Summary
Alla ricerca di tumore terapeutiche cellule staminali mesenchimali (MSCs) mostrano la promessa come trattamento per glioblastoma dilagante. Trapianto ottimo coinvolge consegna delle MSC in cavità di resezione del tumore su ponteggi. Qui, preclinici tecniche per studiare il trattamento del MSC di glioblastoma sono forniti tra cui: resezione del tumore immagine-guida; impianto di scaffold MSC-seminato; e terapia postoperatoria di rilevamento.
Abstract
Glioblastoma (GBM), il tumore cerebrale primario più comune e più aggressivo, trasporta un'aspettativa di vita di 12-15 mesi. La breve aspettativa di vita è dovuto in parte all'incapacità del trattamento attuale, che consiste della resezione chirurgica seguita da radioterapia e chemioterapia, per eliminare i focolai di tumore invasivo. Trattamento di questi focolai può essere migliorato con tumoricidal umano cellule staminali mesenchimali (MSCs). MSCs esibiscono tropismo potente del tumore e possono essere ingegnerizzate per esprimere terapeutiche proteine che uccidono le cellule del tumore. Avanzamenti in modelli preclinici indicano che la resezione chirurgica induce la perdita prematura di MSC e riduce l'efficacia terapeutica. Efficacia del trattamento del MSC può essere migliorata da semina MSCs su un'impalcatura biodegradabile poly(lactic acid) (PLA). Consegna MSC nella cavità di resezione chirurgica su un'impalcatura PLA Ripristina di uccisione del tumore, la persistenza e la conservazione delle cellule. Per studiare gli effetti dell'impianto di PLA MSC-seminato il GBM, è necessario un accurato modello preclinico. Qui forniamo un protocollo chirurgico preclinico per resezione del tumore di immagine-Guida di GBM in topi immune-carenti ha seguito da impianto di impalcatura MSC-seminato. MSCs sono progettati con costrutti lentivirali costitutivamente esprimere e secernono terapeutico TNFα-correlati apoptosis-inducing ligand (TRAIL), come pure la proteina fluorescente verde (GFP) per consentire la registrazione fluorescente. Allo stesso modo, le cellule del tumore U87 sono progettate per espresso mCherry e luciferasi di lucciola, fornendo dual fluorescente/luminescenti di rilevamento. Mentre attualmente utilizzato per lo studio di cellule staminali mediate consegna di terapeutica, questo protocollo potrebbe essere modificato per studiare l'impatto della resezione chirurgica sugli altri interventi GBM.
Introduction
Glioblastoma (GBM) è il tumore cerebrale primario più comune negli adulti, con una misera sopravvivenza mediana di soli 12-15 mesi1,2,3,4,5. Sopravvivenza non è significativamente migliorata poiché 2005 quando l'attuale standard clinici di massima resezione chirurgica seguita da radioterapia e chemioterapia temozolomide concomitante e adiuvante è stato adottato6,7. Mentre questo trattamento fornisce ai pazienti un sollievo temporaneo dei sintomi, standard di trattamento cura risultati invariabilmente in ricorrenza come fuochi del cancro invasivo eludere la resezione e sono protetti dalle terapie sistemiche da emato - encefalica (BBB). Strategie i focolai di tumore invasivo di destinazione mentre eludere la BBB sono urgentemente necessarie per guadagnare trazione contro questa malattia debilitante e aggressiva.
Cellule staminali mesenchimali (MSCs) mostrano la promessa come droga veicoli di consegna per GBM a causa del loro tumore nativo tropismo8,9. MSCs possiedono i ricevitori per e migrare verso fattori solubili che tumori secernono, compreso 1 α fattore derivato da cellule stromali (SDF-1 α), matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) e monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) tra gli altri10, 11 , 12 , 13. ingegneria MSCs per esprimere e secernono farmaci citotossici permette loro di essere sfruttato come veicoli di consegna di droga tumore-homing. MSCs derivati dal muoversi verso i fuochi del tumore invasivo e fornire proteine terapeutiche. Questo approccio ha dimostrato la fattibilità in una varietà di preclinici GBM modelli9,14. Tuttavia, la maggior parte di questi modelli non includono la resezione chirurgica nonostante la rilevanza clinica di questo componente. Emergendo studi utilizzando nuovi modelli di resezione ha rivelato che la rimozione chirurgica del tumore riduce la persistenza di cellule staminali che vengono iniettate direttamente nella cavità chirurgica15. Perdita di attuabilità ha provocato ridotta efficacia, probabilmente a causa di diminuzioni nella dose e la durata del farmaco consegnato ai fuochi del tumore invasivo.
