Summary
توفر تقنيات استثارة محواري أداة قوية لدراسة الفيزيولوجيا المرضية والتغيرات الفيزيائية الأحيائية التي تسبق الأحداث التنكسية لا رجعة فيه. هذه المخطوطة يوضح استخدام هذه التقنيات في العصب الزندي تخديره من الفئران.
Abstract
تمكن الكهربية التقييم الموضوعي لوظيفة الأعصاب الطرفية في فيفو. تدابير التوصيل العصبية التقليدية، مثل السعة والكمون اكتشاف فقدان إكسون المزمنة وديمييلينيشن، على التوالي. تقنيات استثارة محواري "بالعتبة التي تتبع" توسيع هذه التدابير بتوفير المعلومات المتعلقة بالنشاط قنوات أيون ومضخات والمبادلات التي تتصل بوظيفة الحادة وقد تسبق الأحداث التنكسية. على هذا النحو، قد يوفر استخدام استثارة محواري في نماذج حيوانية للاضطرابات العصبية مقياسا مفيداً في فيفو لتقييم التدخلات العلاجية الرواية. هنا يصف لنا إعداد تجريبية لتدابير متعددة لتقنيات السيارات استثارة محواري في الفئران العصب الزندي.
الحيوانات تخديره مع isoflurane ورصدها بعناية لضمان عمق ثابت وكاف من التخدير. يتم باستمرار رصد درجة حرارة الجسم ومعدل التنفس ومعدل ضربات القلب وتشبع الأكسجين في الدم. دراسات استثارة محواري تتم باستخدام التحفيز عن طريق الجلد على العصب الزندي وتسجيل من عضلات هيبوثينار مخلب فوريليمب. مع التنسيب الكهربائي الصحيح، يتم تسجيل إمكانية عمل العضلات مجمع واضحة أن الزيادات في السعة ومع تزايد كثافة التحفيز. ثم يستخدم برنامج الآلي لتقديم سلسلة من النبضات الكهربائية التي تولد تدابير محددة استثارة 5 في التسلسل التالي: تحفيز استجابة السلوك، اليكتروتونوس عتبة العتبة الحالية، قوة مدة وقت ثابت العلاقة ودورة الانتعاش.
البيانات المقدمة هنا الإشارة إلى أن هذه التدابير هي قابلة للتكرار، وإظهار التشابه بين اليسار واليمين الزندية الأعصاب عند تقييمها في نفس اليوم. حد من هذه التقنيات في هذا الإعداد هو تأثير الجرعة والوقت تحت التخدير. ينبغي الاضطلاع برصد وتسجيل هذه المتغيرات للنظر فيها في الوقت لتحليل دقيق.
Introduction
باستخدام تقنيات الكهربية أداة أساسية للتحقيق في فيفو في وظيفة الأعصاب الطرفية في الاضطرابات العصبية. طرق التوصيل العصبية التقليدية استخدام المحفزات سوبراماكسيمال لتسجيل السيارات إمكانات العمل السعة والكمون. ولذلك هذه التقنيات توفر معلومات مفيدة عن عدد إجراء الألياف وعلى سرعة التوصيل من الألياف أسرع. أداة تكميلية قيمة اختبار استثارة محواري. ويستخدم هذا الأسلوب أنماط التحفيز الكهربية متطورة لتقييم الخصائص الفيزيائية للأعصاب المحيطية، مثل نشاط قنوات أيون مضخات تعتمد على الطاقة وعمليات التبادل الأيوني وغشاء المحتملة غير مباشر 1.
