Waiting
로그인 처리 중...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

زرع جهاز إرسال تخطيط القلب عن بعد وضغط الدم لتحديد حساسية منعكس الضغط التلقائي في الفئران الواعية

Published: February 14, 2021 doi: 10.3791/62101
Automatic Translation
1, 1, 1, 1, 1,2, 3, 1,2
1Center for Integrated Protein Science (CIPS-M) and Center for Drug Research, Department of Pharmacy, Ludwig-Maximilians-Universität München, 2German Center for Cardiovascular Research (DZHK), Partner Site Munich Heart Alliance, 3Hannover Medical School, Institute for Neurophysiology

Summary

المنعكس العضلي هو آلية لتنظيم معدل ضربات القلب بواسطة الجهاز العصبي اللاإرادي استجابة لتغيرات ضغط الدم. وصفنا تقنية جراحية لزرع أجهزة إرسال القياس عن بعد للقياس المستمر والمتزامن لمخطط كهربية القلب وضغط الدم في الفئران. هذا يمكن أن يحدد حساسية المنعكس الضغطي العفوي ، وهي علامة نذير مهمة لأمراض القلب والأوعية الدموية.

Abstract

يتم التحكم في ضغط الدم (BP) ومعدل ضربات القلب (HR) بواسطة الجهاز العصبي اللاإرادي (ANS) ويتشابكان بشكل وثيق بسبب آليات الانعكاس. المنعكس الضغطي هو آلية استتباب رئيسية لمواجهة التغيرات الحادة قصيرة المدى في ضغط الدم الشرياني والحفاظ على ضغط الدم في نطاق فسيولوجي ضيق نسبيا. يتم استشعار ضغط الدم بواسطة مستقبلات الضغط الموجودة في قوس الأبهر والجيب السباتي. عندما يتغير ضغط الدم ، تنتقل الإشارات إلى الجهاز العصبي المركزي ثم يتم توصيلها إلى الفروع السمبتاوي والودي للجهاز العصبي اللاإرادي لضبط HR. يؤدي ارتفاع BP إلى انخفاض منعكس في الموارد البشرية ، ويؤدي انخفاض BP إلى زيادة منعكسة في الموارد البشرية.

حساسية Baroreflex (BRS) هي العلاقة الكمية بين التغيرات في ضغط الدم الشرياني والتغيرات المقابلة في الموارد البشرية. غالبا ما ترتبط أمراض القلب والأوعية الدموية بضعف وظيفة المنعكس الضغطي. في دراسات مختلفة ، تم الإبلاغ عن انخفاض BRS على سبيل المثال ، قصور القلب أو احتشاء عضلة القلب أو مرض الشريان التاجي.

يتطلب تحديد BRS معلومات من كل من BP و HR ، والتي يمكن تسجيلها في وقت واحد باستخدام أجهزة القياس عن بعد. يتم وصف الإجراء الجراحي بدءا من إدخال مستشعر الضغط في الشريان السباتي الأيسر ووضع طرفه في قوس الأبهر لمراقبة الضغط الشرياني متبوعا بوضع جهاز الإرسال وأقطاب تخطيط القلب تحت الجلد. كما وصفنا العناية المركزة بعد العملية الجراحية وإدارة المسكنات. بعد فترة أسبوعين من التعافي بعد الجراحة ، يتم إجراء تسجيلات تخطيط القلب وضغط الدم على المدى الطويل في الفئران الواعية وغير المقيدة. أخيرا ، نقوم بتضمين أمثلة على التسجيلات عالية الجودة وتحليل حساسية مستقبلات الضغط التلقائية باستخدام طريقة التسلسل.

Introduction

منعكس مستقبلات الضغط الشرياني هو نظام التحكم الرئيسي في التغذية المرتدة لدى البشر والذي يوفر تحكما قصير المدى - وربما أيضاعلى المدى الطويل 1,2 - في ضغط الدم الشرياني (ABP). هذا المنعكس يخزن الاضطرابات في ضغط الدم التي تحدث استجابة للمحفزات الفسيولوجية أو البيئية. يوفر تغييرات منعكسة سريعة في معدل ضربات القلب وحجم السكتة الدماغية والمقاومة الشراعية الطرفية الكلية. ينشأ المنعكس في النهايات العصبية الحسية في قوس الأبهر والجيوب السباتية. تشكل هذه النهايات العصبية مستقبلات الضغط الشرياني. تقع سوماتا النهايات العصبية في قوس الأبهر في العقدة nodose بينما توجد تلك الخاصة بالنهايات العصبية في الجيب السباتي في العقدة الصخرية. يتم تشغيل المنعكس عن طريق زيادة في ضغط الدم ، والتي تمتد وتنشط النهايات العصبية للمستقبلات الضاحية (الشكل 1 أ). ينتج عن التنشيط وابل جهد الحركة الذي ينتقل مركزيا عبر خافض الأبهر الوارد وأعصاب الجيوب السباتية إلى نوى جذع الدماغ القلبي الوعائي مثل النواة المسالكية سوليتاري والنواة الظهرية للعصب المبهم. التغييرات في نشاط العصب الوارد بدورها تعدل النشاط الصادر اللاإرادي. زيادة نشاط الأعصاب المستقبلة للضغط يقلل من الودي ويزيد من نشاط العصب السمبتاوي. وبالتالي ، فإن عواقب تنشيط مستقبلات الضغط هي انخفاض في معدل ضربات القلب ، والنتاج القلبي ، ومقاومة الأوعية الدموية التي تقاوم معا وتخفف من الزيادة في ضغط الدم3. على النقيض من ذلك ، فإن انخفاض نشاط الأعصاب المستقبلة للضغط يزيد من الودي ويقلل من نشاط العصب السمبتاوي ، مما يزيد من معدل ضربات القلب والنتاج القلبي ومقاومة الأوعية الدموية وبالتالي يقاوم الانخفاض في ضغط الدم.

أظهرت العديد من الدراسات التي أجريت على البشر والحيوانات أنه يمكن تعديل منعكس مستقبلات الضغط في ظل الظروف الفسيولوجية مثل التمرين4 أو النوم5 أو الإجهاد الحراري6 أو الحمل7. بالإضافة إلى ذلك ، هناك أدلة على أن المنعكس الضغطي ضعيف بشكل مزمن في أمراض القلب والأوعية الدموية ، مثل ارتفاع ضغط الدم وفشل القلب واحتشاء عضلة القلب والسكتة الدماغية. في الواقع ، يستخدم الخلل الوظيفي في الضغط أيضا كعلامة نذير في العديد من أمراض القلب والأوعية الدموية8،9،10. علاوة على ذلك ، يوجد خلل في الضغط المنعكس أيضا في اضطرابات ANS. نظرا لأهمية منعكس مستقبلات الضغط للصحة وحالات المرض ، فإن تقدير هذا المنعكس في الجسم الحي هو عنصر مهم في الأبحاث اللاإرادية والقلب والأوعية الدموية مع بعض الآثار السريرية الخطيرة.

خطوط الفئران الوراثية هي أدوات أساسية في أبحاث القلب والأوعية الدموية. توفر الدراسات في الجسم الحي لخطوط الفئران هذه رؤى قيمة في فسيولوجيا القلب والأوعية الدموية والفيزيولوجيا المرضية وفي كثير من الحالات تعمل كأنظمة نموذجية قبل السريرية لأمراض القلب والأوعية الدموية. نقدم هنا بروتوكولا للقياس عن بعد في الجسم الحي ECG و BP التسجيل في الفئران الواعية وغير المقيدة والمتحركة بحرية ونصف كيف يمكن تحديد حساسية المنعكس الضغطي من هذه التسجيلات باستخدام طريقة التسلسل (الشكل 1 ب). تسمى الطريقة المطبقة طريقة التسلسل ، لأن سلسلة الضربات للضرب من فترات ضغط الدم الانقباضي (SBP) و RR يتم فحصها لتسلسلات قصيرة من ثلاث نبضات أو أكثر أثناء الزيادة أو النقصان التلقائي في SBP مع التكيف المنعكس للموارد البشرية. هذه الطريقة هي المعيار الذهبي لتحديد حساسية المنعكس الضغطي حيث يتم فحص آليات الانعكاس التلقائي فقط. تتفوق هذه التقنية على التقنيات القديمة التي تضمنت إجراءات غازية مثل حقن الأدوية الفعالة في الأوعية للحث على تغييرات ضغط الدم.