Per aumentare la vitalità delle cellule staminali e drug delivery, MSCs possono essere seminate su impalcature prima dell'impianto. In questo protocollo, biocompatibili e riassorbibili elettrofilate nanofibrous poly(lactic acid) (PLA) viene utilizzato come ponteggio per MSCs. PLA si flette e si adatta alla forma della cavità di resezione al momento dell'impianto, che massimizza la copertura terapeutica e riduce al minimo il distanza MSCs deve percorrere per raggiungere le cellule del tumore. MSCs rimangono sul patibolo durante l'impianto e quindi migrare fuori il patibolo verso le cellule del tumore dopo l'impianto16,17. MSCs e i farmaci citotossici che trasportano quindi si accumulano i focolai di tumore. Consegna della droga citotossica al tumore richiede MSC vitalità e persistenza, entrambi i quali sono aiutati da impianto su ponteggi.
In questa procedura vengono utilizzati vettori lentivirali di indurre l'espressione stabile di (fluorescentein vitro di rilevamento) e bioluminescenti (in vivo di rilevamento) marcatori nelle linee di cancro e di cellule staminali. La linea GBM umana U87 è infettata di mCherry e firefly luciferase (U87 mCh-Fl) e il MSCs non terapeutico con GFP e renilla luciferasi (MSC GFP-Rluc). La variante terapeutica delle MSC express TNFα-correlati apoptosis inducing ligand (MSC-TRAIL). SENTIERO, una proteina secernuta costitutivamente, associa a nelle vicinanze di recettori di morte sul cancro cellule e avvia gli apoptosi caspase-mediati18.
Qui, forniamo un protocollo per resezione chirurgica GBM preclinica immagine-guida e l'impianto di scaffold MSC-seminato. In breve, i topi nudi sono dato un craniotomy seguito tre giorni dopo da iniezione stereotactic ortotopico di U87 mCh-Fl per stabilire il tumore primario. Il tumore engrafted cresce per un periodo di circa una settimana. Impalcature PLA sono seminate con MSCs 48h prima dell'intervento chirurgico di resezione. Il tumore è quindi resecato sotto guida fluorescente e l'impalcatura MSC-caricato viene impiantato nella cavità di resezione. Sopravvivenza di onere e mouse di tumore sono quindi monitorati postoperatorio con bioluminescenza imaging (BLI). Una sequenza temporale di queste procedure è fornita qui sotto (Figura 1).
Figura 1: sequenza temporale delle procedure. Topi inizialmente ricevano una finestra cranica (giorno 0). Dopo un periodo di recupero di tre giorni, i tumori sono impiantati (giorno 3) e crescere per circa una settimana. Impalcature sono seminate con MSCs (giorno 8) due giorni in anticipo la procedura di resezione e l'impianto del tumore (giorno 10). Progressione del tumore ed efficacia terapeutica vengono valutati tramite post-operatorio in seguito di imaging (giorno 10 +). Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
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Protocol
Tutti i metodi descritti qui sono stati approvati dal istituzionale Animal Care e uso Committee (IACUC) di The University of North Carolina a Chapel Hill.
Nota: Questa procedura è eseguita su topi con una craniotomia aperta, come una versione modificata del protocollo da Mostany e Portera-Cailliau19 in cui viene eliminato il tessuto osseo che viene rimosso chirurgicamente, lasciando il cervello accessibile per istituzione e eventuale resezione dei tumori GBM. A seguito di craniotomia, tumori sono stabiliti attraverso l'impianto stereotassica come descritto in Ozawa e James20. Abbiamo impiantare cellule mCh-Fl di 1 x 105 U87 alle seguenti coordinate stereotassica (in mm dal bregma): (2.5, 0, -0,5).
1. cella cultura e preparazione di ponteggio
Nota: Impalcature devono essere preparate 48h prima dell'impianto in topi. I seguenti volumi sono forniti su base al patibolo. Moltiplicare la quantità come necessario per ulteriori scaffold.
