Name: 신경 근육 학 교차로 기능을 측정 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-08-06T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 40 s
Description: 학습하세요 생체외 근육-신경 준비물을 이용한 신경근육 접합부 기능 평가 방법을. 직접 자극과 신경 자극을 비교하여 수축 반응 차이를 분석하고, 신경근육 질환 연구에 필수적인 기능적 연결을 평가합니다.

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저자의 연구실에서 작업 피코 로마와 텔 레 톤 (no를 부여에 의해 지원 되었다 GGP14066)입니다.

<ol><li>Dadon-Nachum, M., Melamed, E., Offen, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%26%2334%3Bdying-back%26%2334%3B+phenomenon+of+motor+neurons+in+ALS%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The &#34;dying-back&#34; phenomenon of motor neurons in ALS.</a> J Mol Neurosci. 43 (3), 470-477 (2011).</li>
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<li>Van Lunteren, E., Moyer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+DAP+on+diaphragm+force+and+fatigue%2C+including+fatigue+due+to+neurotransmission+failure%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effects of DAP on diaphragm force and fatigue, including fatigue due to neurotransmission failure.</a> J Appl Physiol. 81 (5), 2214-2220 (1996).</li>
<li>Van Lunteren, E., Moyer, M., Kaminski, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adverse+effects+of+myasthenia+gravis+on+rat+phrenic+diaphragm+contractile+performance%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Adverse effects of myasthenia gravis on rat phrenic diaphragm contractile performance.</a> J Appl Physiol. 97 (3), 895-901 (2004).</li>
<li>Lee, Y., Mikesh, M., Smith, I., Rimer, M., Thompson, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscles+in+a+mouse+model+of+spinal+muscular+atrophy+show+profound+defects+in+neuromuscular+development+even+in+the+absence+of+failure+in+neuromuscular+transmission+or+loss+of+motor+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Muscles in a mouse model of spinal muscular atrophy show profound defects in neuromuscular development even in the absence of failure in neuromuscular transmission or loss of motor neurons.</a> Dev Biol. 356 (2), 432-444 (2011).</li>
<li>Personius, K. E., Sawyer, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variability+and+failure+of+neurotransmission+in+the+diaphragm+of+mdx+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromuscular+Disord%22%5BJournal%5D)">Variability and failure of neurotransmission in the diaphragm of mdx mice.</a> Neuromuscular Disord. 16 (3), 168-177 (2006).</li>
<li>Röder, I. V., Petersen, Y., Choi, K. R., Witzemann, V., Hammer, J. A., Rudolf, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+myosin+Va+in+the+plasticity+of+the+vertebrate+neuromuscular+junction+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Role of myosin Va in the plasticity of the vertebrate neuromuscular junction in vivo.</a> PLoS ONE. 3 (12), e3871(2008).</li>
<li>Chevessier, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+for+congenital+myasthenic+syndrome+due+to+MuSK+mutations+reveals+defects+in+structure+and+function+of+neuromuscular+junctions%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">A mouse model for congenital myasthenic syndrome due to MuSK mutations reveals defects in structure and function of neuromuscular junctions.</a> Hum Mol Genet. 17 (22), 3577-3595 (2008).</li>
<li>Farchi, N., Soreq, H., Hochner, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+acetylcholinesterase+overexpression+induces+multilevelled+aberrations+in+mouse+neuromuscular+physiology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Chronic acetylcholinesterase overexpression induces multilevelled aberrations in mouse neuromuscular physiology.</a> J Physiol. 546 (1), 165-173 (2002).</li>
<li>Kuei, J. H., Shadmehr, R., Sieck, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relative+contribution+of+neurotransmission+failure+to+diaphragm+fatigue%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+%28Bethesda%2C+Md%3A+1985%29%22%5BJournal%5D)">Relative contribution of neurotransmission failure to diaphragm fatigue.</a> J Appl Physiol (Bethesda, Md: 1985). 68 (1), 174-180 (1990).</li>
<li>Del Prete, Z., Musarò, A., Rizzuto, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+mechanical+properties%2C+including+isotonic+fatigue%2C+of+fast+and+slow+MLC%2FmIgf-1+transgenic+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Measuring mechanical properties, including isotonic fatigue, of fast and slow MLC/mIgf-1 transgenic skeletal muscle.</a> Ann Biomed Eng. 36 (7), 1281-1290 (2008).</li>
<li>Lynch, G. S., Hinkle, R. T., Chamberlain, J. S., Brooks, S. V., Faulkner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Force+and+power+output+of+fast+and+slow+skeletal+muscles+from+mdx+mice+6-28+months+old%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Force and power output of fast and slow skeletal muscles from mdx mice 6-28 months old.</a> J Physiol. 535 (2), 591-600 (2001).</li>
<li>Brooks, S. V., Faulkner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contractile+properties+of+skeletal+muscles+from+young%2C+adult+and+aged+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Contractile properties of skeletal muscles from young, adult and aged mice.</a> J Physiol. 404, 71-82 (1988).</li>
<li>Lynch, G. S., Hinkle, R. T., Faulkner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Force+and+power+output+of+diaphragm+muscle+strips+from+mdx+and+control+mice+after+clenbuterol+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromuscul+Disord%22%5BJournal%5D)">Force and power output of diaphragm muscle strips from mdx and control mice after clenbuterol treatment.</a> Neuromuscul Disord. 11 (2), 192-196 (2001).</li>
<li>Rizzuto, E., Pisu, S., Musar, A., Del Prete, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+Neuromuscular+Junction+Functionality+in+the+SOD1+G93A+Animal+Model+of+Amyotrophic+Lateral+Sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng+%22%5BJournal%5D)">Measuring Neuromuscular Junction Functionality in the SOD1 G93A Animal Model of Amyotrophic Lateral Sclerosis.</a> Ann Biomed Eng . 43, (2015).</li>
<li>Soliani, L. <a target="_blank" href="http://www.dsa.unipr.it/soliani/soliani.html">Manuale di statistica per la ricerca e la professione statistica univariata e bivariata parametrica e non-parametrica per le discipline ambientali e biologiche</a>. , (2004).</li>
<li>Gurney, M. E., Pu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+neuron+degeneration+in+mice+that+express+a+human+Cu%2CZn+superoxide+dismutase+mutation%5BTitle%5D)+AND+%22Science+%28New+York%2C+N.Y%29%22%5BJournal%5D)">Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu,Zn superoxide dismutase mutation.</a> Science (New York, N.Y). 264 (5166), 1772-1775 (1994).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

