전자 코를 사용하여 과일 휘발성 분석

이 절차의 전반적인 목표는 과일의 휘발성 화합물을 신속하게 분석하는 것입니다. 이것은 먼저 과일 조직을 절단하고 균질화함으로써 이루어집니다. 그런 다음 액체 샘플 위의 증기상을 전자 코로 분석합니다.

전자 코 분석에 따라 데이터를 내보내고 변환합니다. 절차의 마지막 단계는 covas index window를 식별하고 그래픽 인터페이스를 사용하여 단일 covas index label 아래에 peaks를 통합하는 것입니다. 궁극적으로, 결과는 전자 코로 측정한 과일 난포의 풍부도 차이가 과일 품종, 성숙도 및 저장과 같은 실험적 처리와 관련이 있을 수 있음을 보여줍니다.

기존 가스 크로마토그래피와 같은 기존 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 과일의 휘발성 화합물을 보다 신속하게 분석할 수 있다는 것입니다. 이 분석을 수행할 때 분석물 머무름 시간에 약간의 변화가 발생할 수 있습니다. 이로 인해 피크 정렬 프로세스를 신중하게 고려하지 않고 데이터를 잘못 해석할 수 있습니다.

원하는 성숙 단계에서 과일을 수확한 후 수돗물로 헹굽니다. 먼지와 먼지를 제거하려면 분석할 과일을 선택하십시오. 외부 및 내부 결함과 크기가 없기 때문에 균질성은 과일을 휘발성 샘플링에 사용하기 위해 세로로 쐐기로 절단했습니다.

해당되는 경우 껍질 씨앗, 씨앗 구멍 조직 또는 씨 과일을 제거합니다. 조직 선택은 실험 전반에 걸쳐 일관성이 있어야 하며 단일 과일 내의 가변성을 고려해야 합니다. 예를 들어, 샘플은 적도 꽃과 줄기 끝 부분에서 동일하게 얻어야 합니다.

선택한 과일 조직을 결합하고 무작위로 추출하기 위해 혼합한 다음 200g의 무게를 상업용 블렌더에 넣습니다. 포화 염화칼슘 용액 200ml를 추가합니다. 염화칼슘은 과일 과육을 절단하고 균질화한 후에 발생할 수 있는 효소 활성의 억제제로 작용하기 위한 것입니다.

그런 다음 메탄올에 먹은 두 개의 메틸 부틸 이소의 100 밀리 몰 용액 50 마이크로 리터를 첨가하십시오. 이 솔루션은 균질화 공정 중 휘발성 화합물의 가능한 손실을 모니터링하기 위해 내부 표준으로 추가됩니다. 다음으로, 18, 000 RPM에서 30 초 동안 실험실 믹서에서 혼합물을 균질화합니다.

그런 다음 즉시 유리병에 붓고 테프론 뚜껑으로 밀봉하십시오. 모든 샘플이 준비될 때까지 균질산염을 병에 보관하십시오. 거품이 없는 5ml의 주스 분취액을 20ml 유리 호박색 바이알에 피펫으로 주입하여 샘플당 최소 3개의 바이알을 준비합니다.

기술적 복제물로 사용됩니다. 테프론 실리콘 격막이 장착된 강철 나사 캡으로 바이알을 밀봉합니다. 이 시점에서 샘플을 즉시 분석하거나 액체 질소에서 급속 냉동하고 나중에 분석할 수 있도록 초저온에 보관할 수 있습니다.

적절한 분석 방법을 Xenos에 로드합니다. 서면 프로토콜에 있는 대로 매개변수를 입력합니다. 코어링 팁이 없는 스테인리스 스틸 바늘을 이종 입구에 연결합니다.

베이스라인이 안정되고 200 카운트보다 큰 피크가 감지되지 않을 때까지 주변 공기로 시스템을 여러 번 퍼지합니다. 압력을 완화하기 위해 직선 사슬 아카스 용액이 들어 있는 바이알의 격막에 바늘을 삽입하여 기기를 조정할 준비를 합니다. 그런 다음 기구 주입구에 연결된 바늘을 격막에 삽입합니다.

헤드스페이스 샘플링을 시작하여 곡을 연주합니다. 튜닝 결과는 기기 소프트웨어에서 언급 된 피크의 머무름 시간을 시간 단위에서 코바스 지수 또는 KI 단위로 변환하는 데 사용됩니다. 결과적으로 시스템이 조정된 후 머무름 시간은 KI 단위로 보고됩니다.

30분 동안 샘플을 평형을 이룬 후 샘플 바이알의 격막에 바늘을 삽입하여 샘플 분석을 시작합니다. 스트레이트 체인 아카스의 솔루션에 대해 수행된 것처럼. 재생 버튼을 클릭하여 헤드스페이스 샘플링을 수동으로 시작하면 펌프가 샘플 위에 존재하는 증기를 활성화하고 회수합니다.

분석이 끝나면 화면에 크로마토그램이 나타나고 센서를 섭씨 150도까지 10초 동안 자동으로 가열하여 세척합니다. 시스템 상태 상자가 녹색으로 바뀌면 기기가 다른 샘플을 분석할 준비가 된 것입니다. 안정적인 기준선과 적절한 시스템 세척을 보장하려면 각 샘플 사이에 하나 이상의 에어 블랭크를 실행하십시오.