Figure 1
الشكل 1: تمثيل تخطيطي لتقييم حساسية المنعكس الضغطي والانعكاس الضغطي باستخدام طريقة التسلسل. أ: مسار المنعكس الضغطي أثناء الزيادة الحادة في ضغط الدم. يتم استشعار ارتفاع قصير الأجل في ABP بواسطة مستقبلات الضغط الموجودة في قوس الأبهر والجيب السباتي. تنتقل هذه المعلومات إلى الجهاز العصبي المركزي وتؤدي إلى انخفاض في نشاط العصب الودي بالتوازي مع زيادة في النشاط السمبتاوي. يؤدي إطلاق الأسيتيل كولين من النهايات العصبية الموجودة في منطقة العقدة الجيبية الأذينية إلى انخفاض في cAMP الرسول الثاني في خلايا جهاز تنظيم ضربات القلب في العقدة الجيبية الأذينية وبالتالي انخفاض معدل ضربات القلب. انخفاض ضغط الدم على المدى القصير له تأثير معاكس. (B) تتبع BP التخطيطي أثناء تسلسل لأعلى (اللوحة العلوية اليسرى) وتسلسل لأسفل (اللوحة اليمنى العلوية) لثلاث نبضات متتالية. يرتبط التسلسل الصاعد بزيادة موازية في فترات RR (اللوحة اليسرى السفلية) وهو ما يعادل انخفاضا في الموارد البشرية. يرتبط التسلسل السفلي بانخفاض مواز في فترات RR (اللوحة اليمنى السفلية) وهو ما يعادل زيادة في الموارد البشرية. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Protocol

إجراء جميع الدراسات على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية المحلية والقوانين الوطنية بشأن التجارب على الحيوانات. لهذه التجربة ، تمت الموافقة على الدراسات من قبل Regierung von Oberbayern وكانت متوافقة مع القوانين الألمانية بشأن التجارب على الحيوانات. WT (خلفية C57BL / 6J) نموذج فأر متلازمة الجيوب الأنفية المريضة التي تظهر حساسية BRS متزايدة (Hcn4tm3 (Y527F; R669E ؛ T670A)Biel)11 (خلفية C57BL / 6N مختلطة و 129 / SvJ) لهذه الدراسة.

1. إعداد المعدات

  1. قم بإزالة جهاز إرسال القياس عن بعد من عبوته المعقمة وتقصير يؤدي ECG إلى الطول المناسب لحجم الماوس. بالنسبة لذكر يبلغ من العمر 12 أسبوعا من الفأر الأسود (C57BL / 6J) ، ويزن ~ 30 جم ، قم بتقصير الرصاص الموجب (الأحمر) إلى طول ~ 45 مم والرصاص السالب (عديم اللون) إلى طول ~ 40 مم باستخدام المقص.
    ملاحظة: يتم إعطاء هذه القيم كاتجاه ويجب تكييفها حسب الضرورة (الشكل 2).
  2. قم بإزالة ما يقرب من 6 مم من أنبوب السيليكون الخاص برصاص ECG باستخدام مشرط لكشف السلك. قم بتغطية أطراف السلك بأنابيب زائدة مع ترك جزء ~ 2 مم من سلك ECG مكشوفا لتسجيل الإشارات الكهربائية. قم بتأمين أنبوب السيليكون بمادة خياطة حريرية 5-0 غير قابلة للامتصاص (الشكل 2 أ).
  3. اكتب الرقم التسلسلي لجهاز الإرسال في بروتوكول التشغيل (الملف التكميلي 1).
  4. رطب جهاز الإرسال في محلول كلوريد الصوديوم الدافئ والمعقم بنسبة 0.9٪.
  5. وزن الماوس وتسجيل وزنه.
  6. الأوتوكلاف جميع الأدوات الجراحية قبل الجراحة. تعقيمها أثناء الجراحة وبين الحيوانات المختلفة عن طريق الحرارة الجافة باستخدام معقم حبة الزجاج الساخن.
    ملاحظة: يجب أن تبرد الأدوات الجراحية إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام لمنع حروق الجلد.
  7. تطهير طاولة العمل لضمان ظروف التعقيم.

2. الزرع الجراحي لأجهزة الإرسال عن بعد لقياسات تخطيط القلب وضغط الدم مجتمعة

  1. تشريح الشريان السباتي المشترك الأيسر.
    1. تخدير الفأر عن طريق حقن مزيج التخدير داخل الصفاق (100 ملغ/كغ من الكيتامين؛ 15 ملغ/كغ من الزيلازين؛ 1 ملغ/كغ من الأسيبرومازين). قم بإجراء اختبار قرصة إصبع القدم للتأكد من تخدير الفأر بالكامل قبل بدء الجراحة.
    2. استخدم أداة تشذيب لحلاقة المنطقة الجراحية من أسفل الذقن باتجاه العضلات الصدرية المستعرضة.
    3. ضع الماوس في وضع الاستلقاء على لوحة جراحة يتم التحكم في درجة حرارتها مضبوطة على 37 درجة مئوية. قم بتأمين الأطراف بشريط جراحي ومراقبة درجة حرارة الجسم باستمرار باستخدام مقياس حرارة المستقيم (الشكل 2C). إذا انخفضت درجة حرارة الجسم إلى أقل من 37 درجة مئوية ، فقم بتغطية جسم الحيوان بشاش قطني معقم أثناء الجراحة.
    4. تطبيق مرهم العين لحماية عيون الحيوان أثناء التخدير.
    5. ضع كريم مزيل الشعر على المنطقة الجراحية المحلوقة مسبقا. أزيلي الشعر وكريم إزالة الشعر باستخدام قطعة قطن وماء دافئ بعد 3-4 دقائق. تأكد من أن الجلد نظيف وخالي من أي شعر متبقي وكريم مزيل للشعر، حتى لا يتلوث الجرح أثناء العملية.
    6. تطهير الجلد مع عدة جولات بالتناوب من بوفيدون اليود أو فرك الكلورهيكسيدين تليها الكحول.
    7. ضع الحيوان تحت مجهر تشريح وضع ستارة معقمة حول المنطقة الجراحية.
    8. قم بعمل شق في خط الوسط بطول 1-1.5 سم عبر جلد الرقبة ، بدءا من أسفل الذقن مباشرة. بذل جهد لجعل الشق مستقيما قدر الإمكان. (الشكل 2 د).
      ملاحظة: خلال الخطوات التالية ، يجب أن تبقى المنطقة الجراحية رطبة عن طريق التطبيق المنتظم لسائل كلوريد الصوديوم المعقم والدافئ (37 درجة مئوية) 0.9٪.
    9. قم بإنشاء مساحة تحت الجلد على جانبي الشق عن طريق فصل الجلد عن النسيج الضام الأساسي بمقص تشريح حاد. احرص على عدم الضغط على الجلد بقوة بالملقط ، لأن هذا يمكن أن يسبب نخرا ويؤدي إلى ضعف التئام الجروح بعد الجراحة.
    10. افصل بين الغدد النكفية والغدد تحت الفك السفلي باستخدام أدوات تطبيق طرف القطن لكشف العضلات التي تغطي القصبة الهوائية.
    11. اسحب الغدة اللعابية اليسرى باستخدام ملقط تشريح منحني لتحديد الشريان السباتي الأيسر الموجود بشكل جانبي إلى القصبة الهوائية (الشكل 2E).
    12. تشريح الشريان السباتي بعناية من الأنسجة المجاورة باستخدام ملقط منحني. كن حريصا جدا على عدم إصابة العصب المبهم الذي يمتد على طول الوعاء. استمر في التشريح الحاد لتعريض الشريان السباتي الأيسر لحوالي 10 مم في الطول وفصله تماما عن اللفافة الوعائية والعصب المبهم (الشكل 2F).
    13. مرر خيطا حريريا غير قابل للامتصاص 5-0 أسفل الجزء المعزول من الشريان السباتي مع رفع الوعاء الدموي قليلا باستخدام ملقط منحني لتقليل الاحتكاك بين الخيط والشريان السباتي ، لأن هذا قد يؤدي بسهولة إلى إتلاف جدار الأوعية الدموية.
    14. ضع الخيط في الجمجمة ، بالقرب من تشعب الشريان السباتي ، وشكل عقدة واربطها لربط الوعاء بشكل دائم (الشكل 2G). ثبت طرفي خياطة انسداد الجمجمة على طاولة الجراحة بشريط جراحي.
    15. مرر خياطة انسداد ثانية أسفل الشريان السباتي وضعها ذيليا على مسافة ~ 5 مم من خياطة الجمجمة (الشكل 2H). هناك حاجة لانسداد مؤقت لتدفق الدم أثناء قنية الشريان. لذلك ، اربط عقدة فضفاضة وأصلح طرفي الخياطة بشريط جراحي.
    16. ضع خياطة ثالثة (خياطة آمنة) بين خياطة انسداد الجمجمة والذيلية وقم بعمل عقدة فضفاضة (الشكل 2I). هناك حاجة إلى هذا الخيط للحفاظ على القسطرة في مكانها أثناء قنية الشريان. قم بلصق أحد طرفي الخيط على طاولة الجراحة.
  2. قنية الشريان السباتي المشترك الأيسر.
    ملاحظة: تقع منطقة المستشعر في قسطرة ضغط الدم على بعد 4 مم من الطرف البعيد وتتكون من أنبوب يحتوي على سائل غير قابل للانضغاط وهلام متوافق حيويا (الشكل 2 ب). نظرا لأن هذه المنطقة حساسة للغاية ، تأكد من خلوها من فقاعات الهواء ولا تلمسها في أي وقت أثناء العملية.
    1. ثني طرف إبرة 24 G بزاوية ~ 100 درجة لاستخدامها كمقدم قسطرة.
    2. اسحب خياطة الانسداد الذيلي برفق وقم بتثبيتها بالتوتر لإيقاف تدفق الدم مؤقتا ورفع الشريان قليلا.
    3. اخترق بعناية الشريان القريب من خياطة انسداد الجمجمة بالإبرة المنحنية (الشكل 2J). أمسك القسطرة بملقط قنية الوعاء ، وأدخلها في الثقب الصغير واتركها تنزلق ببطء في الوعاء. اسحب الإبرة المثنية برفق في وقت واحد (الشكل 2K).
    4. عندما تصل القسطرة إلى خياطة الانسداد الذيلي ، شد الخيط الآمن قليلا للحفاظ على القسطرة في مكانها (الشكل 2L).
    5. قم بفك خياطة الانسداد الذيلي بحيث يمكن تحريك القسطرة بشكل أكبر حتى يتم وضع طرفها في قوس الأبهر.
      ملاحظة: تأكد من تحديد طول الإدخال الصحيح للقسطرة ، لأن هذا يعتمد على حجم الماوس. بالنسبة للفئران الذكور ذات الخلفية C57BL / 6J في عمر 12 أسبوعا و ~ 30 جم من وزن الجسم ، نوصي بإدخال القسطرة حتى يصل الشق المدمج إلى خياطة انسداد الجمجمة. يمكن التحقق من عمق الإدخال الصحيح ووضع القسطرة لخط الماوس المحدد بعد القتل الرحيم للحيوان.
    6. بمجرد وضعها بشكل صحيح ، قم بتأمين القسطرة بجميع الغرز الثلاثة وقطع الأطراف بأقصر ما يمكن. لا تشد العقد بشدة لأن ذلك قد يؤدي إلى تلف قسطرة ضغط الدم الهشة.