위에서 설명한 실험 프로토콜에는 측정 하 고 차별 어떤 기능 변경 발생 한 근육에 직접 또는 간접적으로 신경 근육 학 교차로 수준에서의 이상적인 방법을 제공 한다. 이 기술은 NMJ 기능의 간접 측정을 기반으로, 이후 형태학 변화 또는 생 화 확 적인 변화에 어떤 결함 관련 된 경우 설정 하에서 사용할 수 없습니다. 대조적으로, 그것은 어떤 형태 또는 생 화 확 적인 변경 neurotransmission 기능 신호 감소 여부 결정의 효과적인 방법을 제공지 않습니다. 그러나, 힘 측정 완료 근육 목욕에서 제거, 얼룩이, 최적의 길이에 고정, 포함 화합물으로 둘러싸인 고 빠르게 녹는 isopentane에 냉동. 근육 후속 평가-80 ° C에서와 같은 immunohistochemical 및 형태소 분석에 대 한 저장할 수 있습니다.
우리가 여기에서 제안 하는 기술은 결합, 처음으로, NMJ 및 근육 기능을 특성화 하는 여러 매개 변수를 측정 하는 실험 테스트 프로토콜을 기반으로 합니다...

신경 근육 학 교차로 (NMJ) 근육 섬유의 모터 종판 및 터미널 모터 신경 축 삭 사이 연결에 의해 형성 된 화학 시 냅 스 이다. NMJ 근육과 신경 사이 통신 장애, 노화 또는 루 경화 증 (ALS)에서 발생 되는 중요 한 역할을 보여줘 왔다. 근육과 신경, 의사 소통 양방향 방법1,2로 근육 결함 별도로 NMJ 결함을 측정할 수 있는 그들의 physiopathological 상호 작용에 대 한 새로운 통찰력을 제공할 수 있습니다. 사실,이 기능 평가 형태학 또는 생 화 확 적인 변경 감소 neurotransmission 신호 기능을 도울 수 있다.
근육 수축 반응 elicited 신경 자극과 같은 근육의 막의 직접 자극에 의해 evoked의 응답에 의해 비교 NMJ 기능의 간접 측정으로 제안 되었습니다. 실제로, 막 자극에 의해 패스 neurotransmission 신호, 이후 두 수축 성 반응의 차이 변화는 NMJ에 관찰 될 수 있습니다. 이 방법은 광범위 하 게 쥐3,,45,6,7, 제안 되었고 또한 마우스 모델8,,910,,1112에 정보를 수집 하는 데 사용.
여기, 우리가 자세히 설명 삭제할 soleus 좌 골과 횡 경 막 인할지 준비 두 근육 신경 준비, 즉 테스트 하는 프로시저. 주문 품을 사용 하 여 소프트웨어, 우리 설계 NMJ 및 근육 기능을 특성화 하는 여러 매개 변수 측정을 결합 하 여 지속적인 테스트 프로토콜 함으로써 근육의 NMJ 손상의 포괄적인 평가 별도로 저조한. 특히, 프로토콜 트 위치 힘, 근육 활동, 힘 주파수 곡선에 대 한 직접 및 신경 stimulations, 모두는 발사와 tetanic 주파수 및 intratetanic 피로7neurotransmission 실패13 측정합니다.

<table><tbody><tr><td>듀얼 모드 레버 시스템&nbsp;</td><td>오로라 사이언티픽 Inc.</td><td>300B</td><td>액추에이터/트랜스듀서</td></tr><tr><td>고출력 바이페이즈 자극기&nbsp;</td><td>오로라 사이언티픽 Inc.</td><td>701B</td><td>펄스 자극기 (신경)</td></tr><tr><td>고출력 바이페이즈 자극기&nbsp;</td><td>오로라 사이언티픽 Inc.</td><td>701C</td><td>펄스 자극기(근육)</td></tr><tr><td>체외 근육 장치&nbsp;</td><td>오로라 사이언티픽 Inc.</td><td>800A</td><td></td></tr><tr><td>준비 티슈 목욕</td><td>Radnoti</td><td>158400</td><td></td></tr><tr><td>단극 흡입 전극</td><td>A-M 시스템</td><td>573000</td><td>집에서 만든 참조&nbsp;</td></tr><tr><td>오실로스코프&nbsp;</td><td>Tektronix</td><td>TDS2014</td><td></td></tr><tr><td>실체현미경</td><td>Nikon</td><td>SMZ 800</td><td></td></tr><tr><td>Cold