- Impalcature PLA tagliate a pezzi di resezione cavità di dimensioni medie (circa 2 mm x 2 mm). Impalcature possono essere tagliate a mano con le forbici o con un punzone di foro per la ripetibilità.
- Sterilizzare mediante immersione in etanolo al 70% per 15 min seguita da immersione in PBS. Posto dell'impalcatura in mezzo dell'Aquila di Dulbecco modificato (DMEM) contenente 10% siero bovino fetale (FBS) e 1% di penicillina-streptomicina durante la preparazione di cellule per il seeding.
- Sollevare MSCs coltivate utilizzando 0,05% tripsina (3-5 mL per un pallone da T75). Incubare a 37 ° C per 5 min, assicurarsi che le cellule hanno alzato, quindi aggiungere 7-10 mL DMEM al pallone per inattivare la tripsina.
- Trasferire contenuto del pallone in una provetta per centrifuga 15 mL. Contare le celle utilizzando un emocitometro. Pellet di 5 x 105 MSCs per ogni ponteggio tramite centrifugazione a 100 x g per 5 min.
- Aspirare il supernatante e risospendere MSCs in 5 µ l DMEM 5x105 cellule.
- Preparare i ponteggi per il seeding tamponando loro secco.
- Rimuovere un'impalcatura da immersione DMEM con le pinzette e temporaneamente posizionarlo sul coperchio della piastra 6 pozzetti. Sollevare il patibolo il coperchio, lasciando dietro di sé una gocciolina di DMEM in eccesso.
- Riposizionare l'impalcatura sul coperchio nuovamente in un luogo nuovo e asciutto. Ripetere 3 - 5 volte, quindi posizionare il patibolo parzialmente appassito in una nuova piastra 6 pozzetti per il seeding. Ripetere per ogni ponteggio.
Nota: Un'impalcatura parzialmente appassita fornisce cellulare ottimale semina risultati. Se il ponteggio è troppo umido, cellule saranno sfilare il patibolo e aderire alla piastra ben qui sotto. Se il ponteggio è troppo asciutto, la goccia non si diffonderà in intera impalcatura, conseguente distribuzione povera cella iniziale.
- Utilizzando una pipetta, mescolare delicatamente il flaconcino di cellule staminali per omogeneizzare la sospensione come alcune cellule possono essere depositati alla parte inferiore.
- Pipettare lentamente 2,5 µ l appena mescolato sospensione MSC direttamente sul patibolo, creando una piccola goccia sopra la parte superiore dell'impalcatura.
- Aggiungere 300 µ l DMEM ai bordi di ciascun pozzetto. Ciò impedirà la rapida evaporazione della goccia delle cellule. Incubare a 37 ° C per 30 min, permettendo alle cellule di allegare al patibolo.
- Con il forcipe, capovolgere delicatamente le impalcature sopra nella piastra di ben. Seme 2,5 µ l appena mescolato MSC sospensione (in questo modo un totale di 5 x 105 cellule seminate al patibolo). Incubare a 37 ° C per 30 min, permettendo alle cellule di allegare al patibolo.
- Coprire le impalcature in DMEM aggiungendo 2 mL in ciascun pozzetto della piastra 6 pozzetti. Sollevare delicatamente le impalcature per consentire media fluire sotto di loro. Incubare a 37 ° C in questo stato per 48 h prima dell'intervento di impianto.
- Verifica le impalcature dopo 24 h e aggiungere/modificare media se evaporazione in eccesso o supporti scoloriti a causa dello squilibrio del pH sono osservati.
2. fluorescenza-guidato la resezione e l'impianto dell'impalcatura
Nota: Sterilizzare tutti gli strumenti prima dell'inizializzazione di chirurgia. Amministrare l'analgesia profilattica come descritto nel vostro protocollo IACUC istituzionale.
- Posizionare la cornice stereotassica sul palco di una fluorescenza stereomicroscopio di dissezione.
- Anestetizzare il mouse sotto inalato isoflurano in un'aula di induzione. Una volta anestetizzato, fissare il mouse nella cornice stereotassica con anestesia per inalazione continua di alimentazione tramite un adattatore ogiva isoflurano. Mantenere la temperatura corporea con un rilievo di riscaldamento e/o la sonda.