Figure 2
الشكل 2: زرع جهاز إرسال تخطيط كهربية القلب وضغط الدم - قنية الشريان السباتي الأيسر . (أ) يتكون جهاز إرسال القياس عن بعد من قسطرة ضغط وقطيبين كهربائيين للجهد الحيوي وجسم الجهاز. ب: تمثيل تخطيطي لقسطرة الضغط. تتكون منطقة المستشعر من سائل غير قابل للضغط وهلام متوافق حيويا. يجب إدخال القسطرة في الشريان السباتي حتى يكون الشق على مستوى خياطة انسداد الجمجمة لضمان الوضع المناسب في الأوعية الدموية. (ج) فأر C57BL / 6J مخدر معد لزرع جهاز الإرسال الجراحي. (د-ل) تسلسل صورة يوضح الإجراء الجراحي لقنية الشريان السباتي الأيسر. د: شق جلد عنق الرحم. ه: القصبة الهوائية المكشوفة لتحديد الشريان السباتي الأيسر الموجود جانبيا إلى القصبة الهوائية. (و) تشريح حاد لعزل الشريان عن الأنسجة المجاورة والعصب المبهم. (ز) الربط الدائم للشريان السباتي الأيسر مع خياطة انسداد الجمجمة. (ح) الشد المطبق على خياطة الانسداد الذيلي لوقف سريان الدم مؤقتا. (I) خياطة آمنة للحفاظ على القسطرة في مكانها أثناء القنية. (ي) قنية ذات طرف منحني لإدخال القسطرة في الأوعية الدموية. ك: تدخل قسطرة الضغط في الشريان السباتي. (L) يتم وضع طرف القسطرة في قوس الأبهر ويتم تثبيت القسطرة بالخيط الأوسط. يظهر شريط المقياس في D - L 4 مم. أعيد طبعه من16. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

  1. وضع جسم جهاز القياس عن بعد في جيب تحت الجلد على الجانب الأيسر من الماوس (الشكل 3).
    1. قم بتشكيل نفق تحت الجلد من الرقبة موجه نحو الجانب الأيسر للحيوان وشكل كيسا صغيرا باستخدام مقص تشريح صغير غير حاد (الشكل 3 ب).
    2. قم بري النفق بحقنة سعة 1 مل مملوءة بمحلول كلوريد الصوديوم الدافئ والمعقم بنسبة 0.9٪ وأدخل ~ 300 ميكرولتر من المحلول في الحقيبة (الشكل 3C).
    3. ارفع الجلد بعناية باستخدام ملقط حاد وأدخل جسم جهاز الإرسال في الحقيبة (الشكل 3 د). خلال هذه الخطوة ، كن حذرا جدا لعدم سحب قسطرة ضغط الدم من الشريان السباتي.
  2. وضع يؤدي ECG في تكوين Einthoven II.
    1. قم بتشكيل نفق رفيع إلى العضلة الصدرية اليمنى باستخدام مقص تشريح حاد وضع الرصاص السلبي (عديم اللون) في النفق باستخدام ملقط حاد. ثبت الطرف النهائي للرصاص بغرزة في العضلة الصدرية باستخدام مادة خياطة قابلة للامتصاص 6-0 (الشكل 3E).
    2. قم بتشكيل حلقة في الرصاص الموجب (الأحمر) ، ضع طرفه في منطقة الضلع الذيلي الأيسر وقم بتأمين موضعه بخياطة باستخدام مادة خياطة قابلة للامتصاص 6-0.
      ملاحظة: من المهم أن يكون كلا الساقين مسطحين على الجسم بطولهما بالكامل لتجنب تهيج الأنسجة (الشكل 3F).
    3. أغلق الجلد بعقدة مفردة باستخدام مادة خياطة غير قابلة للامتصاص 5-0 (الشكل 3H). بالإضافة إلى ذلك ، ضع كمية صغيرة من لاصق الأنسجة على كل عقدة لمنع الحيوان من عض الخيط ومنع التفكك.
    4. ضع هيدروجيل البوفيدون واليود 10٪ على الجرح لمنع عدوى الجرح خلال مرحلة الشفاء.
    5. لتخفيف الألم الوقائي حقن 5 ملغ/كغ كاربروفين في 0.9٪ كلوريد الصوديوم تحت الجلد بينما لا يزال الفأر تحت التخدير.
    6. اضبط منصة التدفئة على 39 ± 1 درجة مئوية وضع الماوس في قفص سكني منفصل. ضع نصف القفص على المنصة لمدة 12 ساعة بعد الجراحة وانقل الماوس في المنطقة الدافئة. عندما يستيقظ الحيوان من التخدير ، يكون لديه خيار البقاء في المنطقة الدافئة أو الانتقال إلى الجزء الأكثر برودة من القفص.

Figure 3
الشكل 3: زرع جهاز إرسال تخطيط كهربية القلب وضغط الدم - وضع أقطاب تخطيط القلب وجسم الجهاز تحت الجلد. أ: الفأر بعد إدخال قسطرة ضغط الدم. يتم تأمين موضع القسطرة بواسطة خيوط الإطباق. ب: تشكيل جيب تحت الجلد على الجانب الأيسر من الحيوان بمقص حاد. (ج) يتم ري الحقيبة ب ~ 300 ميكرولتر من محلول ملحي معقم دافئ. (د) يوضع جسم الجهاز في الجيب تحت الجلد. (ه) الطرف النهائي للقطب السالب (عديم اللون) مثبت على العضلة الصدرية اليمنى بمادة خياطة قابلة للامتصاص. (F) تثبيت القطب الموجب (الأحمر) على العضلات الوربية اليسرى. (ز) وضع خياطة دائمة على عضلة الصدر لتأمين موضع أقطاب تخطيط القلب. (H) الفأر بعد إغلاق الجلد. يشار إلى المواضع تحت الجلد لنصائح قطب ECG بواسطة دوائر حمراء. لأغراض العرض التوضيحي ، تم استخدام ميت لالتقاط هذه الصور. يرجى اتباع الممارسات المعقمة أثناء استخدام حي. أعيد طبعه من16. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

