tissue nuclei for single-cell genomic applications.</a> J Vis Exp. (160), e61230(2020).</li>
<li>Basatvat, S., Bach, F. C., Barcellona, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Harmonization+and+standardization+of+nucleus+pulposus+cell+extraction+and+culture+methods%5BTitle%5D)+AND+%22JOR+Spine%22%5BJournal%5D)">Harmonization and standardization of nucleus pulposus cell extraction and culture methods.</a> JOR Spine. 6 (1), e1238(2023).</li>
<li>Escudero, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scalable+generation+of+pre-vascularized+and+functional+human+beige+adipose+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci%22%5BJournal%5D)">Scalable generation of pre-vascularized and functional human beige adipose organoids.</a> Adv Sci. 2301499, 1-20 (2023).</li>
<li>Mandl, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+organoid+model+derived+from+human+adipose+stem%2Fprogenitor+cells+to+study+adipose+tissue+physiology%5BTitle%5D)+AND+%22Adipocyte%22%5BJournal%5D)">An organoid model derived from human adipose stem/progenitor cells to study adipose tissue physiology.</a> Adipocyte. 11 (1), 164-174 (2022).</li>
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<table><tbody><tr><td>タイプ組織解離キット</td><td>ドクセンス</td><td>TM001</td><td>タイプ組織解離剤(A型溶液)およびタイプ組織解離バッファー(Aバッファー)を含みます。</td></tr><tr><td>脂肪形成分化培地キット</td><td>オリセル</td><td>GUXMD-90031</td><td>脂肪形成の分化に用いられ、高グルコースのデュルベッコ改良イーグルズ培地(未修飾)および維持培地が含まれます</td></tr><tr><td>アリザリン レッド S</td><td>オリセル</td><td>A5533ALIR-10001</td><td>骨成性分化のための鉱化染色(pH 5.2)</td></tr><tr><td>アスコルビン酸</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>A4544</td><td>L-アスコルビン酸、骨形成誘導のための細胞培養試験</td></tr><tr><td>バマ・ミニピッグ</td><td>成都ドーシー実験動物有限公司</td><td></td><td>1歳のオス、SPFグレードの動物が標準化されたワクチン接種、駆虫、清掃手順のもとで飼育されています。https://www.cd-dossy.cn/animalpl_detail/12606067609851863 04.html</td></tr><tr><td>Bio-Rad TC20自動セルカウンター</td><td>バイオ・ラッド研究所</td><td>1450011</td><td>生存可能性と収量評価のための自動細胞カウンター</td></tr><tr><td>ボディピー</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>D3922</td><td>中性脂質染色</td></tr><tr><td>BSA(5%)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>A9418</td><td>ブロッキング用の牛血清アルブミン、凍乾粉末</td></tr><tr><td>カルシトリオール</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>C9756</td><td>1&alpha;,25-ジヒドロキシビタミンD3、骨形成誘導用</td></tr><tr><td>セルシーブ(70 & MU;m)</td><td>コーニング</td><td>352350</td><td>ファルコン70およびミュー;FACSサンプル準備用の無菌M細胞ストレーナー</td></tr><tr><td>セルストレーナー(200 & MU;m)</td><td>プルリセレクト</td><td>43-50200-03</td><td>プルリストレーナー、PETメッシュ、50 mLチューブ、滅菌・無菌装着;</td></tr><tr><td>遠心分離機チューブ(50 mL)</td><td>コーニング</td><td>352098</td><td>Falcon 50 mL 高透明度円錐管、滅菌、ポリプロピレン</td></tr><tr><td>カウントスライド(Bio-Rad TC20用)</td><td>バイオ・ラッド研究所</td><td>1450011</td><td>TC20自動セルカウンター用のデュアルチャンバーカウントスライド&nbsp;</td></tr><tr><td>培養皿(100mm)</td><td>コーニング</td><td>430167</td><td>無菌ポリスチレン皿、吊り下げ型オルガノイド形成用</td></tr><tr><td>デキサメタゾン</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>D4902</td><td>&ge;脂肪形成および骨形成誘導において98%です</td></tr><tr><td>D-ハンクスバランスソルト溶液(PBS)</td><td>ギブコ</td><td>10010015</td><td>予備4度に冷却;C、pH 7.4。</td></tr><tr><td>DMEM</td><td>ギブコ</td><td>11965084</td><td>これは新鮮な分離SVF培養に使用されます</td></tr><tr><td>DNase I</td><td>ビヨタイム</td><td>D7073</td><td>これは任意で、凝固が観察された場合は推奨されます。</td></tr><tr><td>エタノール</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>459836</td><td>表面消毒は75%。</td></tr><tr><td>胎児用牛血清(FBS)</td><td>ギブコ</td><td>A4736201</td><td>テトシステム承認、米国産、無菌・nbsp;</td></tr><tr><td>フローサイトメーター</td><td>BDバイオサイエンス</td><td>BD FACSカントII</td><td>3つのレーザー(405 nm、488 nm、633 nm)、8つの蛍光チャネル、表面マーカー解析用(CD73、CD90、CD11b、CD45)、70 を満たす <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/70464/70464eq1.jpg" style="margin: auto;「/>m ノズル要求、20 psi</td></tr><tr><td>蛍光顕微鏡</td><td>オリンポス</td><td></td><td>FITCおよびDAPIフィルターセットに対応した逆さまたは直立モデル。