Nota: 4-5% isoflurane è adatta per induzione e 2-3% è adatto per la manutenzione, ma questo deve essere adattato e monitorato per ogni mouse. - Applicare unguento oftalmico agli occhi per prevenire la secchezza della cornea. Sterilizzare il sito di incisione del cuoio capelluto con una serie di tre alcol e tre salviettine imbevute di betadine.
- Eseguire la prova reflex di punta pizzico su ogni arto e confermare risposta negativa per garantire adeguata amputate. Garantire un costante tasso respiratorio a circa 55-65 respiri/min.
- Usando il forcipe, pizzicare e sollevare delicatamente il cuoio capelluto. Fare un'incisione rostrale caudale lineare del midline con forbici chirurgiche. Irrigare il sito di incisione con PBS e rimuovere il grasso sottocutaneo con un cotton-fioc in un movimento circolare di spazzolatura. Organizzare la pelle tale che la finestra cranica precedentemente stabilita è completamente visibile.
- Delicatamente la puntura dura solo interno ai bordi della finestra cranica utilizzando un ago da 18 G. Ripetere fino a quando l'incisione tracce completamente all'interno della finestra.
- Rimuovere il dura da peeling via con una pinzetta, rivelando il parenchima sottostante e tumore.
- Individuare il tumore di mCh-Fl U87 spegnendo luci in camera e accendere la fluorescenza-modalità di stereomicroscopio. Preparare per la resezione di un puntale di 1-200 µ l di caricamento nell'estremità del tubo di una pompa a vuoto.
- Accendere la pompa del vuoto. Resecare il tumore aspirando delicatamente il tessuto fluorescente finché non rimane nessun segnale. Spegnere la pompa del vuoto e scartare la punta della pipetta. Girare la fluorescenza fuori e la camera luci torna su.
Nota: Per controllare lo spurgo, irrigare con PBS freddo e applicare una pressione costante con un cotton-fioc. Nei casi più gravi, la cavità di resezione può anche essere imballata temporaneamente con un agente emostatico, finché viene rimosso dopo il sanguinamento si è fermato seguita da un'altra irrigazione di PBS. - Immediatamente prima dell'impianto, immergere lentamente un'impalcatura PLA MSC-seminato in PBS per rimuovere indesiderati media e componenti associati. Impiantare il patibolo in cavità di resezione. Se necessario, aggiungere 1 fibrinogeno µ l (67-106 mg/mL), seguito da trombina di 1 µ l (400-625 U/mL) per garantire l'impalcatura in luogo.
- Con la dura madre rimosso e il lembo osseo dalla finestra cranica già scartato, sigillare la ferita semplicemente di chiudere la pelle e applicare la colla chirurgica. Rimuovere l'animale da anestetico per via inalatoria e permettono di recuperare su una superficie riscaldata.
- Mouse una volta ambulatorio, ritorno alla gabbia. Somministrare analgesici puntualmente IACUC-approvato. Ripetere la procedura per ogni mouse.
3. post-operatorio di Imaging
- Utilizzando la siringa di insulina 28g, iniettare topi con D-luciferina (150 mg/kg intraperitoneale).
- Aspettare 10 min. Questo permetterà la luciferina di circolare in tutto il corpo e reagire con le cellule tumorali che esprimono luciferasi nel cervello per ottenere massima espressione.
- Nell'ambito dell'anestesia di isoflurane (come accennato in precedenza), immagine topi in un bioluminescenza (BLI) sistema per visualizzare i tumori di imaging. Variare i tempi di esposizione come necessari (secondi a minuti) a seconda delle dimensioni del tumore.
- Ripetere la procedura di imaging come necessario per determinare la cinetica di crescita del tumore. Continuare a monitorare la salute degli animali.
Nota: MSCs terapeutico si esprimono costitutivamente TRAIL, uccidere le cellule tumorali e sopprimendo la crescita complessiva del tumore. Ogni 2-5 giorni di imaging fornisce una frequenza sufficiente per questo scopo. - Qualora ricorrano predeterminato endpoint descritte nel protocollo della IACUC, sacrificio topi mediante perfusione perfusione e raccogliere i tessuti per l'analisi.
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Representative Results
U87 cellule del tumore sono state progettate per espresso mCherry e luciferasi di lucciola (U87 mCh-Fl) prima dell'iniezione e per consentire la resezione guidata da immagini e bioluminescenza (Figura 2A-C) di rilevamento. Cellule staminali erano similmente progettate con diagnostica GFP-Rluc (MSC-GFP) o GFP-prova terapeutica (MSC-TRAIL) e seminate su impalcature PLA per confermare allegato e proliferazione (Figura 2D-F).