  1. رعاية ما بعد الجراحة
    1. لتخفيف الآلام بعد العمليات الجراحية حقن 5 ملغ/ كغ كاربروفين في 0.9٪ كلوريد الصوديوم تحت الجلد كل 12 ساعة لمدة 3-5 أيام حتى يلتئم الجرح.
    2. حقن 10 ميكرولتر / غرام من محلول رينغر لاكتات دافئ داخل الصفاق لحماية الحيوان من الجفاف.
    3. دع الماوس يتعافى لمدة 2-3 أسابيع قبل تشغيل القياسات الأولى عن بعد. راقب بعناية الظروف الصحية العامة والتئام الجروح ووزن الجسم وتناول الطعام والماء خلال فترة التعافي.
    4. في نهاية التجربة ، القتل الرحيم للفأر عن طريق استنشاق ثاني أكسيد الكربون (CO2).
      ملاحظة: لا ينصح بخلع عنق الرحم أو قطع الرأس كطريقة للقتل الرحيم لأن هذا قد يؤدي إلى تلف أجزاء من جهاز إرسال ECG و BP.
  2. الحصول على البيانات.
    1. اتخاذ تدابير لتجنب الضوضاء الصوتية والإلكترونية أثناء تسجيل البيانات. بالإضافة إلى ذلك ، قلل من وصول الموظفين أثناء تسجيل البيانات وأكمل جميع إجراءات التربية قبل التجربة.
    2. ضع قفص الحيوان على لوحة استقبال القياس عن بعد وقم بتشغيل جهاز إرسال القياس عن بعد عن طريق تقريب المغناطيس من الحيوان.
    3. احصل على تسجيلات مستمرة لتخطيط القلب وضغط الدم والنشاط على مدار 72 ساعة (دورة مظلمة / ضوئية لمدة 12 ساعة) باستخدام برنامج الحصول على البيانات (الشكل 4).
  3. تحليل إيقاع الساعة البيولوجية لمعدل ضربات القلب وضغط الدم والنشاط.
    1. تحقق من وجود إيقاع يومي منتظم للموارد البشرية وضغط الدم والنشاط باستخدام برنامج الحصول على البيانات12 (الشكل 5).
  4. تحليل البيانات بما في ذلك تحديد حساسية مستقبلات الضغط باستخدام طريقة التسلسل مع برنامج تحليل ECG و BP.
    1. تصدير بيانات BP والموارد البشرية من برنامج الحصول على البيانات إلى برنامج تحليل ECG و BP (الملف التكميلي 2). استخدم تسلسل الأوامر التالي: افتح برنامج تحليل ECG و BP > ملف > البيانات الأولية من المحول > تحويل البيانات الأولية غير IOX. في النافذة الجديدة ، انقر فوق ملف > تحميل بيانات Dataquest ART4. مرة أخرى ، سيتم فتح نافذة جديدة ، حدد ملف البيانات للتصدير > تفتح نافذة جديدة ، حدد الحيوان من قائمة "الموضوعات" وحدد ECG و BP من "قائمة الأشكال الموجية" واضغط على موافق. اختر الحيوانات التي تريد تحويل البيانات منها بالنقر فوق تحويل البيانات > إنشاء ملف موقع ثنائي IOX.
    2. افتح ملف الموقع الثنائي IOX في برنامج تحليل ECG و BP باستخدام تسلسل الأوامر التالي: > الملف تحميل بيانات IOX > حدد تتبع BP و ECG > اضغط على علامة الاختيار الخضراء.
      ملاحظة: تم تحسين معلمات معالجة البيانات التالية للبيانات التي تم الحصول عليها من الفئران البرية ويجب أن تتناسب من حيث المبدأ مع جميع نماذج الماوس المستخدمة في المجال قبل السريري. ومع ذلك ، قد يكون تكييف هذه المعلمات ضروريا عند العمل مع نماذج تجريبية محددة ، على سبيل المثال ، الفئران ذات قيم HR و / أو BP عالية أو منخفضة للغاية ، أو أنواع القوارض المختلفة. على أي حال ، يجب مراجعة معلمات معالجة البيانات بعناية للتأكد من أنها تناسب النموذج المحدد قيد الدراسة.
    3. لمعرفة إعدادات تحليل ECG و BP و BRS ، انظر الملف التكميلي 3,4. بالنسبة لتحليل BRS في الفئران ، اضبط معلمات BRS لاكتشاف تسلسلات فقط من ثلاث نبضات (أو أكثر) تظهر تأخيرا بين SBP و RR لنبضة واحدة ، واضبط عتبة تغيير SBP و RR على 0.5 مم زئبق و 2 مللي ثانية. تأكد من أن معامل الارتباط لميل خط الانحدار من مخططات RR / SBP أكبر من 0.75 وتحليل الأقسام التي تظهر إيقاع الجيوب الأنفية المستقر فقط. قم بتعيين معلمات لتحليل ECG و BP و BRS وفقا لذلك باستخدام تسلسل الأوامر التالي: ضبط إعدادات تحليل > > فتح نافذة جديدة
      1. إعدادات ECG (انقر بزر الماوس الأيمن في نافذة "وضع ECG وتصفية الإشارة" (الملف التكميلي 3)). قم بتعيين المعلمات كما هو مفصل هنا. الوضع: تخطيط القلب, RR فقط, وضع الفلتر: تلقائي, وفقا لضبط HR, معدل ضربات القلب المتوقع: نبضة في الدقيقة > 300, عرض مرشح إزالة خط الأساس (مللي ثانية): 100.00, عرض مرشح إزالة الضوضاء: 1,00 مللي ثانية, مرشح الشق: 50.0 هرتز, مرشح إزالة الارتفاع: إيقاف, وضع الكشف عن التسرب: إيقاف, الحد الأقصى لأطوال RR (مللي ثانية): 900.00, RR من قمم R المعدلة: إيقاف التشغيل, وضع إعدادات RR_only: Xsmall: الماوس ، عرض الذروة R (مللي ثانية): 10.00 ، عرض PR (مللي ثانية): 20.00 ، عرض RT (مللي ثانية): 50.00 ، الحد الأقصى بين القطع الأثرية (٪): 50.00 ، R إلى نسبة السعة الأخرى: 3.00 ، علامة الذروة R: موجبة ، و حساب المعلمة الإضافية: إيقاف
      2. بالنسبة لإعدادات ضغط الدم (BP ، إعدادات الضغط) ، انقر بزر الماوس الأيمن في نافذة "محلل ضغط الدم" (الملف التكميلي 4). قم بتعيين المعلمات كما هو مفصل هنا. عرض مرشح إزالة الضوضاء (مللي ثانية): 10.00, عرض مرشح المشتقات (مللي ثانية): 6.00, مرشح الشق: 50,0 هرتز, مرشح إزالة الارتفاع: إيقاف, حد التحقق (وحدة حرارية (وحدة حرارية): 12.00, عتبة الرفض (وحدة وحدة حرارية): 8.00, المشتق عند بدء الشوط العلوي (وحدة وحدة حرارية / ثانية): 10.00, حدود الرفض: إيقاف, التأخير من مخطط كهربية القلب المرجعي: النافذة المحددة من قبل المستخدم, الحد الأدنى للتأخير من تخطيط القلب Rpeak (مللي ثانية): 10.00, الحد الأقصى للتأخير من تخطيط القلب Rpeak (مللي ثانية): 250.00, Conduct_time_1 من العلامة: غير محسوبة, Conduct_time_2 من العلامة: غير محسوبة, BR (معدل التنفس): إيقاف, BRS (حساسية منعكس الضغط الضغطي): تشغيل, الحد الأدنى لعدد النبضات المتتالية: 3, رقم نبض الكمون: 1, قيمة الضغط: SBP, علامة لحساب الفاصل الزمني للنبض: R, الحد الأدنى لتباين الضغط (caIU): 0.50, الحد الأدنى لتباين الفاصل الزمني (مللي ثانية): 2.00, الحد الأدنى للارتباط: 0.75
    4. افحص إشارة النشاط لتسلسل 3 ساعات مع نشاط منخفض. قم بإجراء تحليل BRS في هذه النافذة الزمنية لأن النشاط العالي للحيوانات يتداخل مع ارتباط BP و RR.
    5. قم بإجراء تحليل BP و RR خلال هذه النافذة الزمنية لمدة 3 ساعات أثناء تقسيم تحليل 3 ساعات إلى خطوات مدتها 10 دقائق.
    6. قم بإجراء تحليل BRS باستخدام تسلسل الأوامر التالي: افتح نافذة تحليل BRS > عرض > تحليل BRS. هذا يفتح لوحة تحليل BRS. افحص يدويا كل تسلسل معروض في لوحة تحليل BRS واستبعد النبضات خارج الرحم أو توقف الجيوب الأنفية أو أحداث عدم انتظام ضربات القلب أو البيانات الصاخبة. تأكد من إبطال كل نبضة من هذه التسلسلات لاستبعادها بنجاح من التحليل.
    7. تصدير نتائج تحليل BRS إلى ملف جدول بيانات (ملف النتائج). تعديل المعلمات التي يتم تصديرها إلى ملف جدول البيانات باستخدام تسلسل الأوامر التالي (الملفات التكميلية 5-7):
      1. ضبط > المعلمات في أقسام > القائمة / الملف > txt (الملف التكميلي 5). حدد قسم "الإيقاعات" وأي قسم آخر يحتوي على معلومات ذات أهمية باستثناء قسم النبضات المبطلة.
      2. ضبط معلمات > في القائمة / إلى ملف > الخطوات > txt (الملف التكميلي 6). اختر قيم الخطوات المراد تصديرها.
      3. ضبط معلمات > في القائمة / إلى ملف > يدق -> txt (الملف التكميلي 7).
      4. تأكد من أن قسم النبضات في الملف يحتوي على الأقل على البيانات التالية لكل نبضة. ECG_RR ، ECG_HR ، BP_SBP ، BP_BRS_deltaP ، BP_BRS_ # (= فترات ضربات متتالية من التسلسل) ، BP_BRS_slope ، BP_BRS_correl ، BP_BRS_shiftl (= RR للنبضة اللاحقة)
      5. ثم انقر فوق ملف > حفظ ملف النتائج.
    8. قم بفرز البيانات المصدرة للتسلسلات لأعلى ولأسفل باستخدام وظيفة التصفية في Excel (الملف التكميلي 8). احسب عدد التسلسلات ومتوسط ميل BRS والانحراف المعياري والخطأ المعياري لميل BRS للتسلسلات لأعلى ولأسفل بشكل منفصل. احسب أيضا المبلغ الإجمالي للتسلسلات لكل 1000 نبضة.
      ملاحظة: يتم توفير نموذج جدول بيانات (TemplateBRS) للفرز والتحليل الآلي للتسلسلات لأعلى ولأسفل في الملحق (الملف التكميلي 8) ويسهل التحليل. من خلال ضبط وظيفة التصفية ، يمكنك فرز التسلسلات حسب أرقام ضربات مختلفة (على سبيل المثال ، تسلسلات ثلاثية أو أربع دقات). لمزيد من التفاصيل انظر الملفات التكميلية 9-13.
      1. افتح ملف النتائج وملف Excel TemplateBRS (الملف التكميلي 8). انسخ بيانات الأعمدة التالية من ملف النتائج: (الضغط) _BRS_deltaP و (الضغط) _BRS_# و (الضغط) _BRS_slope (الملف التكميلي 9). الصق البيانات في الأعمدة المعنية من جداول البيانات "التسلسلات لأعلى" و"التسلسلات السفلية" في ملف TemplateBRS (الملف التكميلي 10). بالإضافة إلى ذلك، انسخ بيانات العمود (الضغط)_BRS_SBP من ملف النتائج (الملف التكميلي 11) والصقه في جدول البيانات "كافة التسلسلات" في ملف TemplateBRS (الملف التكميلي 12).
        ملاحظة: يتم سرد الرقم الموجود في العمود (Pressure)_BRS_# فقط عند آخر نبضة من التسلسل ويصور طول التسلسل. يمكن تمييز التسلسلات لأعلى ولأسفل بعلامة قيمة (الضغط) _deltaP. تشير القيم السالبة للنبضة الثانية والثالثة لتسلسل ثلاثي النبضات إلى تسلسل لأسفل. تشير القيم الإيجابية إلى تسلسل صعودي ، على التوالي.
      2. قم بتصفية البيانات المنسوخة باستخدام إعدادات التصفية الافتراضية. انقر على أيقونة التصفية في عمود (الضغط) _BRS_# واضغط على "موافق" (الملف التكميلي 13). يمكنك تطبيق هذه الخطوة على جداول البيانات "التسلسلات لأعلى" و"التسلسلات لأسفل".
        ملاحظة: يقوم جدول البيانات بتصفية التسلسلات ثلاثية النبضات. إذا تم طلب أطوال تسلسل أخرى ، فيجب تغيير إعداد هذا العمود في القائمة المنسدلة. يتم عرض حسابات عدد التسلسلات ومتوسط ميل BRS والانحراف المعياري والخطأ المعياري لميل BRS في المربعات الخضراء لجداول البيانات "التسلسلات لأعلى" و "التسلسلات السفلية". تظهر حسابات العدد الإجمالي للتسلسلات لكل 1000 نبضة في المربع الأخضر لجدول بيانات "جميع التسلسلات".

