Name: 신근 Digitorum의 Longus 근육의 근육 기능의 평가 예 생체와 Tibialis 앞쪽에 근육 현장에서 마우스에 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-02-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 36 s
Description: 학습하세요 마우스 사지 근육의 수축 및 수동적 특성을 평가하는 생체외 및 생체내 기법을 통해 근육 질환의 생리학적 변화를 이해하고 실험적 개입의 효과를 평가하는 방법을.

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이 작품은 건강 (AR-49419, DD), 근육질 영양 장애 협회 (DD), 그리고 NIH 훈련 보조금 T90DK70105 (CH)의 국립 연구소에서 보조금에 의해 지원되었다.

1. 편집 판단리스트 근육 예를 생체의 수축성과 수동 등록 정보의 평가 편집 판단리스트 근육의 수축성 및 수동 속성은 체외 근육 테스트 시스템에 오로라 과학을 사용하여 예 생체을 측정하고 있습니다. 자료 및 장비 표 1을 참조하십시오. 1.1 장비 준비 <ol><li> 물 재킷 조직 목욕탕에 oxytube을 확보하여 조직 - 장기 욕조를 조립. 근육 장착 장치에 조립 목욕탕을 연결합니다. oxytube에 가스 라인을 연결합니다. 물 재킷 조직 목욕탕에 물 순환 라인을 고정하고 목욕 배수에 바늘 밸브를 배치합니다. </li><li> 순환 물 목욕의 전원을 켜고 30 ° C 7 온도를 조정합니다. 95 %의 5 PSI (평방 인치당 파운드) O 2 -5 %의 CO 2 oxytube을 통해 흐를 수 있도록 허용합니다. 벨소리의 버퍼와 목욕을 입력합니다. 최소한의 버퍼를 평형oxytube 밸브를 조정하여 지속적으로 가스의 흐름과 10 분. </li><li> (stimulator, 듀얼 모드 레버 시스템 및 신호 인터페이스) 악기를 켭니다. 제조업체의 지시에 따라 동적 근육 제어 (DMC) 소프트웨어를로드합니다. </li></ol> 1.2 편집 판단리스트 근육 해부 모든 동물 연구 기관 동물 케어 및 사용위원회의 승인을 받아야합니다. <ol><li> 2.5 μl / 마취 칵테일 (자료 섹션을 참조)의 g 몸무게의 intraperitoneal 주사로 마우스를 마취. 수술 동안, 진정 작용의 깊이는 발가락 핀치를 수행하여 확인되었다. 마취에서 동물을 유지하기 위해 필요한 경우 초기 마취 선량의 10 %의 추가 요금이 부과가 administrated입니다. 뒷다리 다리를 면도. 가열 패드에 마우스를 배치하여 분해 절차 ° C 전에 37 번 몸 코어 온도를 유지하고 있습니다. 몸의 온도는 지속적으로 직장 temperat를 측정하여 감시하고 있습니다열 프로브를 사용하여 우레. </li><li> 해부 보드 (그림 1)에서 마우스 부정사를 배치합니다. 다리 피부 보지 뒷다리의 근육을 노출합니다. 이 양장점 핀, gracilis 근육의 발에 하나 다른을 사용하여 sylgard 블록에 다리를 고정합니다. 37 핵심 체온을 유지하기 위해 마우스 본체 위에 열 램프를 배치 ° C. 지속적으로 벨소리의 버퍼와 모든 노출 된 근육을 superfuse. 진공 라인을 통해 과도한 버퍼를 배수한다. </li><li> 말초 TA의 힘줄과 발을 향해 피부를 박리하여 stereomicroscope 아래의 신근 인대를 쉽게받을 수 있습니다. 부드럽게 TA 근육을 덮고있는 근막을 제거합니다. 말초 TA의 힘줄을 공개 할 수있는 신근 인대를 잘라. </li><li> 말초 TA의 힘줄을 잘라과 TA 근육 해제 껍질로 사용합니다. 조심스럽게 그 근위 첨부 파일에있는 TA 근육을 제거합니다. TA의 근육 vasculature의 파열로 인한 출혈이 흡수 할 수있는 편집 판단리스트 근육 옆에 벨소리의 버퍼 불린면의 얇은 조각을 놓으십시오. 초과 버퍼와 피를 제거하는 진공 라인을 사용합니다. </li><li> 말초 편집 판단리스트 근육의 근육 힘줄의 접합 (MTJ) (그림 2)에서 빵 실크 봉합사를 사용하여 루프 매듭에 이어 두 사각형 매듭 묶는. 근위 편집 판단리스트 근육을 노출 할 수있는 팔뚝 femoris 근육의 말초 부분에 절개를합니다. 근위 편집 판단리스트 힘줄의 MTJ에 노트의 동일한 세트 (그림 2)를 반복합니다. 같은 봉합 라인을 사용하여 두 사각형 매듭과 근위 나 원위 노트 하나에 레버 팔 후크를 연결합니다. 나머지 봉합 라인을 잘라. </li><li> 근위 봉합 매듭에 뛰어난 근위 편집 판단리스트 힘줄을 잘라. 후크와 편집 판단리스트 근육를 들어서 근육 아래에있는 vasculature을 잘라. 뒷다리에서 편집 판단리스트 근육을 제거하는 말초 봉합 매듭에 열등 말초 편집 판단리스트 힘줄을 잘라. 벨소리의 버퍼 불린면의 한 부분으로 노출 뒷다리을 다룹니다. </li><li> 레버 암에 후크를 연결합니다. 수직으로 근육을 정렬2 개의 전극 사이에 있습니다. 고정 포스트에 말초 봉합 라인을 고정합니다. 잠수함 벨소리의 버퍼에있는 근육에 조직 목욕을 올려요. 이중 고급 / 굵은 번역 단계를 사용하여 1.0 g에 휴식 긴장을 조절하고 근육은 적어도 10 분 동안 평형을 할 수 있습니다. </li></ol> 1.3 편집 판단리스트 근육의 수축성 및 수동 속성을 측정 다음 측정의 각각에 대한 DMC 소프트웨어의 매개 변수를 설정 표 2를 사용하십시오. 동적 근육 분석 (DMA) 소프트웨어를 사용하여 데이터를 분석 할 수 있습니다. 1.3.1은 편집 판단리스트 근육의 수축 특성을 측정 <ol><li> 근육 8 안정화 떨어져 60 초와 150 Hz에서 편집 판단리스트 근육을 세 번을 자극한다. </li><li> 최적의 길이 (소호)를 결정하기 위해 다른 휴식 긴장에서 편집 판단리스트 근육을 자극한다. 최적의 길이는 근육이 최대 트 장력을 개발되는 길이입니다. 