Figura 2: immagini rappresentative delle cellule tumorali fluorescente e MSCs seminate su PLA. A-C) Fase, fluorescente e combinato immagini, rispettivamente, le cellule tumorali di Visualizza U87 ingegnerizzate con costrutti lentivirali ai marcatori espresso mCh-Fl. D-F) Immagini corrispondenti delle cellule staminali progettato per esprimere GFP-Rl o terapeutico GFP-TRAIL seminate sul materiale dell'armatura di PLA. Scala bar = 200 µm. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Immagini intraoperatorie sono fornite di seguito per evidenziare porzioni della procedura chirurgica per resezione del tumore e dell'impalcatura di impianto (Figura 3). L'animale è in primo luogo anestetizzato e allineato nello strumento stereotassica (Figura 3A). La pelle viene aperto e la dura madre è sbucciata indietro. Il tumore è stato resecato (Figura 3B), e quando esaminate sotto luce bianca sembra essere completamente rimosso. Tuttavia, immagini fluorescenti del tumore prima (Figura 3) e dopo resezione (Figura 3D) indicano, mentre la maggior parte del tumore è stato rimosso, rimanga una quantità residua. Questo fenomeno è simile a casi clinici in cui i chirurghi sono in grado di rimuovere le cellule tumorali che rapidamente migrano lontano da massa primaria in aree del cervello inoperabile. Migratori terapeutico MSCs verso i fuochi del tumore residuo che rimangono dopo resezione chirurgica. Per recapitare MSCs nella cavità di resezione, MSCs prima è seminato su PLA, e quindi il costrutto di ponteggio viene inserito nella cavità di resezione. Presenza di MSCs sul patibolo sono confermate dopo l'impianto da fluorescente imaging segnale GFP (Figura 3E). Ex vivo intero cervello immagini mostrano impalcatura dimensioni relative cavità di resezione (Figura 3F-H). Il patibolo appare significativamente più grande di quando coricata, ma può essere modellato in forma di cavità di resezione durante l'impianto. Ricoprendo l'intera cavità, la distanza che terapeutica MSCs è necessario migrare per raggiungere fuochi del tumore è ridotto al minimo. Dopo la chirurgia, BLI viene utilizzato per monitorare la crescita del tumore nel tempo e determinare efficacia di MSC-TRAIL impalcatura-consegnato.
Figura 3: immagini rappresentative di intraoperatorie e postoperatorie. A) visualizzando mouse di serie Intraoperative prima incisione. B) incisi mouse con finestra cranica rivelando tumore massa. Campo luminoso C) e fluorescente sovrapposizione immagine mostra l'ubicazione del tumore. D) cavità post-chirurgico di resezione con focolai di tumore residuo. E) dell'impalcatura impiantato PLA seminato con MSC-TRAIL. F) Post-mortem del cervello del tessuto con ponteggio sovrapposto. G) fluorescente sovrapposizione evidenziando le cellule GFP-TRAIL. H) Magnified versione di barre della scala di G. = 5 mm. per favore clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
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Discussion
Chirurgia in genere può essere completata entro 30 min per topo, dato che i punti seguenti sono presi in considerazione per massimizzare la precisione ed evitare insidie che richiede tempo. Innanzitutto, assicurarsi che il mouse è posizionato correttamente nello strumento stereotassica prima di iniziare la procedura. Movimenti indesiderati della testa limiterà la precisione chirurgica del craniotomy, Ubicazione dell'impianto del tumore e del livello di resezione del tumore. Prima di resezione, rimuovere completamente la parte del dura che coprono il tumore. Il dura duro, fibroso si indurisce come si disidrata durante l'aspirazione. Se in modo incompleto rimosso, dura indurito può limitare aspiratore punta mobilità e prevenire la resezione completa del tumore. Durante la resezione, i vasi sanguigni sono spesso inavvertitamente resecati con il tumore, causando sanguinamento significativo. Sangue in eccesso diminuisce l'intensità del segnale fluorescente e oscura il tumore. Mantenere la visibilità del tumore durante la resezione assicura la corretta estensione della resezione e limita la rimozione di tessuto sano e sanguinamento in eccesso. Per le più piccole sbavature, irrigare il vaso danneggiato con soluzione salina fredda e applicare una leggera pressione con un cotton-fioc. Se il sanguinamento continua, pack un agente emostatico nella cavità per 2-3 minuti e poi rimuovere con il forcipe. Irrigare con PBS in seguito per ripristinare il pH fisiologico prima di impiantare il patibolo cella-seminato. Quando la resezione è stata completata e ha smesso di sanguinamento, l'insidia finale è chiusura inadeguata della pelle ferita. Questo è più spesso causato da umidità in eccesso (PBS o sangue) che impedisce la colla chirurgica di incollaggio la pelle incisa. Evitare questo asciugando delicatamente la pelle con un cotton-fioc prima di applicare la colla. È anche possibile incollare accidentalmente la pelle direttamente al cranio, se il divario di ferita non è in primo luogo tenuto in posizione chiusa con il forcipe prima dell'incollaggio.