</td></tr><tr><td>蛍光セカンダリー抗体</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>A-11001(対マウス)、A-11008(対ウサギ)</td><td>免疫蛍光のためのAlexaフルオリュー結合</td></tr><tr><td>フルオロクロム共役抗体(CD73、CD90、CD11b、CD45)</td><td>BDバイオサイエンス</td><td>561254(CD73)、561970(CD90)、557321(CD11b)、555485(CD45)</td><td>ADSC表現型のフローサイトメトリー解析のために</td></tr><tr><td>ヘヒスト</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>H3570</td><td>生細胞/死細胞の評価のための核染色。</td></tr><tr><td>IBMX</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>I5879</td><td>&ge;99%(HPLC)、脂肪生成誘導培地用</td></tr><tr><td>氷のように冷たい無菌生理食塩水</td><td>バクスター</td><td>2F7124</td><td>組織洗浄用0.9%塩化ナトリウム注入(USP)</td></tr><tr><td>インスリン</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>I9278</td><td>酵母で発現する組換え、脂肪形成誘導のためのもの</td></tr><tr><td>ヨードフォール</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>25104</td><td>消毒液2%。</td></tr><tr><td>マトリゲル</td><td>コーニング</td><td>354230</td><td>成長因子を還元し、フェノールレッドフリーで、球状体を埋め込むためにnbsp;</td></tr><tr><td>メタル・バス</td><td>サービスバイオ</td><td>SMB-H</td><td>37 & Cでの孵化に使用。</td></tr><tr><td>オイルレッドO</td><td>オリセル</td><td>OILR-10001</td><td>脂肪細胞分化のための脂質染色</td></tr><tr><td>光学顕微鏡</td><td>オリンポス</td><td></td><td>標準的な明視野顕微鏡(10倍&ndash付き)、40倍の目標。</td></tr><tr><td>骨生成分化培地キット</td><td>オリセル</td><td>GUXMD-90021</td><td>高グルコースのDulbecco's改良Eagle's培地(未修飾)および維持培地を含む骨形成分化に使用されます</td></tr><tr><td>ワイドボアチップを持つP1000ピペット</td><td>ベックマン・カウルター</td><td>B01113</td><td>Biomek P1000 Span-8 ワイドボアチップ、滅菌</td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド(4%)</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>J61899</td><td>オルガノイドの固定には水溶液を用い、nbsp;</td></tr><tr><td>パスツール・ピペット</td><td>コーニング</td><td>7095S-5C</td><td>無菌で使い捨て。</td></tr><tr><td>ペニシリン・ストレプトマイシン</td><td>ギブコ</td><td>15070063</td><td>10,000 U/mL ペニシリン、10,000 & μ;g/mLストレプトマイシン、滅菌&nbsp;</td></tr><tr><td>ペントバルビタールナトリウム</td><td>ヒクマ・ファーマシューティカルズUSA Inc.</td><td>24201-010-20</td><td>安楽死のための注射(体重100mg/kg、静脈内投与)。ANDA 203619&nbsp;</td></tr><tr><td>一次抗体(CD73、CD90、CD11b、CD45)</td><td>BDバイオサイエンス</td><td>561254(CD73)、561970(CD90)、557321(CD11b)、555485(CD45)</td><td>オルガノイド免疫染色のために</td></tr><tr><td>赤血球(RBC)溶解緩衝液</td><td>ソーラービオ</td><td>R1010</td><td>下流の用途で必要であれば。</td></tr><tr><td>冷蔵遠心分離機</td><td>エッペンドルフ</td><td>5702R</td><td>遠心分離の工程に4 & Cで使用。</td></tr><tr><td>ロジグリタゾン</td><td>ケイマン・ケミカル</td><td>71740</td><td>&ge;98%はPPARとガンマ、脂肪生成誘導作動薬</td></tr><tr><td>シャープスコンテナ</td><td>ベクトン・ディキンソン</td><td>305270</td><td>使用済みの刃物とハサミ用の刺し穴に強い容器</td></tr><tr><td>SoniConvert単一セル懸濁液準備システム</td><td>ドクセンス</td><td>SC-L1W</td><td>組織の機械的解離に用いられます。</td></tr><tr><td>染色バッファ(フローサイトメトリー染色バッファ)</td><td>eBioscience(サーモ・フィッシャー・サイエンティフィック)</td><td>00-4222-57</td><td>200mLはすぐに使用可能で、防腐剤としてFBSと0.09%アジドウムを含み、抗体および細胞希釈、フローサイトメトリーでの表面染色および洗浄工程に用いられます。</td></tr><tr><td>無菌1.5mLエッペンドルフチューブ</td><td>エッペンドルフ</td><td>30121.517</td><td>セーフロックマイクロ遠心分離機チューブ、無菌、組織粉砕用</td></tr><tr><td>無菌培養皿</td><td>コーニング</td><td>430167</td><td>100 mm x 20 mm の滅菌培養皿、組織採取用</td></tr><tr><td>滅菌鉗子</td><td>スカラー</td><td>96-1719</td><td>組織取り扱い用、ギザの滅菌親指鉗子;</td></tr><tr><td>滅菌ガーゼ</td><td>ドゥカル市議会</td><td>7060033</td><td>消毒と拭き取り用の滅菌ガーゼパッド</td></tr><tr><td>無菌眼科ハサミ</td><td>スカラー</td><td>10023-580</td><td>Vannasスタイルのスプリングハサミ、組織を1〜2mm&sup3に細かく刻むため;駒</td></tr><tr><td>滅菌カミソリ</td><td>3歳</td><td>9681</td><td>手術部位の脱毛用外科用準備カミソリ</td></tr><tr><td>滅菌メス</td><td>インテグラ・ミルテックス</td><td>4-415</td><td>切開用の滅菌使い捨てメス</td></tr><tr><td>滅菌外科用ハサミ</td><td>スカラー</td><td>10022-580</td><td>メリット無菌アイリスハサミ、血管や結合組織の解離用およびnbsp;</td></tr><tr><td>T25細胞培養フラスコ</td><td>コーニング</td><td>430639</td><td>Falcon T25細胞培養フラスコ、ベンテッドキャップ、滅菌</td></tr><tr><td>トリトンX-100(0.1%)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>T8787</td><td>実験室グレード、透過性用およびnbsp;</td></tr><tr><td>トライパン・ブルー</td><td>Gibco、サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>15250061</td><td>細胞生存率計数の解は0.4%。</td></tr><tr><td>トリプシン-EDTA(0.25%)</td><td>ギブコ</td><td>25200056</td><td>0.25%トリプシン、1 mM EDTA、ADSCの剥離用</td></tr><tr><td>&β;-グリセロリン酸</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>G9422</td><td>ジナトリウム塩五水和物、骨形成誘導用</td></tr></tbody></table>