로 근육을 허용2 분에 휴식을 취하실 수 있습니다. </li><li> Lo라고 할 수있는 휴식 긴장을 조정합니다. 단일 트의 자극에 근육 힘을 측정합니다. 절대 트 포스 (PT), 최대 인장 (TPT)와 PT의 반 휴식 시간 (½ RT)에 시간을 확인합니다. 근육은 2 분 동안 휴식을 취 할 수 있습니다. </li><li> Lo라고 할 수있는 휴식 긴장을 조정합니다. 다른 자극 주파수 (50, 80, 100, 120, 150 및 200 Hz에서)에서 생성 파상풍의 근육 힘을 측정합니다. 근육 힘이 최대에 도달 절대 최대 파상풍의 근육 힘 (PO)를 확인합니다. TPT와 ½ 포 9 RT를 측정합니다. </li><li> 근육이 5 분을 위해 휴식을 취 할 수 있습니다. Lo라고 할 수있는 휴식 긴장을 조정합니다. 사이클 사이의 2 분 나머지 편심 수축의 10 사이클을 적용합니다. 편심 수축의 각 사이클 후 포의 상대적인 힘의 손실을 계산합니다. </li><li> 장치에서 편집 판단리스트 근육을 분리하고 봉합 사이트에서 힘줄을 잘라. 근육 서부 유럽 표준시 무게를 결정하고 근육 단면적 (CSA)를 계산6,10. </li></ol> 1.3.2은 편집 판단리스트 근육의 수동적 인 속성을 측정 <ol><li> contralateral 편집 판단리스트 근육을 해부하고 1.2 항에 설명 된대로 장치에 첨부​​ 2 ~ 7 단계를 반복합니다. </li><li> 근육은 10 % 로페즈의 증가 160 %의 소호에 긴장하는 여섯 단계 스트레칭 프로토콜에 따라 편집 판단리스트 근육합니다. 응력 - 변형의 프로필 6 분석합니다. </li><li> 10% 소호에서 스트레칭과 근육을 들고 한 후 다음 시간 프레임에서 응력 완화 속도 (SRR)를 측정하여 편집 판단리스트 근육의 점성 재산을 평가 : 정상에서 0.1s 후 피크 (PP)에, 0.1에서 0.2s로 0.2 0.5s PP에서 0.5에서 1 초 PP와 1 1.5s pp.에 PP, </li><li> 마우스가 마취에서있는 동안 연구의 끝에서 자궁 경부 전위 및 / 또는 목 베기 마우스를 안락사시켜야. 장치에서 편집 판단리스트 근육을 분리하고 봉합 사이트에서 힘줄을 잘라. 근육 서부 유럽 표준시 무게를 결정하고 근육 간 SE를 계산ctional 지역 (CSA) 6, 10. </li></ol> 2. 현장에서는 TA 근육의 수축성 등록 정보의 평가 TA 근육의 수축 특성 시츄 근육 테스트 시스템에 오로라 과학을 사용하여 측정하고 있습니다. 자료 및 장비 표 1을 참조하십시오. 2.1 장비 준비 <ol><li> 37 열 제어 동물 단계를 가열 ° C 순환 물 목욕을 사용합니다. </li><li> (stimulator, 듀얼 모드 레버 시스템 및 신호 인터페이스) 악기를 켭니다. 제조업체의 지시에 따라 DMC 소프트웨어를로드합니다. </li></ol> 현장 힘 측정에 대한 TA 근육의 2.2 준비 <ol><li> 마우스를 마취, 뒷다리 다리를 면도하고 1.2 항에서 3 단계에서 설명 된대로 TA 근육을 쉽게받을 수 있습니다. </li><li> 슬개골 인대 usi 주위에 두 사각형 매듭을 묶게NG 빵 실크 봉합사. 말초 TA 근육의 MTJ (그림 2)에서 루프 매듭에 이어 두 사각형 매듭을 묶게되는 순간, 같은 봉합 라인을 사용하여 말초 TA의 힘줄의 중심에서 ~ 10mm 루프를두고 또 다른 이중 사각형 매듭을 묶게. 루프의 측면에 두 번째 더블 광장 매듭를 놓습니다. </li><li> 뒷다리에서 핀을 제거하고 동물이 발생하기 쉬운 위치. 팔뚝 femoris 근육을 쉽게받을 수 있습니다. 좌골 신경을 표시하는 방법으로 중간 선에 절개를합니다. 좌골 신경의 근위 끝 주위에 두 사각형 매듭을 묶게. 봉합 라인의 한쪽 트림과 매듭에 뛰어난 신경을 잘라. 부드럽게, 봉합 라인을 사용하여 무릎쪽으로 좌골 신경을 뽑아 무료로 주변 결합 조직 ~의 길이의 5mm 선택을 취소합니다. 이 절차를 수행하는 동안 신경을 확장하고 지속적으로 벨소리 버퍼로 신경을 superfuse하지 마십시오. </li><li> 등의 3 단계 1에서 설명하는 contralateral TA 근육을 준비합니다. 리의 한 부분으로 노출 된 뒷다리 중 하나를 커버nger의 버퍼면을 흡수 했죠. 지속적으로 사전 예열 (37 ° C) 벨소리의 버퍼와 함께 두 다리를 모두 superfuse. 진공 라인을 통해 과도한 버퍼를 제거합니다. </li><li> 동물 플랫폼에서 발생하기 쉬운 동물을 배치합니다. 동물 플랫폼에 무릎 클램프 홀더를 첨부하여 슬개골 인대 봉합 라인을 사용하여 두 사각형 매듭과 금속 핀에 두 무릎을 확보. 양장점 핀을 사용하여 sylgard 블록에 모두 발을 핀. 열 제어 단계에 동물 플랫폼을 고정합니다. 37 ° C.에있는 동물 코어 체온을 유지하기 위해 열 램프를 배치 </li><li> 동물 플랫폼에 전극 홀더를 고정하고 봉합 라인을 사용하여 전극의 좌골 신경을 마련. 거리에 뒷다리 근육의 전극세요. MTJ의 봉합 사이트에서 발견 뒷다리의 말초 TA의 힘줄을 잘라. 레버 팔 후크에 말초 TA의 힘줄의 봉합 루프를 연결합니다. 따뜻한 벨소리의 버퍼 불린면에 노출 된 뒷다리의 근육을 다룹니다. </li></ol><ol><li> DMC 소프트웨어의 매개 변수를 설정하기 위해 표 2를 사용하십시오. TA 근육의 수축성 속성을 결정하는 섹션 1.3.1에 ​​설명 된 동일한 프로토콜을 따르십시오. DMA 소프트웨어를 사용하여 데이터를 분석 할 수 있습니다. </li><li> 수축성 재산 측정 후, 레벨러 암 후크에서 말초 TA의 힘줄의 봉합 루프를 분리합니다. TA 근육을 제거합니다. 근육 서부 유럽 표준시 무게를 결정하고 CSA 10 계산합니다. </li><li> 1-3 위에서 설명한 단계에 따라 contralateral TA 근육의 수축 특성을 측정합니다. 연구의 끝에서 제도적 지침에 따라 마우스를 안락사시켜야. </li></ol>