시료당 최소 3개의 기술 반복 실험과 바이알 블랭크를 분석합니다. Mense 소프트웨어의 로그 저장 데이터 기능을 사용하여 수집 후 데이터를 Microsoft Excel 파일로 내보냅니다. 데이터를 내보내면 변수 및 반복실험에 대한 레이블이 포함된 열을 추가합니다.

기기 소프트웨어에서 내보낸 데이터 형식은 이 실험실에서 생성된 Python 0.6 스크립트를 사용하여 더 쉽게 조작할 수 있도록 변환할 수 있습니다. 소스 파일의 이름과 입력 데이터의 시트 이름, 출력에 대한 원하는 파일 이름은 스크립트에서 직접 편집됩니다. 이 스크립트는 모든 샘플에서 고유한 kis 식별을 통해 데이터 조작 및 분석을 용이하게 합니다.

데이터는 행의 샘플 정보와 열의 고유한 KIS로 재정렬되며, 각 셀은 해당 피크 면적을 나타냅니다. 샘플의 KI 값에 대해 피크가 검출되지 않으면 해당 셀은 비어 있습니다. 다음으로, 이 실습에서 생성된 두 번째 스크립트를 사용하여 이전 단계에서 편집한 파일의 데이터를 가져옵니다.

분석은 각 KI 값이 감지된 횟수를 보고 분석하는 것을 기반으로 합니다. 따라서 프로그램은 KI 적중의 막대 그래프를 표시합니다. 각 KI 값에 대해 샘플의 특정 하위 집합에 대한 K 히트를 평가하고 각 기술 반복 실험 그룹을 함께 분석합니다.

이렇게 하려면 해당 상자를 선택하거나 선택 취소하여 모든 처리 또는 변수를 개별적으로 분석합니다. 그래픽 인터페이스를 사용하여 각 KI 창의 너비를 식별한 후 해당 크로마토그램 중 일부를 무작위로 선택합니다. mense 소프트웨어에서는 기술 반복 제품 간에 중복되는 피크를 평가합니다.

KI 창이 개별화되면 그래픽 인터페이스의 병합 기능을 사용하여 창에 있는 KIS를 가장 많이 채워진 ki First로 병합합니다. 병합 버튼을 클릭하여 기능을 활성화하고 해당 막대를 마우스 왼쪽 버튼으로 클릭하여 창 중앙에서 가장 인구가 많은 ki를 선택합니다. 막대가 선택되면 색상이 변경되고 녹색으로 바뀌어 창 내에 있는 KIS를 해당 막대에서 선택한 마우스 오른쪽 버튼을 클릭하여 병합합니다.

이렇게 하면 막대가 빨간색으로 바뀌고 해당 길이의 파란색 막대가 중앙 기 위에 추가됩니다. 선택한 모든 ki가 적절한 중앙 ki에 병합되면 병합 버튼을 다시 클릭하여 변경 사항을 수락합니다. 이로 인해 실수가 발생할 경우 병합 버튼이 노란색으로 바뀝니다.

병합 해제 버튼을 사용하여 병합을 해제할 수도 있습니다. 그래픽 인터페이스에서 unmerge 버튼을 클릭합니다. 그런 다음 빨간색 막대를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하여 병합을 해제합니다.

빨간색에서 막대가 파란색으로 바뀝니다. un merge 버튼을 다시 클릭하여 변경 사항을 수락합니다. 단일 샘플의 두 피크를 단일 KI 값으로 잘못 병합하려고 하면 오류 메시지가 인쇄됩니다.

통계 분석을 진행하기 전에 모든 병합 작업이 완료되고 파일이 저장되면 공기 및 바이알 블랭크의 크로마토그램을 분석하여 가능한 오염을 모니터링합니다. peaks와 blanks의 ki가 식별되면 존재하는 피크 영역에서 공기 및/또는 바이알 블랭크에서 검출된 피크 영역을 뺍니다. 샘플에서 전자 코는 서로 다른 성숙 단계에서 수확된 멜론 과일의 휘발성 프로필의 차이를 감지할 수 있었습니다.

여기에 표시된 것은 일찍 성숙한 과일과 완전히 익은 과일의 크로마토그램의 예로, 피크 면적의 차이를 보여줍니다. 수많은 피크의 경우 모든 샘플에서 20K 윈도우가 식별되었습니다. 변이체를 분석한 결과, 이러한 서로 다른 kis 중 전자 코에 의해 감지된 14개의 피크의 풍부함이 두 성숙 단계 간에 크게 다르다는 것이 밝혀졌습니다. 여기에서 이러한 각 kis에 대한 초기 성숙 과일의 최대 풍부도는 녹색으로 표시되고 완전히 익은 과일의 풍부도는 주황색으로 표시됩니다.

이 절차를 완료한 후, 질량 분석법과 결합된 가스 크로마토그래피와 같은 다른 방법을 수행하여 개발 후 전자 노즈의 개별 피크에 해당하는 구성 요소를 식별할 수 있습니다. 이 기술은 신속한 분석 도구를 제공하고 식물 병리학, 식물 생리학, 수확 후 생물학 및 식품 과학 분야의 연구원들이 성숙도, 품종 또는 저장의 기능으로서 과일의 휘발성 조성 변화를 탐구할 수 있도록 합니다. 이 비디오를 시청한 후에는 전자 노즈로 휘발성 화합물을 얼마나 빠르게 분석하고 그래픽 인터페이스를 사용하여 피크 정렬을 수행하는지 잘 이해하게 될 것입니다.