Con queste considerazioni in mente, il protocollo di cui sopra produce coerente e affidabile resezioni chirurgiche GBM che imitano lo standard di cura per test accurati in vivo di cella emergente e terapie di piccola molecola. Ancora, diversi componenti possono essere modificate per servire particolari esigenze sperimentali. Per esempio, la proprietà tumorali quali dimensione, posizione e limite dell'invasione può essere regolata modificando il numero iniziale e la profondità di cellule iniettate, tempo tra istituzione del tumore e la resezione, o passando la linea cellulare del tumore stesso. Inoltre, questo studio viene eseguito in topi nudi athymic cui sistema immunitario compromesso tollera le cellule umane. Sistema immunitario competenti topi potrebbero essere più appropriati per gli studi che utilizzano cellule di topo.
Rispetto ad un sistema chiuso (cioè, l'osso o un vetrino coprioggetti sarà messo in posto), il craniotomy aperto eseguito in questo protocollo riduce la pressione intracranica (ICP). ICP aumentato, essendo responsabile dell'insorgenza di sintomi quali convulsioni, topi sperimenteranno un prolungamento artificiale della sopravvivenza in questo modello. Mentre l'impatto è ridotto al minimo a causa del ritardo che applicano ai gruppi di controllo ed il trattamento, modelli futuri potrebbero chiudere nuovamente il lembo osseo per ripristinare ICP e determinare il ruolo che svolge nella terapia cellulare per GBM.
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Disclosures
D. ssa Sheets, Bagó e Hingtgen avere equità nelle terapie di Falcon, che ha aspetti di cellule staminali e la tecnologia dell'impalcatura da UNC Chapel Hill, concesso in licenza.
Acknowledgments
Gli autori riconoscono contributi editoriali da Dr. Kathryn Pietrosimone. Impalcature PLA sono stati prodotti da laboratorio del Dr. Elizabeth Loboa alla North Carolina State University. Questo lavoro è stato supportato dal Università Cancer Research Fund dell'UNC Lineberger Comprehensive Cancer Center e UNC traslazionale e clinica Sciences Institute (KL2TR001109, UL1TR001111).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Just for mouse stereotaxic instrument | Stoelting | 51730 | Maintains steady head positioning during surgery |
| Fluorescence dissecting stereomicroscope | Leica | M165 FC | Allows real-time imaging of tumor during resection |
| Motorized integrated stereotaxic injector (ISI) system | Stoelting | 53315 | Allows precise tumor cell injection volume and rate |
| Vetbond tissue adhesive | 3M | 1469 | Sugical glue to close skin wound |
| Artificial tears | Akorn | 664268 | Prevents eyes from drying during surgery |
| Webcol alcohol preps | Covidien | 6818 | Sterilize incision site |
| Betadine surgical scrub | Purdue Fredick Company | 6761815117 | Sterilize incision site |
| Cotton-tipped applicators | Fisherbrand | 23-400-115 | Surgery tool |
| E-vac aspirating system | Argos | EV310 | Vacuum pump used to resect tumor |
| Fibrinogen and thrombin extracted from as-received TISSEEL | Baxter | To temporarily secure the scaffold in the resection cavity | |
| IVIS Kinetic in vivo optical imaging system | Caliper Life Science | Bioluminescent Imager | |
| D-Luciferin potassium salt | PerkinElmer | 122799 | In vivo imaging agent |
References
- Adamson, C., et al. Glioblastoma multiforme: a review of where we have been and where we are going. Expert opinion on investigational drugs. 18 (8), 1061-1083 (2009).