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<li>Pastoret, C., Sebille, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((mdx+mice+show+progressive+weakness+and+muscle+deterioration+with+age%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurol.+Sci%22%5BJournal%5D)">mdx mice show progressive weakness and muscle deterioration with age.</a> J. Neurol. Sci. 129, 97-105 (1995).</li>
<li>Hakim, C. H., Grange, R. W., Duan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+passive+mechanical+properties+of+the+extensor+digitorum+longus+muscle+are+compromised+in+2-+to+20-mo-old+mdx+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">The passive mechanical properties of the extensor digitorum longus muscle are compromised in 2- to 20-mo-old mdx mice.</a> J. Appl. Physiol. 110, 1656-1663 (2011).</li>
<li>Segal, S. S., Faulkner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature-dependent+physiological+stability+of+rat+skeletal+muscle+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Temperature-dependent physiological stability of rat skeletal muscle in vitro.</a> Am. J. Physiol. 248, 265-270 (1985).</li>
<li>Grange, R. W., Gainer, T. G., Marschner, K. M., Talmadge, R. J., Stull, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fast-twitch+skeletal+muscles+of+dystrophic+mouse+pups+are+resistant+to+injury+from+acute+mechanical+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Fast-twitch skeletal muscles of dystrophic mouse pups are resistant to injury from acute mechanical stress.</a> Am. J. Physiol. Cell Physiol. 283, 1090-1101 (2002).</li>
<li>Hakim, C. H., Duan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gender+differences+in+contractile+and+passive+properties+of+mdx+extensor+digitorum+longus+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Gender differences in contractile and passive properties of mdx extensor digitorum longus muscle.</a> Muscle Nerve. 45, 250-256 (2012).</li>
<li>Hakim, C. H., Li, D., Duan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+murine+skeletal+muscle+function+for+muscle+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Monitoring murine skeletal muscle function for muscle gene therapy.</a> Methods Mol. Biol. 709, 75-89 (2011).</li>
</ol>

관심 없음 충돌이 선언 없습니다.

이 프로토콜에서는, 우리는 수축성 및 수동 등록에게 편집 판단리스트 근육과 TA 근육의 수축 특성을 측정하기위한 생리 assays을 설명했습니다. 근육 생리학 연구의 주요 관심사는 대상 근육의 산소입니다. 벨소리의 버퍼에서 산소 확산이 시험 관내 분석에서의 근육의 중심에 도달 할 수 있기 때문에 큰 근육 (예 : TA 근육 등)의 경우, 현장 접근을 사용하는 것이 좋습니다. 현장 접근에 정상적인 혈액 공급 및 hypoxia - 관련을 방해하지 않도록 인공 효과는 피할 수 있습니다. 편집 판단리스트 근육 생리학 연구에서 가장 일반적으로 사용되는 근육 중 하나입니다. 전체 근육의 적절한 산소로 인해 근육의 작은 크기 체외 시스템에 달성 할 수 있습니다. 또한, 체외 시스템에서이 동봉 된 이온의 농도 (CA 2 +, NA +와 K +)을 조작하는 환경과 chemi을 제공합니다최적의 근육 힘 생성에 필요한 CAL을 (ATP과 포도당). 이 힘 생산에서 이러한 변수의 영향을 연구 할 수있는 좋은 기회를 제공합니다. 사지 근육의 수축성 및 수동 속성의 정확한 측정은 골격근 기능을 연구하는 것이 중요합니다. 이러한 속성 중 특성 변화는 종종 다양한 근육 질병의 특징으로 간주됩니다. 이러한 매개 변수의 변화는 실험 치료가 효과적인지 여부를 결정하는 중요한 지표입니다.