ويستخدم اختبار استثارة محواري عادة في الإعداد السريرية للتحقيق في العمليات الفيزيولوجية المرضية وآثار التدخلات العلاجية على مختلف الاضطرابات العصبية. الأهم من ذلك، تدابير استثارة محواري حساسة للتدخلات العلاجية التي تؤثر على وظيفة الأعصاب الطرفية مثل العلاج الغلوبولين المناعي الوريدي (IVIg)2، العلاج الكيماوي المانع (سي)3 وكالسينيورين 4-على الرغم من أن هذه الدراسات قدمت أفكاراً هامة، الدراسات السريرية غالباً ما يحول دون التحقيق في أوائل المرض السمات والخيارات العلاجية رواية5. ولذلك، استخدام هذه الأساليب في نماذج حيوانية من اضطرابات عصبية قد اكتسبت في الآونة الأخيرة الجر6،7،،من89. والواقع أن هذه الأساليب تتيح فرصة لفهم التغييرات استثارة العصب المحددة المرتبطة بهذه الاضطرابات، وبالتالي النهوض بالبحوث متعدية الجنسيات.
الإجراء الموضح هنا طريقة بسيطة وموثوق بها لتدابير استثارة محواري سجل على الأعصاب الزندية للفئران سليمة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
تمتثل للعناية بالحيوان ولجنة الأخلاقيات في سيدني UNSW جميع الإجراءات التجريبية الموصوفة هنا وأجريت وفقا "الوطنية للصحة" ومجلس البحوث الطبية (NHMRC) من لوائح أستراليا للتجارب الحيوانية.
1-التجريبية إعداد
ملاحظة: استخدمت الفئران منذ فترة طويلة-إيفانز الأسبوع 12 من العمر، والنساء في هذا الإجراء.
- تخدير الفئران في دائرة التعريفي لاستخدام إيسوفلوراني 4% و 1 لتر كل دقيقة س2 معدل التدفق. تأكيد التخدير كافية عن طريق اختبار لرد الفعل رايتينج وضمان عدم وجوده قبل إزالة الحيوان من قاعة التعريفي. علما أن مختلف عوامل مخدر آثار تفاضلية على استثارة العصب10.
- أمن مكان آنف الحيوان في المرفق مخروط الآنف وتقديم جرعة صيانة isoflurane 2.5% ول 1 دقيقة س2 معدل التدفق.
- تأكيد التخدير الكافي بالتحقق من انسحاب دواسة وردود الفعل القرنية معسر أصابع الحيوان ولمس بلطف العين.
ملاحظة: تطبيق مرهم البيطرية في العيون، لمنع جفاف بينما تحت التخدير، الموصى به ولكنه ليس أساسيا كما يستغرق الإجراء عادة 30 دقيقة للحيوان الواحد. - الحفاظ على درجة حرارة الجسم من الفئران في 37 درجة مئوية مع استخدام حصيرة تدفئة التغذية مرتدة التي تسيطر ومجس حرارة المستقيم. تعيين حصيرة تدفئة واستشعار درجة حرارة الجسم المتكاملة إلى 40 درجة مئوية، لمنع أي تلف الجلد الذي يحدث مع ارتفاع درجات الحرارة.
ملاحظة: من المستحسن لرصد وتسجيل التدابير الفسيولوجية (معدل ضربات القلب، وتشبع الأكسجين، ودرجة حرارة الجسم ومعدل التنفس) كل 10s باستخدام نظام رصد الفيزيولوجية الحيوانية. ينبغي أن تشمل إجراءات التسجيل الأمثل المحلية قياس درجة حرارة أطرافهم كما يمكن أن تكون درجة الحرارة المحيطية أكثر برودة مقارنة بدرجة الحرارة الأساسية11 (الشكل 1). - ارتداء قفازات مطهر ودائما استخدام الصكوك التي قد تم تنظيف مع الإيثانول 70%، للحفاظ على بيئة خالية من مسببات المرض طوال فترة الإجراءات.
2-الكهربية إعداد
- استخدام أقطاب الإبرة البلاتين للالكهربائي (EEG) مقاومة منخفضة لهذا الإجراء.
- تحضير أقطاب إبرة التسجيل عن طريق إدراج مسرى إبرة تسجيل (الشكل 1؛ الأرجواني المشار إليها في) عن طريق العضلات هيبوثينار ومسرى الإشارة من خلال الجانب الظهرية للرقم 4 (الشكل 1؛ والمشار إليه في أورانج) لتسجيل مجمع العضلات إمكانات العمل (CMAPs).