- Asthagiri, A. R., Pouratian, N., Sherman, J., Ahmed, G., Shaffrey, M. E.
- Affronti, M., et al. Overall survival of newly diagnosed glioblastoma patients receiving carmustine wafers followed by radiation and concurrent temozolomide plus rotational multiagent chemotherapy. Cancer. 115 (15), 3501-3511 (2009).
- Erpolat, O., Akmansu, M., Goksel, F., Bora, H., Yaman, E., Büyükberber, S. Outcome of newly diagnosed glioblastoma patients treated by radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide: a long-term analysis. Tumori. 95 (2), 191-197 (2009).
- Minniti, G., et al. Radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide for glioblastoma in elderly patients. Journal of Neuro-Oncology. 88 (1), 97-103 (2008).
- Stupp, R., et al. Radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide for glioblastoma. The New England Journal of Medicine. 352 (10), 987-996 (2005).
- Delgado-López, P., Corrales-García, E. Survival in glioblastoma: a review on the impact of treatment modalities. Clinical and Translational Oncology. 18 (11), 1062-1071 (2016).
- Wu, X., et al. In vivo tracking of superparamagnetic iron oxide nanoparticle-labeled mesenchymal stem cell tropism to malignant gliomas using magnetic resonance imaging. Laboratory investigation. Journal of Neurosurgery. 108 (2), 320-329 (2008).
- Nakamizo, A., et al. Human bone marrow-derived mesenchymal stem cells in the treatment of gliomas. Cancer Research. 65 (8), 3307-3318 (2005).
- Xu, F., Shi, J., Yu, B., Ni, W., Wu, X., Gu, Z. Chemokines mediate mesenchymal stem cell migration toward gliomas in vitro. Oncology Reports. 23 (6), 1561-1567 (2010).
- Park, S., et al. CXCR4-transfected human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells exhibit enhanced migratory capacity toward gliomas. International Journal of Oncology. 38 (1), 97-103 (2011).
- Ho, I., et al. Matrix Metalloproteinase 1 Is Necessary for the Migration of Human Bone Marrow-Derived Mesenchymal Stem Cells Toward Human Glioma. STEM CELLS. 27 (6), 1366-1375 (2009).
- Bexell, D., Svensson, A., Bengzon, J. Stem cell-based therapy for malignant glioma. Cancer Treatment Reviews. 39 (4), (2012).
- Nouri, F., Wang, X., Hatefi, A. Genetically engineered theranostic mesenchymal stem cells for the evaluation of the anticancer efficacy of enzyme/prodrug systems. Journal of Controlled Release. 200, 179-187 (2015).
- Kauer, T., Figueiredo, J. -L., Hingtgen, S., Shah, K. Encapsulated therapeutic stem cells implanted in the tumor resection cavity induce cell death in gliomas. Nature Neuroscience. 15 (2), 197-204 (2011).
- Bagó, J., Pegna, G., Okolie, O., Hingtgen, S. Fibrin matrices enhance the transplant and efficacy of cytotoxic stem cell therapy for post-surgical cancer. Biomaterials. 84, 42-53 (2016).
- Bagó, J., Pegna, G., Okolie, O., Mohiti-Asli, M., Loboa, E., Hingtgen, S. Electrospun nanofibrous scaffolds increase the efficacy of stem cell-mediated therapy of surgically resected glioblastoma. Biomaterials. 90, 116-125 (2016).
- Loebinger, M., Eddaoudi, A., Davies, D., Janes, S. Mesenchymal Stem Cell Delivery of TRAIL Can Eliminate Metastatic Cancer. Cancer Research. 69 (10), 4134-4142 (2009).
- Mostany, R., Portera-Cailliau, C. A Craniotomy Surgery Procedure for Chronic Brain Imaging. J. Vis. Exp. (12), e680 (2008).
- Ozawa, T., James, C. D. Establishing Intracranial Brain Tumor Xenografts With Subsequent Analysis of Tumor Growth and Response to Therapy using Bioluminescence Imaging. J. Vis. Exp. (41), e1986 (2010).