<table border="1"><tbody><tr><td> 자료 </td><td> 제조업 자 </td><td></td><td> 사양 및 의견 </td></tr><tr><td> 조직 - 장기 목욕 </td><td> Radnoti LLC, CA, USA </td><td></td><td> 물 재킷 조직 목욕탕 (고양이 # 158351-LL), 산소 disperser 관 (고양이 # 160192), Luer 밸브 (고양이 # 120722) </td></tr><tr><td> 물 목욕을 순환 </td><td> 피셔 과학, Waltham, MA, USA </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 가스 혼합 </td><td> Airgas 국가, 샬롯, NC, USA </td><td></td><td> 95% O 2 5 % CO 2 </td></tr><tr><td> 체외 근육 기능 분석 장치에 </td><td> 오로라 과학, 오로라, ON, 캐나다 </td><td></td><td> 이 시스템은 stimulator (모델 # 701A), 듀얼 모드 레버 시스템 (모델 # 300C 또는 305C), 신호 인터페이스 (모델 # 604B) 및 시험 AP의 구성paratus (모델 # 800A)은 수직 조직 장기 목욕을 마운트 할 수 </td></tr><tr><td> 체외 근육 기능 분석 소프트웨어 </td><td></td><td></td><td> 동적 근육 제어 (DMC) 소프트웨어 및 동적 힘이 데이터 분석 (DMA)는 소프트웨어 </td></tr><tr><td> 0.9 % NaCl에 혼합 마우스 마취 칵테일 </td><td> 기관 가이드 라인을 참조 </td><td></td><td> 케타민 (25 MG / ML), xylazine (2.5 MG / ML)와 acepromazine (0.5 MG / ML). 수술 동안, 초기 용량의 10 %의 추가 요금이 부과가 마취에서 동물을 유지하는 데 필요한 될 수 있습니다. </td></tr><tr><td> Sylgard </td><td> 세계 정밀 악기 </td><td> 고양이 # SYLG184 </td><td></td></tr><tr><td> 맞춤 제작 Plexiglas의 분해 보드 </td><td> 디자인 하우스에서 </td><td></td><td> 1 그림 참조 </td></tr><tr><td> 가열 램프 </td><td> 텐서 조명 회사,보스턴, MA, USA </td><td></td><td> 해부하는 동안 마우스 따뜻하게 유지하는 15 와트 램프 </td></tr><tr><td> 벨소리의 버퍼 </td><td> 화학 물질은 피셔 과학, Waltham, MA, USA에서 구입 </td><td></td><td> MM의 구성 : 1.2 아뇨 2 PO 4 (고양이 # S369), 1 MgSO 4 (고양이 # M63), 4.83 KCl (CAT # P217), 137 NaCl (CAT # 217), 24 NaHCO 3 (고양이 # S233), 2 CaCl 2 (고양이 # C79)와 10 포도당 (CAT # D16). 개별적으로 화학 물질을 분해하고 위에서 열거 한 순서로 섞는다. 4 ° C.에 저장 </td></tr><tr><td> 스테레오 해부 현미경 </td><td> 니콘, 멜빌, NY, USA </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 해부 도구 </td><td> 정밀 과학 도구, 포스터 시티, CA, USA </td><td></td><td> 거친 포셉, 굵은 가위, 고급 집게 (직선 및 45 ° 각도) </td></tr><tr><td> # 4-0 합 사형의 실크 봉합 </td><td> SofSilk USSC 쓰tures, 노르 워크, CT, USA </td><td> 고양이 # SP116 </td><td></td></tr><tr><td> 맞춤 제작 스테인리스 스틸 훅 </td><td> 작은 부품 주식회사 </td><td></td><td> 이 &#39;힘 변환기 305C 또는 2.5 오래 S / S 304V (0.18 &#39;&#39; 직경)&#39;변환기 300C 오래 S / S 304V (0.012 &#39;&#39; 직경) (고양이 # ASTM A313) </td></tr><tr><td> 현장 근육 기능 분석 시스템 </td><td> 오로라 과학, 오로라, ON, 캐나다 </td><td></td><td> 시스템 (809B, 현장 마우스 장치에서)는 stimulator (모델 # 701B), 듀얼 모드 레버 시스템 (모델 # 305C), 신호 인터페이스 (모델 # 604A) 및 온도 제어 footplate 장치 (모델 # 809A로 구성 ) </td></tr><tr><td> 체외 근육 기능 분석 소프트웨어 </td><td> 오로라 과학, 오로라, ON, 캐나다 </td><td></td><td> 동적 근육 제어 (DMC) 소프트웨어 및 동적 힘이 데이터 분석 (DMA)는 소프트웨어 </td></tr><tr><td> 맞춤 제작 TA 분석 동물 플랫폼 </td><td> 디자인 하우스에서 </td><td></td><td> 2 그림 참조 </td></tr><tr><td> 맞춤 제작 스테인리스 스틸 훅 </td><td> 작은 부품 주식회사 </td><td> 고양이 # ASTM A313 </td><td> 0.5 &#39;긴 S / S 304V (0.18 &#39;&#39; 직경) </td></tr><tr><td> 맞춤 제작 25g까지 백금 전극 </td><td> Chalgren 기업, 길로이, CA </td><td></td><td> 이 24G 전기 전선에 납땜이 0.016 &#39;두꺼운 백금 와이어 </td></tr></tbody></table> 표 1. 재료 및 장비.

신근 digitorum의 longus 근육의 근육 기능의 평가<em&gt; 예 생체</em&gt;와 tibialis 앞쪽에 근육<em&gt; 현장에서</em&gt; 마우스에

Evaluation of Muscle Function of the Extensor Digitorum Longus Muscle Ex vivo and Tibialis Anterior Muscle In situ in Mice

몸의 움직임은 주로 골격근의 기계적 기능에 의해 제공됩니다. 골격근은 근육 결합 조직에 의해 끼 우고 아르 myofibers 수많은 번들로 구성되어 있습니다. 각 myofiber는 myofiber의 길이를 따라 길이 방향으로 실행 많은 myofibrils이 포함되어 있습니다. Myofibrils 근육의 수축성 장치이며, 그들은 sarcomeres으로 알려진 반복적으로 수축 단위로 구성되어 있습니다. sarcomere 단위는 Z 디스크와 titin 단백질에 의해 이격된다 고를와 마이 오신 필라멘트가 포함되어 있습니다. 골격근의 기계적 기능은 근육의 수축 및 수동 특성에 의해 정의됩니다. 수축성 속성은 근육 수축, 근육 휴식의 힘 생성 및 시간의 기간 동안 생성 된 힘의 양을 특징하는 데 사용됩니다. 근육 수축 (예 고를와 마이 오신 필라멘트의, 칼슘의 항상성, ATP / ADP 비율 등 간의 상호 작용 등)에 영향을 미치는 요인은 수축성 prope에 영향을 미칩니다rties. 수동적 인 속성이 수축의 부재에있는 근육의 탄성과 점성 특성 (강성 및 점도)을 참조하십시오. 이 속성이 1-2 (주로 콜라겐) 세포와 세포 구조 구성 요소 (예 : titin 등)와 결합 조직에 의해 결정됩니다. 수축성 및 수동 속성은 근육 기능의 두 분리 측면입니다. 예를 들어, 팔꿈치 굴곡은 팔 위쪽의 뒤쪽 칸의 상부 팔과 근육의 수동적 스트레칭의 앞 칸에 근육의 수축에 의해 달성된다. 진정한 근육 기능을 이해하려면 두 수축성 및 수동 속성은 공부를해야합니다. 근육의 수축 및 / 또는 수동적 인 기계적 성질은 종종 근육 질환에 손상됩니다. 좋은 예 Duchenne 근육질 영양 장애 (DMD), dystrophin 결핍증 세에 의해 발생 질병을 낭비 심한 근육입니다. Dystrophin은 cytoskeletal prote입니다그런 근육 수축 (4) 동안 근육 세포막 (sarcolemma)가 안정화. dystrophin의 부재에서 sarcolemma는 힘 전송 중에 발생하는 전단 힘에 의해 손상되었습니다. 찢어이 막 근육 세포의 죽음과 수축성 기계의 손실로 연결 연쇄 반응을 시작합니다. 결과적으로, 근육의 힘이 감소되어 죽은 myofibers는 fibrotic 조직 (5)에 의해 대체됩니다. 이 후 변경 사항은 근육 강성 6 증가시킵니다. 이러한 변화의 정확한 측정은 질병의 진행을 평가하고 새로운 유전자 / 세포 / 약리 개입의 치료 효능을 결정하는 것이 중요 가이드를 제공합니다. 여기, 우리는 신근 digitorum longus의 (편집 판단리스트) 근육과 tibialis 앞쪽 (TA) 근육의 수축 특성의 두 수축성 및 수동 기계적 특성을 평가하는 두 가지 방법을 제시한다.