Representative Results

نتائج إيجابية للبيانات الأولية ECG و BP
باستخدام هذا البروتوكول ، يمكن الحصول على بيانات ECG و BP عالية الجودة (الشكل 4 والملف التكميلي 14) ، مما يسمح ليس فقط بتحليل BRS الدقيق ولكن أيضا بتحليل مجموعة واسعة من المعلمات المشتقة من ECG أو BP ، على سبيل المثال فترات تخطيط القلب (الشكل 4B ، اللوحة العلوية) ، معلمات ضغط الدم (الشكل 4B ، اللوحة السفلية) ، معدل ضربات القلب وتقلب ضغط الدم ، كشف عدم انتظام ضربات القلب وما إلى ذلك12،13،14،15.

Figure 4
الشكل 4: تسجيلات تخطيط القلب عن بعد و BP. (أ) تتبع ECG تمثيلي وعالي الجودة (اللوحة العلوية) وتسجيلات BP الخام عالية الجودة المقابلة (اللوحة السفلية). (ب) تكبير آثار تخطيط القلب (اللوحة العلوية). يشار إلى الموجة P ومجمع QRS والموجة T وفاصل RR. تكبير بيانات BP المقابلة (اللوحة السفلية). يشار إلى ضغط الدم الانبساطي (DBP) وضغط الدم الانقباضي (SBP). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

نتائج إيجابية لإيقاع الساعة البيولوجية
يظهر الفأر السليم الذي تعافى بشكل كاف من الجراحة زيادة فسيولوجية في النشاط ، HR و BP خلال مرحلة النشاط (الظلام) (الشكل 5). يمكن للعديد من العوامل المختلفة أن تزعج هذا الإيقاع اليومي المنتظم. وتشمل هذه الإجهاد النفسي والضوضاء الصوتية أو الكهربائية والألم. على سبيل المثال ، تؤدي حالة الألم الحاد بعد الجراحة مباشرة إلى زيادة معدل ضربات القلب مع انخفاض متزامن في النشاط. لذلك ، يعد إيقاع الساعة البيولوجية مؤشرا مهما لصحة الحيوان ورفاهه ويجب فحصه بشكل روتيني قبل تحليل BRS.

Figure 5
الشكل 5: تحليل قياسات القياس عن بعد على المدى الطويل لتحديد تغيرات إيقاع الساعة البيولوجية. بلغ متوسط إيقاع الساعة البيولوجية لمعدل ضربات القلب (A) والنشاط (B) وضغط الدم الانقباضي (C) وضغط الدم الانبساطي (D) من 9 ذكور من الفئران من النوع البري C57BL / 6J خلال دورات الضوء والظلام لمدة 12 ساعة. تصور المناطق الرمادية مرحلة النشاط (المظلمة) والمناطق البيضاء تصور مرحلة الراحة (الضوء) للحيوانات. جميع المعلمات مرتفعة من الناحية الفسيولوجية خلال مرحلة نشاط الحيوان (الظلام). يتم تمثيل البيانات كمتوسط +/- SEM. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

نتائج إيجابية لتحليل BRS
بعد إجراء التحليل كما هو موضح في قسم البروتوكول 2.8 ، سيكتشف البرنامج التسلسلات لأعلى ولأسفل ، على التوالي. تسمى الطريقة المستخدمة طريقة التسلسل حيث يتم فحص التغييرات في فترات SBP و RR على أساس الضرب للضرب خلال تسلسلات قصيرة من ثلاث نبضات أو أكثر مع ارتفاع أو انخفاض تلقائي في SBP (الشكل 6). يؤدي الارتفاع المستمر في SBP على مدى ثلاث دقات قلب إلى زيادة منعكسة في النشاط السمبتاوي وبالتالي يبطئ HR ، وهو ما يعادل فترات RR أطول. زمن انتقال التكيف المنعكس للموارد البشرية هو نبضة واحدة. يظهر هذا التسلسل في الشكل 6 أ ويتم تعريفه على أنه تسلسل لأعلى. في المقابل ، يتم تعريف الانخفاض المستمر في SBP على مدى ثلاث نبضات مع ارتفاع مواز في HR (انخفاض في فترة RR) على أنه تسلسل لأسفل (الشكل 6B). ولتقييم العلاقة بين RR وSBP، ترسم كلتا المعلمتين مقابل بعضهما البعض ويحسب الميل (ms/mmHg) لخط الانحدار الخطي لكل تسلسل (الشكل 6A، B، الألواح السفلية). بعد الفرز حسب التسلسلات لأعلى ولأسفل ، يمكن حساب متوسط عدد التسلسلات لكل 1000 نبضة (الشكل 6C) ومتوسط كسب BRS التلقائي للتسلسلات لأعلى ولأسفل ، على التوالي (الشكل 6D ، E). ينعكس كسب BRS التلقائي من خلال ميل خط الانحدار الخطي المحسوب من علاقة RR / SBP. يمكن أن يكون للانحراف عن قيم BRS العادية أسباب مختلفة. وتشمل هذه التغيرات في مدخلات ANS أو التغيرات في استجابة العقدة الجيبية الأذينية لمدخلات الجهاز العصبي اللاإرادي. في الشكل 6 ، تظهر زيادة BRS في نموذج فأر لمتلازمة العقدة الجيبية المريضة (SSS) مع استجابة مبالغ فيها للعقدة الجيبية الأذينية للمدخلات المبهمية11.

Figure 6
الشكل 6: تقدير BRS باستخدام طريقة التسلسل. (A) تتبع BP التمثيلي لماوس C57BL / 6J من النوع البري أثناء تسلسل لأعلى من ثلاث نبضات متتالية (اللوحة العلوية) المرتبطة بزيادة موازية في فاصل RR (اللوحة الوسطى) وهو ما يعادل انخفاضا في الموارد البشرية. تم رسم فترات RR مقابل SBP (اللوحة السفلية). كان ميل خط الانحدار (الخط الأحمر) للتسلسل العلوي الموضح في اللوحة العلوية والوسطى (WT ، الدوائر السوداء) 4.10 مللي ثانية / مم زئبق. أسفرت علاقة RR / SBP التمثيلية لنموذج فأر متلازمة الجيوب الأنفية المريضة عن ميل متزايد قدره 6.49 مللي ثانية / مم زئبق مما يشير إلى ارتفاع BRS (SSS ، الدوائر الرمادية). (B) تسلسل تمثيلي لأسفل لفأر من النوع البري مع انخفاض في SBP (اللوحة العلوية) وانخفاض لاحق في فترة RR (اللوحة الوسطى) مما ينتج عنه ميل BRS قدره 4.51 مللي ثانية / مم زئبق (اللوحة السفلية؛ WT ، الدوائر السوداء). علاقة تمثيلية RR / SBP لنموذج فأر متلازمة الجيوب الأنفية المريضة (SSS ، دوائر رمادية) بميل 7.10 مللي ثانية / مم زئبق. يشير اتجاه رؤوس الأسهم الحمراء إلى اتجاه التسلسلات (تسلسل لأعلى أو لأسفل). (ج) إجمالي مقدار التسلسلات لكل 1000 نبضة لفئران WT و SSS. (د) متوسط ميل علاقة RR / SBP للتسلسلات الصاعدة لفئران WT و SSS. (ه) متوسط ميل علاقة RR / SBP للتسلسلات السفلية لفئران WT و SSS. تم إجراء الإحصاء في (C-E) من نتائج ستة ذكور من WT وثمانية ذكور من نموذج فأر متلازمة الجيوب الأنفية المريضة. تظهر Boxplots الخط الوسيط ، perc 25/75 ، والقيمة الدنيا / القصوى ؛ تمثل الرموز المفتوحة القيمة المتوسطة. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

نتيجة سلبية لجودة البيانات الأولية
خاصة خلال مراحل النشاط العالي قد تنخفض جودة الإشارة (الشكل 7 والملفات التكميلية 15،16). يمكن أن يحدث هذا بسبب الإزاحة المؤقتة أو الوضع غير الصحيح لقسطرة ضغط الدم أو يؤدي تخطيط القلب أو كليهما بسبب حركة الحيوان. أيضا ، قد يتم الكشف عن نشاط العضلات الهيكلية من أسلاك تخطيط القلب وإحداث ضوضاء (الشكل 7B ، اللوحة العلوية). مع إعدادات البرنامج الموضحة أعلاه ، لا يتم اكتشاف هذه النبضات منخفضة الجودة وبالتالي يتم استبعادها من التحليل. ومع ذلك ، فإن الفحص اليدوي للبيانات الخام التي تم تحليلها إلزامي.