light illuminator&nbsp;</td><td>Photonic Optics</td><td>PL 3000</td><td></td></tr><tr><td>수집 보드</td><td>National Instruments</td><td>NI PCIe-6353</td><td></td></tr><tr><td>커넥터 블록</td><td>National Instruments</td><td>NI 2110</td><td></td></tr><tr><td>개인용 컴퓨터</td><td>AMD Phenom II x4 970</td><td></td><td>프로세서 3.50 Ghz (Windows 7</td></tr><tr><td>포함) LabView 2012 소프트웨어</td><td>National Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Krebs-Ringer 중탄산염 버퍼&nbsp;</td><td>시그마-알드리치</td><td>K4002&nbsp;</td><td>생리적 완충액</td></tr><tr><td>중탄산나트륨</td><td>시그마-알드리치</td><td>S5761&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>염화칼슘 CaCl2</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C4901</td><td>무수, 분말, &ge; 97 %</td></tr> <tr><td>버퍼 HEPES</td><td>시그마 - 알드리치</td><td>H3375</td><td>&ge; 99.5% (적정)</td></tr> <tr><td>접시 60mm x 15mm</td><td>팔콘</td><td>353004</td><td>폴리스티렌</td></tr><tr><td>실리콘</td><td>실가드;</td><td>184 실리콘&nbsp;</td><td>엘라스토머 키트&nbsp; 0.5Kg.</td></tr><tr><td>온도조절기</td><td>Dennerle</td><td>DigitalDuomat 1200</td><td></td></tr><tr><td>펌프</td><td>Newa Mini</td><td>MN 606</td><td>수족관</td></tr><tr><td>내열성 열케이블 Lucky</td><td>Reptile</td><td>61403-1</td><td>50/60Hz 50W</td></tr><tr><td>버킷</td><td>10</td><td></td>리터 <td>폴리프로필렌</td></tr><tr><td>O2 + 5%CO2</td><td>siad</td><td></td><td>Mix gas</td></tr><tr><td>#5 Forceps&nbsp;</td><td>Fine Science Tools</td><td>11252-20</td><td>2 아이템</td></tr><tr><td>스프링 가위 - 8mm 블레이드</td><td>Fine Science Tools</td><td>15024-10</td><td>신경 절제</td></tr><tr><td>날카로운 가위&nbsp;</td><td>고급 과학 도구&nbsp;</td><td>14059-11</td><td>근육 제거</td></tr><tr><td>섬세한 가위</td><td>Wagner</td><td>02.06.32</td><td>동물 외부</td></tr><tr><td>학생 메스 핸들 #3</td><td>고급 과학 도구&nbsp;</td><td>91003-12&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>메스 블레이드 #10</td><td>파인 사이언스 도구&nbsp;</td><td>10010-00</td><td></td></tr><tr><td>메스 블레이드 #11</td><td>파인 사이언스 도구&nbsp;</td><td>10011-00</td><td></td></tr><tr><td>나일론 와이어 &오슬래시; 0.16mm</td><td>임의</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