다음 결과는 이전 보고서 6,9에서 표현됩니다. 데이터가 평균의 평균 ± 표준 오차로 표시됩니다. 표 3은 정상 BL10, 연령 4 ~ 6 개월 dystrophin - 결함 (MDX) 마우스의 편집 판단리스트 근육의 morphometric 속성을 보여줍니다. 그림 4는 대표 수축성 및 수동 속성을 보여줍니다 BL10과 MDX 마우스에서 편집 판단리스트 근육. 편집 판단리스트 근육의 수축성 속성은 특정 (절대 CSA로 나누어 힘) 트 포스 (그림 4A), 특정 최대 파상풍의 힘 (그림 4B), TPT와 ½ 절대 최대 파상풍의 힘 RT를 포함하여 다음과 같은 조건이 설명되어 있습니다 (그림 4C와 D). TPT과 ½ RT도 절대 트 포스에서 계산 할 수 있습니다. 응력 - 변형 프로파일 (그림 4E)과 SRR (그림 4 층)편집 판단리스트 근육의 수동적 인 속성을 설명하는 데 사용되는 재. dystrophin의 부재는 편집 판단리스트 근육 6,9의 수축성 및 수동 특성에 큰 영향을 미치고 있습니다. 특정 트와 파상풍의 힘이 크게 MDX 편집 판단리스트 근육에 감소된다. ½ RT는 MDX 편집 판단리스트 근육에 상당히 느린 반면 TPT는 상당히 빨라집니다. 응력 - 변형 프로파일은 강성이 크게 MDX 편집 판단리스트 근육에 증가 제안합니다. 포스트 피크 응력이 더 빠르게 감소하면서 MDX 편집 판단리스트 근육도 정상 응력에 도달하기 전에 훨씬 훨씬 더 높은 저항 힘 (수동 스트레스)를 산출. 또한, SRR은 BL10 편집 판단리스트 근육의 비교 MDX 편집 판단리스트 근육에 상당히 높은했습니다. 통계 분석 두 그룹 사이에 통계적 유의미성은 학생 t-테스트에 의해 분석된다. s에 대한여러 그룹 간의 tatistical 중요성, 편도 또는 Bonferroni 게시물 임시 분석에 이어 양방향 ANOVA 분석은 SAS 소프트웨어 (SAS 연구소 주식회사 캐리, NC)를 사용하여 권장합니다. 차이는 때 P는 &lt;0.05 중요한 간주됩니다. 표 1. 재료 및 장비. <table border="1"><tbody><tr><td class="jove_content_small"> 실험 </td><td class="jove_content_small"> 휴식 긴장 (g) </td><td class="jove_content_small"> 펄스 주파수 (Hz) </td><td class="jove_content_small"> 펄스 폭 (밀리 초) </td><td class="jove_content_small"> 자극 기간 (밀리 초) </td><td class="jove_content_small"> 스트레치 길이 </td><td class="jove_content_small"> 스트레치 기간 (밀리 초) </td><td class="jove_content_small"> 스트레치 속도 </td><td class="jove_content_small"> 코멘트 </td></tr><tr><td colspan="9"> 1. 편집 판단리스트 근육 예를 생체의 수축성 및 수동 특성 평가 </td></tr><tr><td colspan="9"> 1.3.1은 편집 판단리스트 근육의 수축 특성을 측정 </td></tr><tr><td> 1. 데우다 </td><td> 1.0 </td><td> 150 </td><td> 0.2 </td><td> 300 </td><td></td><td></td><td></td><td> 각 자극 사이에 60 초 동안 근육을​​ 휴식. 이 예비 파상풍의 수축이 이후의 측정을 위해 근육을 안정. </td></tr><tr><td> 2. 최적 근육 길이 (소호) </td><td> 0.5, 1.0, 1.5 및 2.0 </td><td> 1 </td><td> 0.2 </td><td> 300 </td><td></td><td></td><td></td><td> 근육은 각 자극 사이에 30 초에 휴식을 할 수 있습니다. 디지털 캘리퍼스를 사용하여 근육 최적의 길이를 측정합니다. </td></tr><tr><td> 3. 싱글 트위어tch 힘 (PT) </td><td> Lo라고하는 휴식 긴장을 조정 </td><td> 1 </td><td> 0.2 </td><td> 300 </td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 4. 파상풍의 근육 힘 </td><td> Lo라고하는 휴식 긴장을 조정 </td><td> 50, 80, 100, 120, 150 및 200 </td><td> 0.2 </td><td> 300 </td><td></td><td></td><td></td><td> 근육이 각각의 자극 사이에 1 분을 위해 휴식을 취 할 수 있습니다. 최대 절대 파상풍의 힘 (PO)를 생성 빈도를 결정합니다. </td></tr><tr><td> 5. 편심 수축 </td><td> Lo라고하는 휴식 긴장을 조정 </td><td> 최대 파상풍의 힘 (PO)를 생성 주파수를 사용 </td><td> 0.2 </td><td> 700 </td><td> 10 % 로페즈 </td><td> 자극 기간의 마지막 200 밀리 초 </td><td> 0.5 소호 / 초 </td><td> 사이클 사이의 2 분 나머지 10 개 사이클에 대한 편심 수축을 반복합니다. </td></tr><tr><td> 6. 편집 판단리스트 근육의 CSA </TD&gt; <td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td> CSA = (근육 질량 (g) / [1.06 g / cm 3 개 (소호 X 0.44)]. 1.06 g / cm 3 근육 밀도이며, 0.44는 비율을 Lo라고 할 수있는 편집 판단리스트 근육 섬유의 길이입니다. </td></tr><tr><td colspan="9"> 1.3.2은 편집 판단리스트 근육의 수동적 인 속성을 측정 </td></tr><tr><td> 1. 여섯 단계는 프로토콜을 스트레칭 </td><td> Lo라고하는 휴식 긴장을 조정 </td><td></td><td></td><td></td><td> 10 % 로페즈 </td><td></td><td> 2cm / 초 </td><td> 160%의 소호에 도달 때까지 Lo라고 10 %의 증가와 스트레칭 프로토콜을 반복합니다. 신축성주기 사이의 Alow 1.5 초. </td></tr><tr><td> 2. SRR </td><td> Lo라고하는 휴식 긴장을 조정 </td><td></td><td></td><td></td><td> 10 % 로페즈 </td><td></td><td> 2cm / 초 </td><td> SSR은 t과 스트레스의 차이를 나누어 계산합니다IME는 한 번 프레임에 두 개의 시간 사이에 경과 된 점. </td></tr><tr><td colspan="9"> 2.3 TA 근육의 수축 특성을 측정 </td></tr><tr><td> 1. 데우다 </td><td> 4.0 </td><td> 150 </td><td> 0.2 </td><td> 300 </td><td></td><td></td><td></td><td> 각 자극 사이에 60 초 동안 근육을​​ 휴식. </td></tr><tr><td> 2. 최적 근육 길이 (소호) </td><td> 3.0, 4.0, 5.0, 6.0 및 7.0 </td><td> 1 </td><td> 0.2 </td><td> 300 </td><td></td><td></td><td></td><td> 근육은 각 자극 사이에 30 초에 휴식을 할 수 있습니다. 디지털 캘리퍼스를 사용하여 근육 최적의 길이를 측정합니다. </td></tr><tr><td> 3. TA 근육의 CSA </td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td> CSA = (근육 질량 (g) / [1.06 g / cm 3 개 (소호 X 0.6)]. 0.6은 소호 RA에 TA 근육 섬유 길이티오. </td></tr></tbody></table> 표 2. 편집 판단리스트와 TA 근육의 기계적 성질의 평가에 대한 매개 변수. <table border="1"><tbody><tr><td> 변형 </td><td> 연령 (월) </td><td> 바디 무게 (g) </td><td> 편집 판단리스트 중량 (MG) </td><td> 편집 판단리스트 소호 (mm) </td><td> 편집 판단리스트 CSA (mm 2) </td></tr><tr><td> BL10 </td><td> 6 </td><td> 32.03 ± 0.57 </td><td> 13.90 ± 0.77 </td><td> 14.09 ± 0.04 </td><td> 2.12 ± 0.12 </td></tr><tr><td> MDX </td><td> 6 </td><td> 35.44 ± 0.42 * </td><td> 16.73 ± 0.42 * </td><td> 13.93 ± 0.05 * </td><td> 2.57 ± 0.07 * </td></tr></tbody></table> 표 3. MD의 편집 판단리스트 근육의 Morphometric 속성. * 값X 마우스는 그런 BL10 쥐를 나이에 일치에서 크게 다릅니다. <img src="/files/ftp_upload/50183/50183fig1.jpg" alt="그림 1" fo:src="/files/ftp_upload/50183/50183fig1highres.jpg" fo:content-width="5.5in"/> 1 그림. 맞춤 제작 마우스 분해 보드의 개략도. 분해 보드가 ½ 인치 두께의 플렉시 글라스로 만든되며, 기관 가게에서 가짜가. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50183/50183fig1large.jpg" target="_blank">큰 그림을 보려면 여기를 클릭하십시오</a> . <img src="/files/ftp_upload/50183/50183fig2.jpg" alt="그림 2" fo:src="/files/ftp_upload/50183/50183fig2highres.jpg" fo:content-width="4in"/> /&gt; 그림 2. MTJ의 루프 매듭에 이어 두 사각형 매듭을 묶는 단계를 보여주는 디지털 이미지의 시리즈. 리스크,편집 판단리스트 근육, 화살표, 편집 판단리스트 근육의 말초 힘줄. <img src="/files/ftp_upload/50183/50183fig3.jpg" alt="그림 3" fo:src="/files/ftp_upload/50183/50183fig3highres.jpg" fo:content-width="6in"/> /&gt; 그림 3. 현장 TA 근육 기능 분석에 대한 맞춤 제작 플랫폼의 개략도. 플렉시 글라스 동물 플랫폼 및 스테인레스 스틸 무릎 홀더는 현장 마우스 장치의 809B에 탑재되도록 설계되었다. * 스테인리스 막대는 (CAT # MPR-2.0 , Siskiyou, 보조금 패스, OR), #, 유니버설 전극 홀더 (고양이 # MXB, Siskiyou, 보조금 패스, OR), §, 전극 부착로드 (고양이 # MPR-3.0, Siskiyou, 보조금 패스, OR) ** Sylgard 블록. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50183/50183fig3large.jpg" target="_blank">큰 그림을 보려면 여기를 클릭하십시오</a> . <p class="jove_content" fo:keep-together.within-paGE = &quot;항상&quot;&gt; <img src="/files/ftp_upload/50183/50183fig4.jpg" alt="그림 4" fo:src="/files/ftp_upload/50183/50183fig4highres.jpg" fo:content-width="4in"/> /&gt; 4 그림. 편집 판단리스트 근육의 수축성 및 수동 속성에 대한 대표 결과입니다. 편집 판단리스트 근육의 수축 특성 특정 트 포스 (A), 특정 파상풍의 힘 (B), 최대 인장 (C)와 반 휴식 시간 (D)에 시간을 특징으로하고 있습니다. 편집 판단리스트 근육의 수동적 인 속성은 스트레스 변형 프로파일 (E) 및 SSR에 의해 평가됩니다. * MDX 마우스는 BL10에서 쥐를 나이와 일치 크게 다릅니다.

