Un protocole pour l'évaluation fonctionnelle de Whole-Protein Saturation mutagenèse Bibliothèques Utilisant à haut débit de séquençage

Nous présentons un protocole pour l'évaluation fonctionnelle des bibliothèques saturation site unique mutagenèse complets de protéines en utilisant le séquençage à haut débit. Fait important, cette approche utilise des paires d'amorces orthogonales pour multiplexer la construction et le séquençage bibliothèque. Les résultats représentatifs en utilisant TEM-1 β-lactamase sélectionnée à une dose cliniquement pertinente de l'ampicilline sont fournis.