신경 근육 학 교차로 기능을 측정

Measuring Neuromuscular Junction Functionality

신경 근육 학 교차로 (NMJ) 기능 모터 신경 및 근육 사이 통신 장애, 노화 등 루 경화 증 (ALS)에서는 질병을 공부 하는 때 중추적인 역할을 한다. 여기 우리가 NMJ 기능 전기 자극의 두 종류를 결합 하 여 측정 하는 데 사용할 수 있는 실험 프로토콜 설명: 근육 막 자극과 자극이 신경을 통해 직접. 이러한 두 가지 다른 stimulations에 근육 응답의 비교 정의 기능 수준, 근육에서 기능 감소로 이어질는 NMJ에 잠재적인 변경 시킬 수 있습니다.
Ex vivo 준비는 잘 통제 연구에 적합. 여기는 근육 기능과 NMJ soleus 좌 골 신경 준비 및 다이어 프 램 인할지 신경 준비의 여러 매개 변수를 측정 하는 집중적인 프로토콜에 설명 합니다. 프로토콜 약 60 분을 지속 하 고는 주문에 의하여 uninterruptedly 실시 트 위치 속도 론 속성, 근육 및 신경 stimulations의 힘-주파수 관계와 두 개의 매개 변수 NMJ 기능, 즉 neurotransmission 실패와 intratetanic 피로 측정 소프트웨어. 이 방법론 soleus과 횡 경 막 근육 신경 준비에 SOD1G93A 유전자 변형 마우스, 편 overexpresses 돌연변이 항 산화 효소 superoxide dismutase 1 (SOD1) ALS의 실험 모델을 사용 하 여 손해를 검출 하 사용 되었다.

우리가 설명 하는 프로토콜은 여러 신경 근육 학 질병 또는 노화 sarcopenia 기능 denervation에 정보를 제공 합니다. 이 프로토콜 여부 (그리고, 그렇다면, 어떤 수준)를 결정 하기 위해 사용할 수 있습니다 근육 변경 근육 자체 또는 신경 근육 학 전송에서 발생 하는 선택적인 변경 됩니다. 아래 데이터는 우리의 그룹18, 루 경화 증 질병20의 최종 단계에서의 SOD1G93A 유전자 변형 마우스 모델에 의해 이전 작업의 결과입니다. SOD1G93A 유전자 변형 마우스 편 돌연변이 항 산화 효소 superoxide dismutase 1 (SOD1) overexpresses. 그림 3과 4는 dF/dt 및 tetanic 힘 값 soleus 좌 골 신경 (왼쪽)와 횡 경 막 인할지 신경 (오른쪽) 준비를 보여줍니다. 이러한 결과 근육 자...

신경 근육 학 교차로 (NMJ)의 기능 평가 근육과 신경 사이 통신에 필수 정보를 제공할 수 있습니다. 여기는 포괄적으로 두 개의 서로 다른 근육-신경 준비, 즉 soleus 좌 골 인할지 다이어 프 램을 사용 하 여 NMJ 및 근육 기능을 평가 하는 프로토콜에 설명 합니다.

Neuromuscular junction (NMJ) functionality plays a pivotal role when studying diseases in which the communication between motor neuron and muscle is ...