사지 근육 수축성 및 수동 기계적 성질의 변화는 근육 질환에 중요한 생체 있습니다. 이 원고는 손쥐 신근의 digitorum longus의와 tibialis 앞쪽에 근육에서 이러한 속성을 측정하는 생리 assays에 대해 설명합니다.

신근 Digitorum의 Longus 근육의 근육 기능의 평가<em&gt; 예 생체</em&gt;와 Tibialis 앞쪽에 근육<em&gt; 현장에서</em&gt; 마우스에

Body  movements are mainly provided by mechanical function of skeletal muscle. Skeletal  muscle is composed of numerous bundles of myofibers that are ...

이 절차의 전반적인 목적은 쥐의 사지 근육의 기계적 특성을 정확하게 결정하는 것입니다. 이것은 신근 digitorum longus muscle ex evo의 수축 및 수동 특성을 측정하거나 경골 전방 근육의 수축 특성을 현장에서 측정하여 궁극적으로 다양한 근육 질환의 생리학적 변화와 실험적 개입이 근육 기능을 향상시키는지 여부를 더 잘 이해할 수 있는 결과를 얻을 수 있습니다. 이 방법은 골격근의 수축 특성과 수동적 특성에 대한 완전한 평가를 제공하며, 이는 신체 움직임에 필요한 골격근의 기계적 기능에서 분리할 수 없는 두 가지 측면입니다.따라서 근육 절제 절차의 시각적 시연은 많은 기술과 조작이 필요하기 때문에 중요합니다. 또한, in vitro SA와 같은 기존 방법에 비해 대근육의 수축 특성에 대한 NC 2 평가의 주요 장점은 연구소 접근 방식이 정상적인 혈류와 산소 공급을 방해하지 않는다는 것입니다. 근육 생리학 연구의 주요 관심사는 대상 근육의 산소 공급입니다.TA 근육과 같은 큰 근육을 위한 in vitro SA에서는 산소 확산이 근육의 중심에 도달하지 못할 수 있다. 골격근의 기계적 기능을 정확하게 측정하면 근육 질환의 진행을 평가하고 새로운 유전자 세포 및 약리학적 중재의 치료 효능을 결정하는 데에도 사용할 수 있기 때문에 이 기술의 의미는 근육 질환 치료로 확장됩니다. 여기에 제시된 모든 동물 절차는 기관 동물 관리 유도 위원회의 승인을 받았습니다.이 수술은 체외(ex vivo) 실험을 위한 근육 테스트 시스템을 구축하기 위한 비생존 수술입니다. 옥시 튜브를 워터 재킷 티슈 수조에 고정하여 티슈 수조를 조립하는 것으로 시작합니다. 조립된 수조를 근육 장착 장치에 부착하고 니들 밸브를 수조 배수구에 놓습니다.가스 라인과 물 순환 라인을 욕조에 연결하십시오. 재킷 챔버에서 섭씨 30도의 물이 순환하고 산소 튜브를 통해 5PSI의 가스가 흐르도록 합니다. 수조에 링거 버퍼를 채우고 일정한 가스 흐름으로 평형을 이룹니다.기구를 켜고 DMC 소프트웨어를 로드하여 EDL 근육 동맥을 해부하고 마취한 후 마우스를 발열 패드에 올려 놓습니다. 뒷다리를 면도하고 발가락 꼬집기를 수행하여 진정 상태를 확인합니다. 해부판에 마우스를 놓고 다리 피부를 벗겨냅니다.두 개의 양장점용 핀을 사용하여 뒷다리를 발과 그라실리스 근육에 고정합니다. 발열 램프를 마우스 위에 놓아 심부 체온을 섭씨 37도로 유지하고 노출된 모든 근육을 실체 현미경으로 따뜻한 링거 버퍼로 지속적으로 슈퍼 융합하고, 피부를 절개하여 원위 TA 힘줄과 신근 인대를 노출시키고, TA 근육을 덮고 있는 근막을 부드럽게 제거합니다. 신전근 인대를 절단하여 원위 TA 힘줄을 풀어줍니다.원위 TA 힘줄을 잘라 링거의 완충기에 적신 솜의 얇은 조각으로 TA 근육을 제거하는 데 사용합니다. TA 근육 혈관 조직의 파열로 인한 출혈을 멈춥니다. 다음으로, 빵 실크 봉합사를 사용하여 이중 사각 매듭을 묶은 다음 EDL 근육의 원위 근육 힘줄 접합부에 고리 매듭을 묶습니다.그런 다음 이두박근 펨 근육을 절개하여 근위 힘줄을 노출시키고 근위 근육 힘줄 접합부에 동일한 매듭 세트를 묶습니다. 동일한 봉합선을 사용하여 이중 사각형 매듭을 만듭니다. 레버 암 후크를 근위 또는 원위 매듭에 고정합니다.뒷다리에서 EDL 근육을 부드럽게 절개합니다. 먼저 봉합사 매듭보다 위쪽에 있는 근위 힘줄을 자르고 근육 아래의 혈관 구조를 자릅니다. 그런 다음 봉합사 매듭보다 아래쪽에 있는 원위 힘줄을 자릅니다.노출된 뒷다리를 링거에 적신 솜 조각으로 덮습니다. 마지막으로 레버 암에 후크를 부착하고 전극 사이의 근육을 수직으로 정렬합니다. 원위 봉합선을 고정 포스트에 고정합니다.근육을 링거 버퍼에 담그고 휴지 장력을 1.0g으로 조정합니다. 최소 10분 동안 근육이 평형을 이룰 때까지 기다립니다. EDL 근육의 수축 특성을 측정하려면 여기에 제시된 대로 DMC 소프트웨어에서 다음 각 프로토콜에 대한 매개변수를 설정합니다.첫 번째 프로토콜의 경우, 150헤르츠에서 EDL 근육을 3회 자극하고 자극 사이에 62번째 휴식을 취하여 EDL 근육을 안정화합니다. 두 번째 프로토콜의 경우, 2분 동안 근육이 이완되도록 한 다음 다른 휴식 장력에서 EDL 근육을 자극하여 최적의 길이 또는 LN을 결정합니다. 디지털 캘리퍼를 사용하여 원위 매듭과 근위 매듭 사이의 최적 근육 길이를 측정합니다.2분 동안 근육을 이완시킵니다. 