豚脂肪組織から脂肪由来幹細胞および脂肪細胞の効率的な単離

Efficient Isolation of Adipose-derived Stem Cells and Adipocytes from Porcine Adipose Tissue

Adipose-derived stem cells (ADSCs) have emerged as ideal seed cells in regenerative medicine due to their abundant sources, minimally invasive harvesting, ...

efficient-isolation-adipose-derived-stem-cells-adipocytes-from

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

このビデオは、マウスの大動脈周囲弓脂肪組織から蛍光標識された神経堤由来脂肪由来幹細胞(ADSC)を単離および培養する技術を示しています。単離後、NCADSCsを検出し、蛍光活性化細胞ソーティング法を用いて選別した後、プレート上で培養することで細胞増殖を促進します。...

マウス腹膜脂肪組織からの脂肪由来幹細胞の単離

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マウス腹腔内脂肪貯蔵所からの脂肪形成性および線維炎症性間質細胞亜集団の単離

蛍光活性化細胞選別を用いて、マウス上体脂肪パッドから生存性の高い脂肪前駆細胞を単離する簡単な方法を提示する。...

マウス上端体脂肪組織からの脂肪前駆細胞の調製

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ウォータージェット技術によるブタ脂肪組織由来間質細胞の注入

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インスリン産生細胞への分化のためのラット脂肪組織間葉系幹細胞の単離

このプロトコルは、Sprague Dawleyラットから脂肪組織由来間葉系幹細胞(MSC)を単離および同定するための方法論について説明しています。...

スプレイグドーリーラットの脂肪組織由来間葉系幹細胞の単離と同定

このプロトコルは、マウス脂肪組織から間質血管画分(SVF)を半自動分離して、脂肪前駆細胞を取得し、 in...

組織解離剤を用いたマウス白色脂肪組織からの間質血管画分の半自動単離(英語)

我々は、開発中の主要な造血器官として胎盤を同定した。我々はその造血幹細胞（HSC）が生成され、ユニークな微環境のニッチの胎盤で展開されている両方とも発見。ここで、我々はマウス胎盤における造血幹細胞の分離と可視化に必要な実験手法を説明します。...

プラセンタから造血幹細胞の単離と解析

学ぶ豚脂肪組織からのADSC単離法。酵素処理と200Hz正弦波による機械的解離を組み合わせ、約30分で高生存率（80～95%）の細胞を得られます。再生医療研究に有用です。

豚脂肪組織から脂肪由来幹細胞および脂肪細胞の効率的な単離

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