Figure 7
الشكل 7: أمثلة على الإشارات الخام منخفضة الجودة . (أ) يتم الكشف عن إشارة ECG (اللوحة العلوية) بجودة جيدة ، لكن جودة إشارة BP (اللوحة السفلية) منخفضة. (ب) صفات إشارة ECG (اللوحة العلوية) و BP (اللوحة السفلية) ليست كافية. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

النتائج السلبية لتحليل BRS
تعد إعدادات تحليل BRS المدرجة في قسم البروتوكول 3.8.2 ضرورية بشكل عام للكشف السريع والصحيح عن التسلسلات لأعلى ولأسفل. يتم تعيين الحد الأدنى لمعامل الارتباط لخط الانحدار على 0.75. يؤدي تحديد قيم منخفضة للغاية للحد الأدنى من معامل الارتباط إلى اكتشافات خاطئة للتسلسلات التي لا تعكس نشاط المنعكس الضغطي ولكنها تنتج عن ضربات عدم انتظام ضربات القلب (الشكل 8). بالنسبة لتحليل BRS ، يجب تحليل النوبات ذات إيقاع الجيوب الأنفية المستقر فقط. يمكن العثور على النبضات خارج الرحم أو غيرها من أحداث عدم انتظام ضربات القلب ، على سبيل المثال ، توقف الجيوب الأنفية ، مع خيار HRV لبرنامج تحليل ECG و BP ويجب إبطالها.

Figure 8
الشكل 8: التتابعات التي لا تعكس نشاط المنعكس الضغطي. أ: تتبع مخطط كهربية القلب لفأر مصاب باضطراب نظم الجيوب الأنفية الخفيف. (ب) تسجيل BP يصور زيادة تلقائية في SBP. (ج) تشير فترات RR المقابلة إلى انخفاض الموارد البشرية عند زيادة BP. (د) مخطط SBP وفترات RR المقابلة. يشير معامل الارتباط المنخفض لخط الانحدار إلى أن انخفاض الموارد البشرية لم يكن ناتجا عن نشاط المنعكس الضغطي بل عن خلل نظم النظم الجيبي. (ه) تتبع مخطط كهربية القلب الخام الذي يصور توقف الجيوب الأنفية. (F) إشارة BP الخام المقابلة. يؤدي توقف الجيوب الأنفية إلى انخفاض في ضغط الدم الانبساطي. ضغط الدم الانقباضي من النبض اللاحق لا يتأثر تقريبا. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الملف التكميلي 1: بروتوكول الجراحة. نموذج لتوثيق الإجراء الجراحي والرعاية بعد الجراحة. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

الملف التكميلي 2: تحويل بيانات Dataquest A.R.T إلى بيانات IOX للتحليل في برنامج ecgAUTO. حدد الحيوانات في قائمة الموضوعات (يسار) والضغط وتخطيط القلب في قائمة الأشكال الموجية (يمين). اضغط على موافق لتحويل البيانات. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

الملف التكميلي 3: إعدادات تخطيط القلب لتحليل BRS. قم بتعيين المعلمات كما هو مدرج ، واضغط على موافق وقم بتطبيق التكوين. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

الملف التكميلي 4: إعدادات BP لتحليل BRS. قم بتعيين المعلمات كما هو مدرج ، واضغط على موافق وقم بتطبيق التكوين. احفظ التكوين كملف تكوين لتتمكن من تحميل الإعدادات بسهولة. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

الملف التكميلي 5: المعلمات في نافذة القائمة / إلى الملف ل "الأقسام". اختر الأقسام المراد تصديرها ضمن الأقسام > رأس txt (المحدد) واضغط على تطبيق!. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

الملف التكميلي 6: المعلمات في نافذة القائمة / إلى الملف ل "الخطوات". اختر بيانات الخطوة المراد تصديرها ضمن الخطوات > رأس txt (المحدد) واضغط على تطبيق!. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

الملف التكميلي 7: المعلمات في نافذة القائمة / إلى الملف ل "beats". اختر القيم المراد تصديرها تحت رأس > txt (المحدد ) واضغط على تطبيق!. بالنسبة لتحليل BRS ، فإن المعلمات المحددة ضرورية. لاحظ ترتيب الاختيار المشار إليه بالأرقام. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

الملف التكميلي 8: ملف جدول بيانات TemplateBRS. قالب جدول بيانات للفرز الآلي وتحليل التسلسلات لأعلى ولأسفل. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

الملف التكميلي 9: نسخ البيانات ذات الصلة من ملف النتائج I. انسخ الأعمدة (الضغط) _BRS_deltaP و (الضغط) _BRS_ # و (الضغط)_BRS_slope من ملف النتائج. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

الملف التكميلي 10: ملف قالب جدول البيانات (TemplateBRS) لفرز البيانات وتحليلها I. الصق البيانات المنسوخة في الأعمدة المعنية من جدول البيانات "التسلسلات لأعلى" و"التسلسلات السفلية" في ملف جدول بيانات TemplateBRS. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

الملف التكميلي 11: نسخ البيانات ذات الصلة من ملف النتائج II. انسخ العمود (الضغط)_BRS_SBP من ملف النتائج. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

الملف التكميلي 12: ملف قالب جدول بيانات (TemplateBRS) لفرز البيانات وتحليلها II. الصق بيانات SBP المنسوخة في جدول البيانات "كافة التسلسلات" في ملف جدول بيانات TemplateBRS لحساب العدد الإجمالي للتسلسلات. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

الملف التكميلي 13: تصفية وتحليل التسلسلات. في جدول بيانات "التسلسلات لأعلى" لملف جدول بيانات TemplateBRS ، افتح القائمة المنسدلة لمرشح العمود (Pressure)_BRS_# واضغط على موافق دون تغيير أي معلمات. سيؤدي هذا تلقائيا إلى فرز البيانات وتحديث الحسابات للتسلسلات باستخدام 3 نبضات. كرر هذا لجدول بيانات "التسلسلات السفلية". الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

الملف التكميلي 14: لقطة شاشة لتسجيل عالي الجودة تم اكتشافه باستخدام برنامج تحليل ECG و BP. يظهر التتبع العلوي (ECG) الكشف عن كل ذروة R ويظهر التتبع السفلي (BP) اكتشاف كل ذروة ضغط انبساطي (DP) وضغط انقباضي (SP). يتم تمييز المناطق الواقعة تحت القمم المكتشفة بنجاح باللون الأحمر. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

الملف التكميلي 15: لقطة شاشة لتسجيل BP منخفض الجودة حيث يتم اكتشاف معلمات BP جزئيا فقط. يظهر التتبع العلوي (ECG) اكتشاف كل قمة R ولكن التتبع السفلي (BP) يظهر فجوات بين قمم BP المكتشفة. يتم تمييز القمم المكتشفة للضغط الانبساطي (DP) والضغط الانقباضي (SP) بمناطق حمراء. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

الملف التكميلي 16: لقطة شاشة لتسجيل ECG و BP منخفض الجودة حيث تعذر اكتشاف معلمات ECG و BP. يظهر التتبع العلوي (ECG) منطقة (خلفية أرجوانية) حيث تعذر اكتشاف معلمات ECG. فشل اكتشاف BP (التتبع السفلي) أيضا بسبب انخفاض جودة الإشارة. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