프로토콜 3의 경우 휴식 장력을 L naught로 조정하고 단일 경련 자극에서 근육 힘을 측정합니다. 트위치 장력을 결정하거나 pt 최대 장력 또는 TPT까지의 시간과 pt의 절반 이완 시간을 결정합니다.2분 동안 근육을 이완시킵니다. 네 번째 프로토콜을 수행하기 위해 휴지 장력을 LN으로 조정하고 다른 자극 주파수에서 생성되는 고환 근육 힘을 측정합니다. Muscle Force가 최대 타이타닉 포스에 도달하는 P NAUGH를 측정합니다.긴장이 최고조에 달하는 시간과 이완 시간이 절반인 시간을 측정합니다. 5분 동안 근육이 이완되도록 하여 프로토콜 5를 시작하고, 휴식 긴장을 L Naugh로 조정하고, 주기 사이에 2분의 휴식과 함께 편심 수축을 10회 적용합니다. 편심 수축의 각 주기 후 PN의 상대적 힘 손실을 계산합니다.마지막으로 장치에서 EDL 근육을 분리하고 봉합사 부위의 힘줄을 자릅니다. 근육 젖은 무게를 결정하고 근육 단면적을 계산합니다. EDL 근육의 수동적 특성을 측정하려면 앞에서 설명한 대로 반대쪽 EDL 근육을 해부하고 장치에 부착합니다.이 비디오에서는 근육을 10%씩 160% L로 긴장시키는 6단계 스트레칭 프로토콜에 따라 근육을 만듭니다. 스트레스 변형률 프로파일을 분석하여 EDL 근육 스트레칭의 점성 특성을 평가하고 근육을 10%L 무위로 유지하고 다음 시간대에서 스트레스 완화율을 측정합니다. 순환수로 온도 조절 동물 단계를 섭씨 37도로 가열하는 것으로 시작합니다.DMC 소프트웨어를 켜고 로드합니다. 마취된 쥐의 뒷다리에 TA 근육을 노출시킨 후 빵 실크 봉합사를 사용하여 슬개골 인대 주위에 이중 사각형 매듭을 묶습니다. 그런 다음 이중 사각형 매듭을 묶은 다음 원위 타 힘줄의 근육 힘줄 접합부 또는 MTJ에 고리 매듭을 묶습니다.동일한 봉합사를 사용하여 약 10mm 루프를 만듭니다. 동물을 엎드린 자세로 놓고 이두박근 근육을 노출시킵니다. 좌골 신경을 노출시키고 근위 끝 주위에 이중 사각형 매듭을 묶습니다.매듭보다 위쪽 신경을 잘라 무릎 쪽으로 약 5mm 길이의 신경을 조심스럽게 절개합니다. 신경을 늘리거나 손상시키지 마십시오. 이 비디오의 앞부분에서 설명한 것처럼 반대쪽 타 근육을 준비하고 뒷다리 중 하나를 링거의 완충기에 적신 면 조각으로 덮습니다.다음으로, 엎드린 동물을 동물 플랫폼에 놓고 무릎 핀 주위의 슬개골 인대 봉합선을 사용하여 무릎을 고정하기 위해 이중 사각형 매듭을 묶습니다. 그런 다음 SIL 가드 블록에 발을 고정한 후 동물 플랫폼을 온도 조절 스테이지에 고정하고 열 램프를 배치하여 동물의 중심 체온을 섭씨 37도로 유지합니다. 전극을 플랫폼에 부착한 후 좌골 신경을 전극에 부착한 다음 덮개가 없는 뒷다리의 TA 힘줄을 원위 매듭 원위부에 절단하고 봉합 루프를 레버 암 후크에 부착합니다.노출된 뒷다리 근육을 따뜻한 링거로 덮고 담근 솜을 완충하여 TA 근육의 수축 측정을 기록합니다. 이 비디오의 앞부분에서 EDL 근육에 대해 설명한 DMC 소프트웨어의 파라미터와 프로토콜을 사용하고 소프트웨어를 사용하여 데이터를 분석합니다. TA 근육을 측정한 후 레버 암 후크에서 원위 TA 힘줄 봉합 루프를 분리하고 시연된 바와 같이 반대쪽 TA 근육의 수축 특성을 측정합니다. 동물을 안락사시킨 후 TA 근육을 제거하고 젖은 무게를 측정합니다.단면적을 계산하기 위해 이 표는 생후 4개월에서 6개월에 정상 블랙 10 및 디스트로핀 결핍 또는 MDX 마우스의 EDL 근육의 형태 측정 특성을 보여줍니다. 여기에 표시된 것은 블랙 10 및 MDX 마우스의 EDL 근육의 대표적인 수축 및 수동 속성으로, Twitch 힘 특이적 최대 타이타닉 힘, 최대 장력까지의 시간 및 절대 최대 타이탄 힘의 절반 이완 시간을 포함합니다. 긴장이 최고조에 달하는 시간과 이완 시간이 절반인 시간도 절대 트위치 힘으로 계산할 수 있습니다.응력 변형률 프로파일과 응력 완화율은 EDL 근육의 수동적 특성을 설명하는 데 사용됩니다. 디스트로핀의 부재는 EDL 근육의 수축 및 수동 특성에 상당한 영향을 미칩니다. M-D-X-E-D-L 근육에서 특정 트위치 및 타이타닉 힘이 크게 감소합니다.예를 들어, M-D-X-E-D-L 근육에서 긴장이 최고조에 달하는 시간은 훨씬 더 빠른 반면 절반의 이완 시간은 훨씬 더 느립니다. 또한, 응력 변형률 프로파일은 M-D-X-E-D-L 근육의 강성이 크게 증가했음을 시사합니다. M-D-X-E-D-L 근육은 또한 최대 응력에 도달하기 전에 훨씬 더 높은 저항력을 생성하는 반면 최고 응력 이후 응력은 훨씬 더 빠르게 감소합니다.또한, 스트레스 완화율은 블랙 10 EDL 근육에 비해 M-D-X-E-D-L 근육에서 유의하게 높았습니다. 박리 절차를 마스터하면 EDL 근육의 수축성 및 수동적 특성에 대한 생체 외 분석을 40분 이내에 완료할 수 있습니다. 그리고 두 TA 근육의 수축 특성에 대한 현장 평가는 발달 후 60분 이내에 수행할 수 있습니다.이 기술은 근육 질환 분야에서 골격근의 수축 및 수동적 특성을 평가하는 연구자들이 치료의 효율성을 결정하는 데 도움이 되는 길을 열었습니다. 추가 질문에 답하기 위해 골격근의 조직병리학 분석과 같은 다른 방법을 수행할 수 있습니다. 예를 들어, 골격근의 조직 병리학에 대한 실험적 치료의 효과.

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연구

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Biology

생물학

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우리는 그대로 마우스 골격 근육을 사용하여 작은 각도 X 선 회절 실험을 수행하기위한 상세한 프로토콜을 제시한다. 인간 질병에 대한 형질전환 마우스 모델의 광범위한 가용성으로,이 실험 플랫폼은 유전 근육 질환의 구조적 기초를 해명하기위한 유용한 테스트 베드를 형성 할 수...

근육 질환의 구조적 기초를 연구하기위한 도구로 그대로 뮤린 골격 근육의 X 선 회절

근육 포도당 흡수의 온전한 조절은 전신 포도당 항상성을 유지하는 데 중요합니다. 이 프로토콜은 전신 포도당 대사에 대한 다양한 생리적 개입의 영향을 묘사 할 때 단리되고 배양 된 성숙한 골격근에서 인슐린 및 수축 자극 포도당 흡수에 대한 평가를 제시합니다.

마우스로부터 단리되고 배양된 성숙한 골격근에서의 인슐린- 및 수축-자극된 글루코스 흡수의 측정

무릎 근간근의 정량화는 노화, 질병, 부상 및 재활에 대한 기능적 적응을 이해하는 것이 필수적입니다. 생체 무릎 확장 이소메트릭 피크 파타닉 토크에서 반복적으로 측정하는 새로운 방법을 제시합니다.

마우스에서 무릎 엑스텐서 근육 기능의 생체 측정

이 프로토콜은 SMA 및 ColQ 관련 CMS의 마우스 모델에서 병리학 적 변화를 정량화하는 데 사용되는 컨 포칼 및 STED 현미경을 결합하여 신경근 접합부의 형태 측정 분석 방법을 설명합니다.

결합된 공초점 및 초분해능 현미경에 의한 마우스의 신경근 접합부 특성 분석

우리는 성인 마우스의 6개 근육에서 다양한 길이와 유형의 효소로 해리된 섬유를 얻기 위한 프로토콜을 설명합니다: 그 중 3개는 이미 설명되었고(flexor digitorum brevis, extensor digitorum longus, soleus) 그 중 3개는 처음으로 성공적으로 해리되었습니다(extensor hallucis longus, peroneus longus, peroneus digiti quarti).

생쥐의 6개 뒷다리 근육의 효소 해리로 얻은 온전한 짧은, 중간 및 긴 골격근 섬유: Beyond Flexor Digitorum Brevis

학습하세요 마우스 사지 근육의 수축 및 수동적 특성을 평가하는 생체외 및 생체내 기법을 통해 근육 질환의 생리학적 변화를 이해하고 실험적 개입의 효과를 평가하는 방법을.

신근 Digitorum의 Longus 근육의 근육 기능의 평가

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