- مكان القطب الأرضي عن طريق الجلد على الجانب متفوقة من الساعد بين تنشيط وتسجيل كهربائي (الشكل 1؛ الأخضر المشار إليه في). العناية عند إدخال أقطاب كهربائية تفادي أنسجة العضلات.
- تحضير أقطاب إبرة تحفيز عن طريق الجلد بإدراج الكاثود (الشكل 1؛ والمسمى باللون الأزرق) حوالي 4 مم القاصي المرفقي نفق عند الكوع. إدراج اﻷنود (الشكل 1؛ الأحمر المسمى في) 1 سم تقريبا بروكسيمالي عن طريق جلد منطقة أكسيلار.
رقم 1: رسم تخطيطي للمواضع القطب إبرة في فوريليمب الفئران. الكاثود (الأزرق) يتم إدراج القاصي إلى النفق المرفقي عند الكوع حوالي 4 مم ويتم إدراج اﻷنود (أحمر) حوالي 1 سم بروكسيمالي عن طريق جلد منطقة أكسيللار. يتم إدراج مسرى إبرة الأرض (الأخضر) من خلال الجلد على جوانب الساعد بين تنشيط وتسجيل أقطاب متفوقة. تسجيل (أرجواني) والمرجعية (برتقالي) إبرة كهربائية يتم إدراجها عن طريق العضلات هيبوثينار والجانب الظهرية الرقمال 4. يتم وضع مسبار درجة الحرارة (رمادي) على جانب العضلات الرانفه متفوقة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
3-محواري استثارة الإجراءات
- أداء الأعصاب الحركية القوارض بروتوكول تروندنف باستخدام شبه الآلي، الكمبيوتر التي تسيطر عليها استثارة محواري البرنامج (انظر الجدول للمواد) ترتبط مشجعا الحالي مستمر ومكبر للصوت. إزالة الضوضاء الكهربائية 50 هرتز الزائدة باستخدام مزيل ضوضاء تردد 50/60 هرتز.
- تسجيل CMAP من العضلات هيبوثينار في نفس الوقت تصور مورفولوجية CMAP وتطبيق 1 نبضة مربعة-موجه للعصب الزندي مع مسرى إبرة الكاثود.
- لتحقيق الأمثل التسجيلات، وضبط زاوية و/أو موقف الكاثود بعناية حتى منحنى استجابة ثنائية الطور أمثل مع السعة المستمر تحقيق (الشكل 2A.). حالما يتم تحديد الوضع الأمثل، استقرار الكاثود مع حامل ريبوسيتيونابل كهربائي.
ملاحظة: البرامج المستخدمة تلقائياً يسلم المحفزات الاختبار، المبينة أدناه، ويزيد أو يقلل الحالية اللازمة لبلوغ العتبة.
- لتحقيق الأمثل التسجيلات، وضبط زاوية و/أو موقف الكاثود بعناية حتى منحنى استجابة ثنائية الطور أمثل مع السعة المستمر تحقيق (الشكل 2A.). حالما يتم تحديد الوضع الأمثل، استقرار الكاثود مع حامل ريبوسيتيونابل كهربائي.
- تسجيل منحنى استجابة لحوافز بزيادة كثافة التحفيز 1 دفعة ms 1 mA حتى يتم تحقيق استجابة الحد أقصى.
ملاحظة: الخط الأرجواني والأخضر في الشكل 2 (ب) و 2 (ج) يمثل الزيادة التدريجية من شدة التحفيز والنظام الآلي على التوالي. يتم تعيين السعة المستهدفة لعتبة تتبع تلقائياً إلى 40 في المائة السعة القصوى المقابلة لمنطقة المنحدر أشد على منحنى الاستجابة للحوافز. التغيير في 'عتبة' (أي الحوافز المطلوبة للحصول على 40% CMAP) الناجمة عن مختلف المحفزات الاختبار هو المتغير للحصول عليها طوال ما تبقى البروتوكول. - تسجيل المعلمات استثارة محواري متعددة، بما في ذلك عتبة اليكتروتونوس (TE)، العتبة الحالية (أنا/V) العلاقة واستعادة دورة (اتفاقية روتردام) كما هو موضح في مرجع12.