Discussion

أهمية الطريقة فيما يتعلق بالطرق البديلة
في العمل الحالي ، نقدم بروتوكولا مفصلا لتحديد BRS التلقائي باستخدام طريقة التسلسل. يستخدم هذا النهج تغيرات ضغط الدم التلقائية والموارد البشرية المنعكسة التي يتم قياسها بواسطة القياس عن بعد ECG و BP. ميزة هذه الطريقة هي أنه يمكن تسجيل كلا المعلمتين في الحيوانات الواعية ، التي تتحرك بحرية ، وغير المقيدة دون إزعاج الحيوانات عن طريق المشي في الغرفة حيث يتم إجراء القياسات أو حتى عن طريق التفاعل الجسدي المطلوب لحقن المخدرات. هذه النقطة مهمة للغاية حيث ثبت بوضوح أن مثل هذه الاضطرابات تتداخل بشدة مع تسجيلات الموارد البشرية و BP. على سبيل المثال ، يتطلب حقن الأدوية تثبيت الفئران ، مما يؤدي إلى أقصى استجابة للإجهاد تزيد من الموارد البشرية حتى 650-700 نبضة في الدقيقة. للتحايل على استجابات الإجهاد هذه ، تم تحديد BRS مسبقا في الفئران المخدرة. ومع ذلك ، فإن التخدير القياسي المستخدم في الطب البيطري مثل الكيتامين / الزيلازين أو الأيزوفلوران يحفز بطء القلب ويؤثر على الاستجابات المنعكسة اللاإرادية ، مما يحد من صحة هذه الأساليب وتفسير النتائج. للتغلب جزئيا على هذه القيود ، تم استخدام أجهزة توصيل الأدوية القابلة للزرع ، أي المضخات التناضحية ، والتي يمكنها إطلاق الأدوية في التجويف البريتوني. ومع ذلك ، مع المضخات الاسموزية ، لا يمكن تطبيق بلعة جرعة محددة من الدواء مما يحد من تطبيق هذه الأجهزة. بدلا من ذلك ، قسطرة التسريب المعقدة17 يمكن زرعها في الفئران من أجل إعطاء الأدوية. ومع ذلك ، يصعب التعامل مع هذه القسطرة وتتطلب مهارات جراحية مماثلة لتلك المطلوبة لزرع أجهزة القياس عن بعد ، مع إنتاج نتائج علمية أقل مقارنة بقياسات BRS التلقائية. إلى جانب القضايا التقنية المرتبطة بقياس BRS باستخدام حقن المخدرات ، هناك بعض القيود المتعلقة بعمل الدواء في حد ذاته. تشمل الطرق التقليدية لتحديد BRS حقن البلعة للأدوية الفعالة في الأوعية. ومع ذلك ، فقد تم اعتبار حقن البلعة من مضيقات الأوعية (على سبيل المثال ، فينيليفرين) أو موسعات الأوعية (على سبيل المثال ، نيتروبروسيد الصوديوم) حافزا مفرطا وغير فسيولوجي لتكيف HR الانعكاسي مع التغيرات في ضغط الدم18. يمكن أيضا قياس النشاط التلقائي لمنعكس مستقبلات الضغط باستخدام الطرق الطيفية. تقوم إحدى هذه الطرق بتقييم BRS في مجال التردد عن طريق حساب النسبة بين التغيرات في HR والتغيرات في ضغط الدم في نطاق تردد معين18,19. تتضمن الطرق الطيفية الأخرى تحديد وظيفة نقل BP و HR أو تحديد التماسك بين BP و HR20,21. تتطلب هذه الطرق أيضا الحصول على القياس عن بعد لمعلمات BP و HR التلقائية ، وفي حين أنها مناسبة لتحديد BRS التلقائي ، إلا أنها تتطلب أدوات حسابية مكثفة ويصعب تطبيقها. وعلاوة على ذلك، تعاني جميع الطرق الطيفية من القيود التي تحول فيها الإشارات غير الثابتة دون تطبيق الأساليب الطيفية. على وجه الخصوص ، يمكن تقليل القمم الطيفية التي تسببها إيقاعات التنفس في المرضى من البشر عن طريق مطالبة المريض بالتوقف عن التنفس ، في حين أن هذا غير ممكن بشكل واضح في الفئران. لذلك ، غالبا ما تكون نسبة الإشارة إلى الضوضاء منخفضة جدا في الفئران. نظرا لقيود الطرق التي تمت مناقشتها أعلاه ، فإننا نفضل طريقة التسلسل لتحديد BRS في الفئران. ميزة كبيرة لهذه الطريقة هي حقيقة أنها تقنية غير جراحية توفر بيانات عن BRS التلقائي في ظل ظروف الحياة الحقيقية22. نقطة أخرى مهمة هي أن مدة التسلسلات التي تم تحليلها باستخدام طريقة التسلسل قصيرة جدا ، وتشمل 3-5 نبضات. التنظيم الانعكاسي للموارد البشرية بواسطة العصب المبهم سريع جدا وجيد ضمن الإطار الزمني لهذه التسلسلات. لذلك ، فإن طريقة التسلسل مناسبة تماما لتقييم مساهمة العصب المبهم في BRS. على النقيض من ذلك ، يكون التنظيم بواسطة الجهاز العصبي السمبثاوي أبطأ بكثير. في الواقع، خلال هذه التتابعات القصيرة، يمكن افتراض أن نشاط الجهاز العصبي السمبثاوي ثابت تقريبا. لذلك ، يتم تخصيص الطريقة للكشف بشكل انتقائي عن التغييرات المنعكسة للموارد البشرية المدفوعة بنشاط العصب المبهم.

تفسير بيانات BRS
لتفسير الخلل الوظيفي BRS أو بيانات BRS في حد ذاتها ، من المهم مراعاة المستويات الوظيفية الفردية التي تشارك في منعكس مستقبلات الضغط. على المستوى العصبي ، قد تتأثر المكونات الواردة أو المركزية أو الصادرة من المنعكس23. على مستوى القلب والأوعية الدموية ، قد تكون الاستجابة المنخفضة أو المبالغ فيها للعقدة الجيبية الأذينية لمدخلات ANS موجودة11،24. ويمكن أن يؤدي أي تغيير على كل مستوى إلى تغييرات في BRS. من أجل تشريح ما إذا كانت الآليات العصبية و / أو القلبية مسؤولة عن التغيرات الملحوظة في BRS ، يمكن استخدام حذف الجينات الخاصة بالقلب أو الخلايا العصبية أو طرق تحرير الجينات.

الخطوات الحاسمة في البروتوكول
الخطوة الأكثر تطورا وأهمية في هذا البروتوكول هي تحضير وقنية الشريان السباتي الأيسر (الخطوة 2.3). يجب أن يكون توتر خياطة الانسداد الذيلي مرتفعا بدرجة كافية لإيقاف تدفق الدم تماما قبل القنية. خلاف ذلك ، حتى تسرب الدم الصغير أثناء القنية يمكن أن يحد بشدة من الرؤية أو حتى يتسبب في نزيف الفأر حتى الموت. يجب أن يكون القنية ناجحا في المحاولة الأولى. ومع ذلك ، عند فشل المحاولة الأولى ، لا يزال من الممكن إعادة محاولة القنية بعناية.

يجب أن يكون شق خط الوسط والنفق تحت الجلد من الرقبة إلى الجهة اليسرى (الخطوة 2.3) كبيرا بما يكفي لإدخال جهاز الإرسال بسهولة دون قوة ولكن يجب أيضا أن يكون صغيرا قدر الإمكان للحفاظ على جهاز الإرسال في مكانه. خلاف ذلك ، سوف يحتاج المرء إلى قفله في موضعه بمادة خياطة أو مادة لاصقة للأنسجة. نظرا لأن الفئران لديها جلد حساس للغاية ، يمكن أن يحدث نخر الجلد إذا كان نفق جهاز الإرسال صغيرا جدا.

إذا كانت أقطاب ECG طويلة جدا بحيث لا تتناسب مع النفق تحت الجلد (الخطوة 2.4) ، فمن الضروري تكوين طرف جديد عن طريق تقصير القطب إلى طول مناسب. يجب أن يكون القطب مسطحا على الجسم على طول الرصاص بالكامل. سوف تزعج الأقطاب الكهربائية الطويلة جدا الحيوانات وستحاول فتح الجرح لإزالة جهاز الإرسال ، مما يؤدي إلى خطر تهيج الأنسجة وتفكك الجرح. لا يمكن بالطبع تمديد الخيوط القصيرة جدا وقد يكون في هذه الحالة لا يمكن وضع الأقطاب الكهربائية بطريقة تتوافق مع تكوين Einthoven II. لذلك نوصي بتحديد الطول الأمثل لخيوط تخطيط القلب على فأر ميت من نفس الجنس والوزن والخلفية الوراثية.

يجب إعطاء الفئران وقتا أطول للتعافي بعد زرع جهاز الإرسال إذا لم يكن لديهم إيقاع يومي طبيعي وهذا ليس النمط الظاهري لخط الفأر قيد الدراسة (الخطوة 2.7). سبب آخر لإيقاعات الساعة البيولوجية المضطربة يمكن أن يكون عدم كفاية العزل الصوتي لمرفق الحيوانات أو الأفراد الذين يدخلون الغرفة أثناء القياس.

تحليل بيانات ECG و BP و BRS مباشر (الخطوة 2.8). الخطوة الأكثر أهمية هي استبعاد النبضات خارج الرحم أو توقف الجيوب الأنفية أو نوبات عدم انتظام ضربات القلب أو الأقسام ذات الإشارات منخفضة الجودة من تحليل البيانات.