이 절차의 전반적인 목표는 ex vivo 실험적 접근 방식을 통해 신경근 접합부의 기능을 연구하는 것입니다. 이는 근육 신경 표본을 근육막 직접 자극과 신경을 통한 자극이라는 두 가지 방식으로 자극함으로써 수행됩니다. 막 자극은 신경 전달 신호를 우회하므로, 두 수축 반응 사이의 모든 차이는 신경근 접합부 기능의 간접적인 측정값으로 간주될 수 있습니다.본 과정에서는 가자미근(soleus) 좌골 신경 표본을 이용한 절차를 제시합니다. 근육을 신경과 함께 적출하여 관류 조직 욕조(perfused tissue bath)에 넣습니다. 이를 힘 및 길이 조절기에 고정하고, 한 쌍의 백금 전극을 근육과 평행하게 배치합니다.그 다음 유리 흡입 전극을 신경의 절단된 끝부분 가까이로 이동시킵니다. 이후 신경근 접합부와 근육 기능 모두를 철저히 평가하기 위해 종합적인 테스트 프로토콜을 적용합니다. 근육과 신경 사이의 기능적 연결은 양쪽 부분과 생존한 두 분획 모두에 대해 결론을 내립니다.두 조직의 수준에서 첫 번째 영역인 신경근 접합부는 일반적으로 압력과 같은 형태를 보입니다. 하지만 여러 병리적 조건에서 근육과 신경 사이의 상호 작용 기능이 심각하게 손상되며, 신경근 접합부는 복잡한 형태학적 구조를 잃게 됩니다. 본 실험 절차의 전반적인 목적은 ex vivo 실험적 접근 방식을 사용하여 신경근 접합부의 기능을 연구하는 것입니다.이는 두 가지 방법으로 근육 신경 표본을 자극함으로써 수행됩니다. 하나는 근육막을 직접 자극하는 방법이고, 다른 하나는 신경을 자극하여 근육의 특성을 분석하는 방법입니다. 순환 수조의 전원을 켜고 온도를 30 °C로 조절하십시오.욕조를 Krebs-Ringer 용액으로 채웁니다. 0.4 bar의 혼합 가스가 oxitube를 통해 욕조로 흐르게 합니다. 액추에이터 트랜스듀서와 두 개의 펄스 자극기를 켭니다.막 자극의 전류 값은 300 million pair로, 신경 자극의 전류 값은 5 million pair로 설정합니다. 경추 탈구법으로 마우스를 희생시킨 후, 다리에서 피부를 제거합니다. 이제 아킬레스건을 절단하고, 건을 단단히 고정한 상태에서 비복근과 가자미근을 함께 위쪽으로 당깁니다.가자미근의 근위 건이 노출되면 그 윗부분의 종아리 전체를 절단하고, 샘플을 실체 현미경 아래에 위치한 조직 준비 욕조에 빠르게 넣습니다. 포셉을 사용하여 가자미근의 근위 건을 단단히 고정하고, 이를 부드럽게 당겨 좌골 신경

measuring-neuromuscular-junction-functionality

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

초파리 신경근 접합부(NMJ)는 시냅스의 형태와 기능을 연구하기 위한 모델로 사용됩니다. 이 비디오는 연구자들이 NMJ를 특성화하기 위해 정량화하는 중요한 특징에 대해 설명합니다. 예제 프로토콜은 정량화를 자동으로 수행할 수 있는 소프트웨어를 보여줍니다.

초파리 신경근접합부(NMJ) 정량화: 시냅스 형태 및 기능을 평가하는 방법

이 비디오는 마우스의 CMAP(Compound Muscle Action Potential)를 측정하기 위한 생체 내 기술을 보여줍니다. 전극을 설정하고, 근육 섬유에 신경을 공급하는 앞다리 뉴런을 자극하고, 근육 반응을 기록하는 단계를 간략하게 설명합니다. 이 기술은 신경 세포 탈수초화 및 기능적 뉴런 손실을 평가합니다.

Measuring Compound Muscle Action Potentials in Mouse Forelimb Muscles In Vivo(생체 내 마우스 앞근육의 복합 근육 활동 전위 측정)

이 동영상은 기능적 신경근 접합부를 평가하는 방법을 보여줍니다. 근육 조직과 운동 뉴런을 포함하는 생물반응기와 형광 현미경을 사용하여 뉴런의 빛에 민감한 채널을 자극하여 전기 신호를 생성하여 근섬유 수축을 일으킵니다.