ملاحظة: البرنامج استثارة محواري التي تسيطر عليها الكمبيوتر يقيم العتبة (TE) مع مرض التصلب العصبي المتعدد 100 سوبثريشولد ديبولاريزينج وهايبربولاريزينج التيارات التي تم تعيينها في ±20% و ±40% من عتبة التحكم الحالية. تغيير عتبة بعد التيارات سواء ديبولاريزينج أو هايبربولاريزينج يتم تسجيلها تلقائياً في 14 من النقاط الزمنية خلال 100 مللي الاستقطاب الحالي و 12 نقطة بعد الاستقطاب الحالي. اليكتروتونوس عتبة غير مباشر ويقيم كوندوكتانسيس internodal وهو علامة على غشاء المحتملة. الأول/هو تقييم العلاقة الخامس مع التيارات تكييف سوبثريشولد 200 مرض التصلب العصبي المتعدد أن البديل في كثافة من + 50%-100% من عتبة التحكم في تزايدات 10 في المائة. I/يختلف عن العلاقة الخامس للشركة المصرية للاتصالات حيث أن التيارات أطول في المدة، ويتم تغيير كثافة الاستقطاب تدريجيا من + 50%-100% وتغيير عتبة وتقدر على كثافة كل 1 مللي ثانية بعد الاستقطاب الحالي لم يعد. I/العلاقة الخامس يقدم نظرة ثاقبة تصحيح خصائص إكسون1. يتم تقييم اتفاقية روتردام مع نموذج نبض المزدوجة، حيث يتم تطبيق حافز تكييف سوبراماكسيمال أولى تليها سلسلة من المحفزات الاختبار في فترات زمنية محددة من 2.5 مللي ثانية إلى 200 السيدة اختبارات هذه المعلمة سلسلة محددة من الأحداث التي تحدث العقدي المنطقة من محور عصبي بعد التحفيز سوبراماكسيمال. وتشمل هذه الأحداث، المنظمة قنوات Na+ عن طريق بوابة الجهد الذي يجعل من الصعب أكثر للحصول على رد لاحقة وهو الكمية التي ريفراكتورينيس و الفترة صهر النسبي 1. هذا هو متبوعة تقاضي internode وفترة من زيادة استثارة توسط قنوات البوتاسيوم سريع، كمياً سوبيريكسسيتابيليتي. وأخيراً، التوسط ببطء تفعيل قنوات البوتاسيوم أواخر فترة استثارة مخفضة، كمياً سوبيكسسيتابيليتي.
- تسجيل CMAP من العضلات هيبوثينار في نفس الوقت تصور مورفولوجية CMAP وتطبيق 1 نبضة مربعة-موجه للعصب الزندي مع مسرى إبرة الكاثود.
رقم 2: البيانات الخام من استثارة محواري test. الفريق A يوضح منحنى استجابة CMAP أبيفاسيك بعد الزيادة التدريجية للتحفيز للعصب الزندي. لوحات B و C تمثل الحافز كثافة (mA) والسعة من CMAP (mV)، على التوالي. المكون الأخضر ب وج يصور انخفاض كثافة التحفيز تزايدي الآلي وانخفاض CMAP المطلوبة لعتبة تتبع شكل سينية المرتبطة بها.
4-نشر الإجراءات الكهربية
- نقل الفئران في قفص منفصل حتى قد وعيه كافية للحفاظ على ريكومبينسي القصية. لا تترك حيوان غير المراقب وفي الشركة من الحيوانات الأخرى حتى أنه تعافي تماما من التخدير. بمجرد الفئران تعافي تماما من التخدير، نقل العودة إلى قفصة الأصلي.
