정소성 췌장 종양 이종이식편의 DCE-MRI: 표적 종양 조직의 미세혈관 구조를 평가하는 방법

- 매우 무질서하고 비정상적인 혈관의 광범위한 네트워크는 종양의 성장과 전이를 지원합니다. 이 미세혈관 구조를 평가하기 위해 마취된 종양이 있는 쥐를 데리고 열 램프 아래에서 꼬리 정맥을 확장하십시오. 적절한 MRI 조영제가 들어 있는 주사기에 부착된 의료용 마이크로튜빙 어셈블리를 정맥 주사합니다. 플라스틱 보드에 꼬리를 고정합니다.

체온을 조절하기 위해 마우스를 따뜻한 침대에 눕히십시오. 직각으로 구부러진 플라스틱 보드를 복부에 바르고 아래로 당겨 종양을 잡고 고정합니다. 프로브를 수정하여 바이탈 사인을 모니터링합니다. 종양 부위에 표면 코일을 놓고 동물을 Dynamic Contrast-Enhanced Magnetic Resonance Imaging(DCE-MRI 스캐너)에 밀어 넣습니다. 조영제를 주입하고 스캔을 시작합니다.

종양 혈관 구조의 과투과성 형태학으로 인해, 조영제의 도입은 종양 조직의 세포 외 공간 내에서 빠른 누출 및 축적을 초래합니다. 표면 코일은 조영제의 분포에 따라 조직에서 방출되는 MR 신호 강도의 변화를 포착하고 종양 혈관 구조의 범위를 정량화하는 데 도움이 됩니다. 다음 프로토콜에서는 정소성 췌장 종양 이종이식편을 가진 마우스의 DCE-MRI를 수행합니다.

- 종양의 직경이 5-7mm에 도달하면 마이크로 폴리에틸렌 튜브의 한쪽 끝에 날카로운 30 게이지 바늘을 삽입하고 다른 쪽 끝에 뭉툭한 30 게이지 바늘 끝을 삽입합니다. 갓 준비한 MRI 조영제가 들어 있는 1ml 주사기를 뭉툭한 바늘 끝에 연결하고 플런저를 천천히 눌러 튜브 전체를 채웁니다. 그런 다음 열 램프 아래에서 동물의 꼬리 혈관을 확장하고 켈리 집게를 사용하여 날카로운 30게이지 바늘의 축을 잡습니다. 팽창된 꼬리 정맥 중 하나에 바늘을 조심스럽게 삽입하고 꼬리와 튜브를 모두 10 x 100mm 플라스틱 조각에 테이프로 붙여 꼬리를 똑바로 유지합니다.

다음으로, 이미징하는 동안 동물의 체온을 조절하기 위해 순환하는 따뜻한 물이 있는 동물 침대에 누운 쥐를 놓습니다. 이때도 직장 온도 프로브를 삽입하십시오. 동물이 제자리에 있을 때 직각으로 구부러진 플라스틱 보드를 복부에 적용하여 종양이 보드의 상단 끝 뒤에 있는지 확인한 다음 보드를 약 2mm 아래로 당겨 종양이 잡히도록 합니다.

보드를 동물 침대에 단단히 테이프로 붙인 다음 호흡 패드 변환기를 가슴 부위에 테이프로 붙여서 이미징 중에 동물의 호흡을 모니터링합니다.