동시 광 자극 및 비디오 녹화를 통한 기능적 신경근 접합부 평가

신경근 접합부(NMJ)는 때때로 시냅스 실패로 이어질 수 있는 다양한 조건에서 변경됩니다. 이 보고서는 이러한 구조적 변화를 정량화하기 위한 형광 현미경 기반 방법을 설명합니다.

신경 근육 접합 : 측정 시냅스 크기, 공 초점 형광 현미경을 사용하여 시냅스 단백질 농도의 분열 및 변경

이 문서에 설명 된 프로토콜 neuromuscular 접속점에 자발적인 기록 마우스 levator auris longus (LAL) 근육 및 신경 갖는 postsynaptic 잠재력 (전류 클램프)과 전류 (전압 클램프)를 사용 합니다. 이 기술 사용 하 여 정상과 질병 조건 하에서 시 냅 시스 전송의 기계 장치에 중요 한 통찰력을 제공할 수 있습니다.

Levator Auris Longus 포유류 신경 근육 학 전송 전압 클램프 조건에서의 시험을 위한 준비

신경 근육 접합 구성 요소를 정확하게 검출하는 능력은 병리학적 또는 발달 과정으로 인해 아키텍처의 수정을 평가하는 데 중요합니다. 여기서 우리는 정량 적 측정을 수행하는 데 사용할 수있는 전산 신경 근육 접합의 고품질 이미지를 얻기 위해 간단한 방법에 대한 완전한 설명을 제시합니다.

면역형광및 전체산 신경근육 접합의 형태 분석에 대한 단일 골격 근육 섬유의 해부

당사는 인간 원발성 메소포스트 유래 근투와 인간 유도만능 줄기 세포 유래 모터 뉴런을 공동 배양하여 상업적으로 이용 가능한 미세유체 장치에서 인간 모터 유닛을 생성하는 방법을 설명하며, 이로 인해 기능적으로 활성 신경 근육 접합이 형성된다.

미세 유체 장치에서 기능성 신경 근육 접합을 갖춘 인간 모터 유닛 생성

이 프로토콜은 SMA 및 ColQ 관련 CMS의 마우스 모델에서 병리학 적 변화를 정량화하는 데 사용되는 컨 포칼 및 STED 현미경을 결합하여 신경근 접합부의 형태 측정 분석 방법을 설명합니다.

결합된 공초점 및 초분해능 현미경에 의한 마우스의 신경근 접합부 특성 분석

우리는 인간 공학 골격근 조직과 광유전학적 모토뉴런을 사용하여 신경근 접합 기능을 특성화하기 위한 재현 가능하고 자동화되고 편향되지 않은 이미징 시스템을 설명합니다. 이 시스템은 시간이 지남에 따라 신경 근육 연결성의 기능적 정량화를 허용하고 신경 독소 및 중증 근무력증 환자 혈청으로 인한 감소 된 신경 근육 기능을 감지합니다.

인간 신경근 접합부의 광유전학 모델의 공학 및 특성화

상기 프로토콜은 상이한 바이오마커, 즉, 뉴로필라멘트 200, 수포성 아세틸콜린 수송체, 알파-분가로톡신 및 S100을 갖는 형광 면역조직화학을 사용하여 래트 내측 위장관근에서 시냅스 전 말단, 시냅스 후 수용체, 및 시냅스 주변 슈완 세포 사이의 공간적 상관관계를 조사하는 방법을 나타낸다.

쥐 내측 위장근에서 신경근 접합부의 형태학적 특성 시각화

이 연구에서는 설치류 모델에서 신경근 접합부(NMJ) 전달의 생체 내 측정을 가능하게 하는 정교한 단일 섬유 근전도(SFEMG) 프로토콜을 시연합니다. 쥐 비복근의 NMJ 전달 변동성 및 실패를 정량화할 수 있도록 SFEMG 기술에 대한 단계별 접근 방식이 설명되어 있습니다.

설치류 모델에서 신경근 접합 전달을 평가하기 위한 자극 단일 섬유 근전도(SFEMG)

학습하세요 생체외 근육-신경 준비물을 이용한 신경근육 접합부 기능 평가 방법을. 직접 자극과 신경 자극을 비교하여 수축 반응 차이를 분석하고, 신경근육 질환 연구에 필수적인 기능적 연결을 평가합니다.

신경 근육 학 교차로 기능을 측정

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