- عند الانتهاء من هذه الدراسة، euthanize الفئران دون ألم للحيوان وفتاكة مثل حقن داخل المسكنة التي يصفها الطبيب (مثلاً ليثابارب).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
وتم الحصول على تدابير الكهربية للعصب الزندي الفئران مع هذا البروتوكول. يوضح الشكل 3 ممثل تسجيل من العصب الزندي الأيسر من الفئران "إيفانز طويلة" الإناث 12 أسبوع من العمر. إمكانات العمل مجمع العضلات تتصل بعدد الألياف التي يتم تنشيطها في الوقت نفسه إجراء. رد ذروة سوبراماكسيمال (mV) (الشكل 3 أ) يوضح استجابة ذروة تحقيقه عندما يزداد الحافز بشكل متدرج حتى أن هناك أي تغيير في الاستجابة (الشكل 2).
يمثل الشكل 3B التيار-الجهد (أنا/V) تغيير العلاقة التي تنتجها التيارات أطول في المدة (200 مللي ثانية) وعلى كثافة في تزايدات 10 في المائة من + 50%-100% من الحد الأدنى. I/يقيم العلاقة V التصحيح إلى الداخل وإلى الخارج عن طريق فحص الاختلافات في العتبة الحالية استجابة ديبولاريزينج وهايبربولاريزينج التيارات. المربع السفلي الأيسر يعكس استيعاب تصحيح إلى الداخل لفرط الاستقطاب وتنشيط تصحيح الداخل كوندوكتانسيس1. الربع الأيمن العلوي يعكس تفعيل قناة ك+ سريعة وبطيئة، واستيعاب تصحيح إلى الخارج ديبولاريزينج الحالية.
يمكن فحص كوندوكتانسيس internodal استخدام عتبة اليكتروتونوس الموجي (الشكل 3) استجابة لفترة طويلة سوبثريشولد ديبولاريزينج وهايبربولاريزينج التيارات. وقد هايبربولاريزينج وديبولاريزينج الشركة المصرية للاتصالات على حد سواء المتغيرات التي يمكن أن تحسب بحساب متوسط تغير العتبة بين نقاط زمنية محددة 10-20 مللي ثانية، 20-40 مللي ثانية و 90-100 مللي ثانية.
التغييرات على مر الزمن بسبب الإصابة أو تطبيق التدخلات العلاجية قد يسبب تغييرات معينة إلى معلمات استثارة الأعصاب. وهذا قد توفر معلومات مفيدة في فيفو فيما يتعلق بالتغييرات الفيزيولوجية المرضية والصفات المرض المبكر والفعالية العلاجية في نماذج حيوانية للاضطرابات العصبية.
الشكل 3: مؤامرة ممثل استثارة محواري. (أ) الاستجابة للتحفيز منحنى يصور استجابة ذروة سوبيرماكسيمال (mV). (ب) الجهد الحالي (أنا/V) العلاقة التي تنتجها حافزا استقطاب 200ms تتراوح بين + 50%-100% من الحد الأدنى الحالي. (ج) عتبة اليكتروتونوس التي توضح الطول الموجي استجابة لفترة طويلة سوبثريشولد الاستقطاب الحالي أثارت 20% و 40% ديبولاريزينج (أعلاه 0 على المحور ص) والحالي هايبربولاريزينج (أقل من 0 على المحور ص). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
استثارة محواري متسلسلة اختبار أجرى على فوريليمب الأيسر ثم الأيمن من n = 4 الفئران (12 أسبوع). وأنجزت تسجيلات اليمين واليسار على حد سواء ضمن 35 دقيقة بعد فقدان منعكس سحب دواسة. تم إجراء التحليل باستخدام الاقتران غير حدودي الرتبي الموقعة مرتبة الاختبار. وكشفت هذه التحاليل لم توجد فروق مهمة بين اليسار واليمين الزندية الأعصاب لأي من متغيرات استثارة محواري. تجلى الاتساق في العصب معيار التوصيل المعلمات والسعة CMAP والكمون (الشكل 4 أ وب)، فضلا عن المتغيرات استثارة الأعصاب بما في ذلك سوبيريكسسيتابيليتي وعتبة اليكتروتونوس هايبربولاريزينج (تيه) 90-100 (الشكل 4 ودال). ومع ذلك، أوضحت الدراسات السابقة10 يحدث تغيير كبير في المعلمات بمرور الوقت تحت التخدير إيسوفلوراني (انظر المناقشة).