Disclosures

اي

Acknowledgments

تم دعم هذا العمل من قبل مؤسسة الأبحاث الألمانية [FE 1929 / 1-1 و WA 2597 / 3-1]. نشكر ساندرا ديرشل على المساعدة الفنية الممتازة وجوليا ريلينج على المشورة البيطرية.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Acepromazine maleate (Tranquisol KH) Solution Injectable 0.5 mg/mL CP-Pharma, Germany 1229 anesthesia
B.Braun Injekt-F 1 mL syringe Wolfram Droh GmbH, Germany 9166017V
Bepanthen eye and nose ointment Bayer AG, Germany
Blunt dissecting scissors Fine Science Tools GmbH, Germany 14078-10
Carprofen (Carprosol) 50 mg/mL CP-Pharma, Germany 115 preemptive and post-operative pain relief
Cutasept F skin desinfectant BODE Chemie GmbH, Germany 9803650
Cotton Tipped Applicator sterile Paul Boettger GmbH & Co. KG, Germany 09-119-9100
Forceps - Micro-Blunted Tips Fine Science Tools GmbH, Germany 11253-25
Forceps - straight Fine Science Tools GmbH, Germany 11008-13
Gauze swabs with cut edges, 7.5x7.5 cm, cotton Paul Hartmann AG. Germany 401723
HD?X11, Combined telemetric ECG and BP transmitters  Data Sciences International, United States
Homothermic blanket system with flexible probe Harvard Apparatus, United States
Hot bead sterilizer Fine Science Tools GmbH, Germany 18000-45
Ketamine 10% Ecuphar GmbH, Germany 799-760 anesthesia
Magnet Data Sciences International, United States transmitter turn on/off
Needle holder, Olsen-Hegar with suture cutter Fine Science Tools GmbH, Germany 12502-12
Needle single use No. 17, 0.55 x 25 mm Henke-Sass Wolf GmbH, Germany 4710005525 24 G needle
Needle single use No. 20, 0.40 x 20 mm Henke-Sass Wolf GmbH, Germany 4710004020 27 G needle
Needle-suture combination, sterile, absorbable (6-0 USP, metric 0.7, braided) Resorba Medical, Germany PA10273 lead fixation
Needle-suture combination, sterile, silk (5-0 USP, metric 1.5, braided) Resorba Medical, Germany 4023 skin closure
OPMI 1FR pro, Dissecting microscope Zeiss, Germany
Pilca depilatory mousse Werner Schmidt Pharma GmbH, Germany 6943151
PVP-Iodine hydrogel 10% Ratiopharm, Germany
Ringer's lactate solution B. Braun Melsungen AG, Germany 401-951                                                               
Sensitive plasters, Leukosilk BSN medical GmbH, Germany 102100 surgical tape
Sodium chloride solution 0.9% sterile Miniplasco Connect 5 ml B. Braun Melsungen AG, Germany
Surgibond tissue adhesive SMI, Belgium ZG2
Suture, sterile, silk, non-needled (5-0 USP, metric 1 braided) Resorba Medical, Germany G2105 lead preparation, ligation sutures
Trimmer, Wella Contura type 3HSG1 Procter & Gamble
Vessel Cannulation Forceps Fine Science Tools GmbH, Germany 18403-11
Xylazine (Xylariem) 2% Ecuphar GmbH, Germany 797469 anesthesia
Data acquisition and analysis Source
DSI Data Exchange Matrix Data Sciences International, United States
DSI Dataquest ART 4.33 Data Sciences International, United States data aquisition software
DSI Ponemah Data Sciences International, United States data aquisition software
DSI PhysioTel HDX-11 for mice Data Sciences International, United States
DSI PhysioTel receivers RPC1 Data Sciences International, United States
ecgAUTO v3.3.5.11 EMKA Technologies ECG and BP analysis software
Microsoft Excel Microsoft Corporation, United States

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Landgren, S. On the excitation mechanism of the carotid baroceptors. Acta Physiologica Scandinavica. 26 (1), 1-34 (1952).
  2. Heyman, C., Neil, E. Reflexogenic areas of the cardiovascular system. British Journal of Surgery. 46 (195), J. & A. Churchill Ltd. London. 92 (1958).
  3. Lu, Y., et al. The ion channel ASIC2 is required for baroreceptor and autonomic control of the circulation. Neuron. 64 (6), 885-897 (2009).
  4. Fadel, P. J., Raven, P. B. Human investigations into the arterial and cardiopulmonary baroreflexes during exercise. Experimental Physiology. 97 (1), 39-50 (2012).
  5. Nagura, S., Sakagami, T., Kakiichi, A., Yoshimoto, M., Miki, K. Acute shifts in baroreflex control of renal sympathetic nerve activity induced by REM sleep and grooming in rats. The Journal of Physiology. 558, Pt 3 975-983 (2004).
  6. Crandall, C. G., Cui, J., Wilson, T. E. Effects of heat stress on baroreflex function in humans. Acta Physiologica Scandinavica. 177 (3), 321-328 (2003).
  7. Crandall, M. E., Heesch, C. M. Baroreflex control of sympathetic outflow in pregnant rats: effects of captopril. The American Journal of Physiology. 258 (6), Pt 2 1417-1423 (1990).
  8. Mortara, A., et al. Arterial baroreflex modulation of heart rate in chronic heart failure: clinical and hemodynamic correlates and prognostic implications. Circulation. 96 (10), 3450-3458 (1997).
  9. La Rovere, M. T., Bigger, J. T., Marcus, F. I., Mortara, A., Schwartz, P. J. Baroreflex sensitivity and heart-rate variability in prediction of total cardiac mortality after myocardial infarction. ATRAMI (Autonomic Tone and Reflexes After Myocardial Infarction) Investigators. Lancet. 351 (9101), 478-484 (1998).
  10. Robinson, T. G., Dawson, S. L., Eames, P. J., Panerai, R. B., Potter, J. F. Cardiac baroreceptor sensitivity predicts long-term outcome after acute ischemic stroke. Stroke. 34 (3), 705-712 (2003).
  11. Fenske, S., et al. cAMP-dependent regulation of HCN4 controls the tonic entrainment process in sinoatrial node pacemaker cells. Nature Communications. 11 (1), 5555 (2020).
  12. Fenske, S., et al. Comprehensive multilevel in vivo and in vitro analysis of heart rate fluctuations in mice by ECG telemetry and electrophysiology. Nature Protocols. 11 (1), 61-86 (2016).
  13. Thireau, J., Zhang, B. L., Poisson, D., Babuty, D. Heart rate variability in mice: a theoretical and practical guide. Experimental Physiology. 93 (1), 83-94 (2008).
  14. Cesarovic, N., Jirkof, P., Rettich, A., Arras, M. Implantation of radiotelemetry transmitters yielding data on ECG, heart rate, core body temperature and activity in free-moving laboratory Mice. Journal of Visualized Experiments. (57), e3260 (2011).
  15. Alam, M. A., Parks, C., Mancarella, S. long-term blood pressure measurement in freely moving mice using telemetry. Journal of Visualized Experiments. (111), e53991 (2016).
  16. Brox, V. Optical and electrophysiological approaches to examine the role of cAMP-dependent regulation of the sinoatrial pacemaker channel HCN4. Dissertation, LMU Munich. , Available from: https://edoc.ub.uni-muenchen.de/24431/1/Brox_Verena.pdf (2019).
  17. Just, A., Faulhaber, J., Ehmke, H. Autonomic cardiovascular control in conscious mice. American Journal of Physiology-Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 279 (6), 2214-2221 (2000).
  18. Parati, G., Di Rienzo, M., Mancia, G. How to measure baroreflex sensitivity: from the cardiovascular laboratory to daily life. Journal of Hypertension. 18 (1), 7-19 (2000).
  19. Robbe, H. W., et al. Assessment of baroreceptor reflex sensitivity by means of spectral analysis. Hypertension. 10 (5), 538-543 (1987).
  20. Pinna, G. D., Maestri, R., Raczak, G., La Rovere, M. T. Measuring baroreflex sensitivity from the gain function between arterial pressure and heart period. Clinical Science. 103 (1), 81-88 (2002).
  21. Pinna, G. D., Maestri, R. New criteria for estimating baroreflex sensitivity using the transfer function method. Medical and Biological Engineering and Computing. 40 (1), 79-84 (2002).
  22. Laude, D., Baudrie, V., Elghozi, J. L. Applicability of recent methods used to estimate spontaneous baroreflex sensitivity to resting mice. American Journal of Physiology-Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 294 (1), 142-150 (2008).
  23. Ma, X., Abboud, F. M., Chapleau, M. W. Analysis of afferent, central, and efferent components of the baroreceptor reflex in mice. American Journal of Physiology-Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 283 (5), 1033-1040 (2002).
  24. Fleming, S., et al. Impaired Baroreflex Function in Mice Overexpressing Alpha-Synuclein. Frontiers in Neurology. 4 (103), (2013).

Tags

الطب ، العدد 168 ، حساسية مستقبلات الضغط ، المنعكس الضغطي ، القياس عن بعد ، ضغط الدم الشرياني ، مخطط كهربية القلب ECG ، وظيفة العقدة الجيبية الأذينية ، الجهاز العصبي اللاإرادي ، علامة التشخيص ، أمراض القلب والأوعية الدموية ، نموذج الماوس
زرع جهاز إرسال تخطيط القلب عن بعد وضغط الدم لتحديد حساسية منعكس الضغط التلقائي في الفئران الواعية
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Rötzer, R. D., Brox, V. F.,… More

Rötzer, R. D., Brox, V. F., Hennis, K., Thalhammer, S. B., Biel, M., Wahl-Schott, C., Fenske, S. Implantation of Combined Telemetric ECG and Blood Pressure Transmitters to Determine Spontaneous Baroreflex Sensitivity in Conscious Mice. J. Vis. Exp. (168), e62101, doi:10.3791/62101 (2021).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter