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DOI: 10.3791/53080-v
Mariateresa Tedesco1, Monica Frega1,2, Sergio Martinoia1, Mattia Pesce3, Paolo Massobrio1
1Department of Informatics, Bioengineering, Robotics and System Engineering (DIBRIS),University of Genova, 2Donders Institute for Brain, Cognition and Behaviour, Department of Cognitive Neuroscience,Radboud University Medical Center, 3Fondazione Istituto Italiano di Tecnologia (IIT)
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a novel experimental model that integrates 3D neuronal cultures with planar Micro-Electrode Arrays (MEAs). Neurons are seeded in a scaffold of glass microbeads, allowing them to grow and form interconnected 3D structures.
이 연구에서는 3D 뉴런 배양이 평면 MEA(Micro-Electrode Arrays)에 결합되는 새로운 실험 모델을 presented. 3D 뉴런이 유리 마이크로비즈로 구성된 골격에 뉴런을 파종하여 네트워크를 구축하고, 그 위에서 뉴런이 자라나 상호 연결된 3D 구조를 형성합니다.
이 절차의 전반적인 목표는 마이크로 전극 어레이에 결합된 체외 3차원 뉴런 네트워크의 새로운 모델을 제시하는 것입니다. 이는 먼저 MEA의 중앙 부분을 폴리 데 라이신과 라미닌의 혼합 용액으로 컨디셔닝한 다음 접착 단백질인 라미닌 및 폴리리신으로 마이크로비드를 코팅하여 수행됩니다. 두 번째 단계는 처리된 마이크로비즈의 현탁액을 멀티웰 플레이트에 분배하여 자체 조립하여 균일한 층을 형성하는 것입니다.
절차의 세 번째 단계는 제곱밀리미터당 2000개의 세포 밀도로 MEA의 활성 영역에 세포를 플레이트하여 2D 뉴런 네트워크를 생성하는 것입니다. 도금 후 6-8시간 후에 현탁액이 멀티웰 플레이트에서 MEA로 전달되고 마이크로비드가 육각형의 컴팩트한 구조로 자체 조립될 수 있습니다. 궁극적으로 컨포칼 현미경은 3D 네트워크를 시각화하는 데 사용되며, 이는 MEA를 통해 성장한 기존의 2D 뉴런 네트워크와 비교됩니다.
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