الشكل 4: يعني التسجيلات (n = 4) الحصول على (ب) زمن الاستجابة (A) ذروة سوبيريكسسيتابيليتي (ج) و (د) هايبربولاريزينج اليكتروتونوس عتبة (90-100ms) في اليسار (أحمر) وحق (أزرق) الأعصاب الزندية. أشرطة الخطأ تشير إلى الخطأ المعياري للوسط (SEM). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
يوضح الإجراء وصف بسيطة وموثوق بها، تقنية مينيملي التي يسمح تقييم الخصائص الفيزيائية-الحيوية وإمكانات غشاء إكسون في فترة قصيرة من الزمن. مقارنة مع تقنيات أكثر الغازية الأخرى، التي تتطلب التعرض للعصب، يستحث الأسلوب الحالي لاختبار استثارة محواري تلف الأنسجة الحد الأدنى مما يمكن في فيفو التقييم أن يحافظ على الظروف الفسيولوجية العصب للفائدة ويسمح للقياسات المتكررة.
لضمان نتائج متسقة هناك هي بعض الاعتبارات المنهجية التي يتعين معالجتها. هو واحد من هذه العوامل بتركيز ونوع من مخدر. وقد ثبت سابقا أن إيسوفلوراني له تأثير على تنشيط فرط الاستقطاب القنوات عن طريق بوابة النوكليوتيدات دوري10. وبدلاً من ذلك، أن خليط مخدر حقن ميديتوميديني والميدازولام وبوتورفانول كان التحقيق وأظهرت أيضا آثار على استثارة العصب على مر الوقت10. ميديتوميديني/الميدازولام/شيفتشنكو (MMF) ويبدو أن يكون لها أثر يذكر على استثارة العصب وتم بنجاح المستخدمة في العديد من الأعصاب استثارة الدراسات7،،من1314، على الرغم من إثارة على مر الزمن على العصب لم يتم التحقيق بشكل منهجي استثارة. من المذكرة، هذا المخدر يصعب الحصول عليها في الولايات المتحدة وأستراليا كما شيفتشنكو مادة خاضعة للرقابة مع أنظمة الاستيراد الصارمة. بغض النظر عن التخدير الذي تم اختياره، الجرعة والوقت تحت التخدير وينبغي بعناية رصد للنظر في التحليل.
عامل آخر للنظر نوعية قطب كهربائي. بسبب هايبربولاريزينج قوية وطويلة والتيارات التي طبقت في استثارة محواري ديبولاريزينج مطلوبة من أقطاب الدراسات ذات جودة عالية. واستخدمت في هذه الدراسة، مقاومة منخفضة أقطاب الإبرة البلاتين للالكهربائي (EEG). أقطاب معاوقة منخفضة عادة ضمن نطاق كيلو أوم واقطاب EEG البلاتين تعمل تقليديا داخل 0.5-5 كيلو أوم النطاق الذي يؤهل كأقطاب معاوقة منخفضة. البرنامج استثارة محواري تسجيل الإخراج الحالي وحساب مقاومة مقابل الهدف من الجهد وأنه قد أنشئت سابقا أنه مستقرة مدة 30 دقيقة، وهو طول نموذجية من هذا البروتوكول15الحالي. بالإضافة إلى ذلك، هذه الأقطاب قد أدخلت مؤخرا في16 من الفئران، ووجد أن لا تكون خاضعة لاستقطاب آثار14،15. ولذلك، ستكون الاستقطاب لا مشكلة أثناء إجراء التجارب.
خلافا للبروتوكولات التي تعرض عصب الفائدة، تستخدم هذه الدراسات نموذجا سليما مما يجعل تحديد المواقع لتحفيز كهربائي التقريبي. وهكذا، قد يكون من الصعب النسخ المتماثل المحدد لموضع القطب في الدراسات الطولية. وبالرغم من ذلك، أظهرت دراسة سابقة مع التخدير المختلفة التكرار جيدة معلمات استثارة العصب الزندي 30/34 عبر ثلاث دراسات منفصلة مشابهة للتي ينظر إليها في الأعصاب قصبي ووالذيليه13. وعلاوة على ذلك، أظهرت مقارنة كمابس اليمين واليسار في هذه الدراسة، الاتساق (الشكل 4)، مما يشير إلى الموضع الكهربائي الدقيق والسليم كاف لتعويض هذا القيد ممكن.
وهناك العديد من الخطوات الحاسمة عملية الحصول على استجابات CMAP. الموضع الصحيح ومتسقة القطب إبرة تحفيز أمر حاسم للقياسات استنساخه من السعة. بالإضافة إلى ذلك، فإنه من الضروري ضمان التنسيب السليم لتسجيل أقطاب الإبرة لتقليل الضوضاء الخلفية. ولذلك، في نفس الوقت تصور منحنى استجابة في حين وضع مسرى إبرة تحفيز أمر حاسم لتأكيد التنسيب متسقة.
استخدام هذه التقنية كسبها في نماذج حيوانية من اضطرابات عصبية قد تكون أداة قيمة للتحقيق في التغيرات الفيزيولوجية المرضية والصفات المرض مبكرا. وقد تعمل كالمؤشرات الحيوية وتسهيل التحقيق في رواية التدخلات العلاجية بالاقتران مع التدابير السلوكية لوظيفة اليد. وعلاوة على ذلك، يمكن التحقق من هذه التقنيات في القوارض التحقيق في علاقات الحرائك الدوائية وميكروبيولوجية لمركبات جديدة. وقد يمكن ترجمة أفضل من المركبات العلاجية قبل المرحلة 1 و 2 من التجارب السريرية
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
Acknowledgments
وأيد المشروع مؤسسة Lundbeck، مؤسسة نوفو نورديسك، المجلس الدانمركي للبحوث الطبية، لودفيج ومؤسسة السس سارة، كاي مؤسسة داهلبومس ومؤسسة البحوث في علم الأعصاب وجايتي. R.A معتمد من قبل "أوائل الوظيفي شواغر الزمالة الوطنية للصحة" و "مجلس البحوث الأسترالي الطبية" (#1091006)
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| QTracS Program | Digitimer Ltd. | Axonal excitability program | |
| AM-Systems 2200, Analog Stimulus Isolator, 2200V/50Hz | SDR Scientific | 850005 | Stimulator |
| High Performance AC Amplifier Model LP511 | Grass Technologies | Amplifier | |
| Humbug 50/60Hz Noise eliminator | Quest Scientific Instruments | 726310 | Noise eliminator |
| Low Impedance Platinum Monopolar Subdermal Needle Electrodes | Grass Technologies | F-E2-24 | Recording electrodes, 10 mm length, 30 gauge |
| Low Impedance Platinum Electroencephalography Needle Electrodes | Cephalon | 9013L0702 | Stimulating electrodes, 10 mm length, 30 gauge |
| Multifunction I/O Device Model USB-6341 | National Instruments | Multifunction input/output device | |
| Iron Base Plate IP | Narishige Scientific Instrument Laboratory | Used for holding stimulating needle electrode in place | |
| Rotating X-block X-4 | Narishige Scientific Instrument Laboratory | Used for holding stimulating needle electrode in place | |
| Magnetic Stand GJ-8 | Narishige Scientific Instrument Laboratory | Used for holding stimulating needle electrode in place | |
| Micromanipulator M-3333 | Narishige Scientific Instrument Laboratory | Used for holding stimulating needle electrode in place |
References
- Krishnan, A. V., Lin, C. S. -Y., Park, S. B., Kiernan, M. C. Axonal ion channels from bench to bedside: a translational neuroscience perspective. Prog neurobiol. 89 (3), 288-313 (2009).
- Lin, C. S. -Y., Krishnan, A. V., Park, S. B., Kiernan, M. C. Modulatory effects on axonal function after intravenous immunoglobulin therapy in chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy. Arch neurol. 68 (7), 862-869 (2011).
- Park, S. B., Goldstein, D., Lin, C. S. -Y., Krishnan, A. V., Friedlander, M. L., Kiernan, M. C. Acute abnormalities of sensory nerve function associated with oxaliplatin-induced neurotoxicity. J. Clin. Oncol. 27 (8), 1243-1249 (2009).
- Arnold, R., Pussell, B. A., Pianta, T. J., Lin, C. S. -Y., Kiernan, M. C., Krishnan, A. V. Association between calcineurin inhibitor treatment and peripheral nerve dysfunction in renal transplant recipients. Am. J. Transplant. 13 (9), 2426-2432 (2013).
- Boërio, D., Greensmith, L., Bostock, H. Excitability properties of motor axons in the maturing mouse. J. Peripher. Nerv. Syst. 14 (1), 45-53 (2009).
- Boërio, D., Kalmar, B., Greensmith, L., Bostock, H. Excitability properties of mouse motor axons in the mutant SOD1(G93A) model of amyotrophic lateral sclerosis. Muscle & Nerve. 41 (6), 774-784 (2010).
- Alvarez, S., Calin, A., Graffmo, K. S., Moldovan, M., Krarup, C. Peripheral motor axons of SOD1(G127X) mutant mice are susceptible to activity-dependent degeneration. Neurosci. 241, 239-249 (2013).
- Fledrich, R., et al. Soluble neuregulin-1 modulates disease pathogenesis in rodent models of Charcot-Marie-Tooth disease 1A. Nat. Med. 20 (9), 1055-1061 (2014).
- Vianello, S., et al. Low doses of arginine butyrate derivatives improve dystrophic phenotype and restore membrane integrity in DMD models. FASEB J. 28 (6), 2603-2619 (2014).
- Osaki, Y., et al. Effects of anesthetic agents on in vivo axonal HCN current in normal mice. Clin Neurophysiol. 126 (10), 2033-2039 (2015).
- Biessels, G. J., et al. Phenotyping animal models of diabetic neuropathy: a consensus statement of the diabetic neuropathy study group of the EASD (Neurodiab). J. Peripher. Nerv. Syst. 19 (2), 77-87 (2014).
- Boërio, D., Greensmith, L., Bostock, H. A model of mouse motor nerve excitability and the effects of polarizing currents. J. Peripher. Nerv. Syst. 16 (4), 322-333 (2011).
- Arnold, R., Moldovan, M., Rosberg, M. R., Krishnan, A. V., Morris, R., Krarup, C. Nerve excitability in the rat forelimb: a technique to improve translational utility. J. Neurosci. Methods. 275, 19-24 (2017).
- Moldovan, M., Alvarez, S., Krarup, C. Motor axon excitability during Wallerian degeneration. Brain. 132 (Pt 2), 511-523 (2009).
- Madison, R. D., Robinson, G. A., Krarup, C., Moldovan, M., Li, Q., Wilson, W. A. In vitro electrophoresis and in vivo electrophysiology of peripheral nerve using DC field stimulation. J. Neurosci. Methods. 225, 90-96 (2014).
- Moldovan, M., Krarup, C. Evaluation of Na+/K+ pump function following repetitive activity in mouse peripheral nerve. J. Neurosci. Methods. 155 (2), 161-171 (2006).
