December 10th, 2020
מיקרו-סירקולציה בחוט השדרה ממלאת תפקיד מרכזי בפגיעה בחוט השדרה. רוב השיטות אינן מאפשרות הערכה בזמן אמת של מיקרו-סירקולציה של חוט השדרה, החיונית לפיתוח טיפולים ממוקדי מיקרו-סירקולציה. כאן, אנו מציעים פרוטוקול באמצעות לייזר-דופלר-זרימה מחט בדיקות במודל בעלי חיים גדול של איסכמיה / רפרפוזיה.
הפרוטוקול שלנו מספק שיטה הניתנת לשחזור להערכה בזמן אמת של מיקרו-סירקולציה של חוט השדרה. הוא מציע את היכולת להעריך גישות טיפוליות במיקרו-סירקולציה של חוט השדרה ובמצבי רפרפוזיה של איסכמיה. הטכניקה שלנו קלה ללמידה, זעיר פולשנית, ומציעה לנו את ההזדמנות להעריך מיקרו-פרפוזיה של חוט השדרה במקביל ללחץ נוזל המוח וההמודינמיקה במודל של בעלי חיים גדולים.
ידגימו את ההליך ד"ר כריסטוף בהם וד"ר טיל פרידהיים, מומחים להרדמה וחברים מדעיים במעבדה שלנו. מפגינים נוספים יהיו מייקל גרסלר, מתמחה בהרדמה. לאחר אישור רמת הרגעה מתאימה בחזיר בן שלושה חודשים במשקל 40 קילוגרם, הניחו את החיה בתנוחה הצדדית הימנית וכופפו את גב החיה כדי להרחיב את המרווח בין החוליות.
לחשוף בניתוח את האזור הפרה-חולייתי להכנת תהליכים קוצניים וקשתות חוליות ולהניח צנתר ורידים היקפיים בגודל 14 לתוך חוט השדרה ברמה של חוליה חזה 13 עד 14 או חוליה מותנית אחת עד שתיים בין שתי קשתות חוליות. החלף את המחט בבדיקת מחט דופלר לייזר וחבר את הגשושית לקשיח ולתוכנה המיועדת כדי לבדוק את איכות האות. יש להקפיד על אות יציב עם פעימות בינונית.
תקן בזהירות את הגשושית עם תפרים והשתמש בפאנינג כדי למנוע מהגשושית להתנתק או להתעקם. למיקום מלעורי של ניקוז נוזל המוח השדרתי למדידה ובקרה של לחץ מוחי שדרתי, זהה את רמת המותני ארבע עד חמש או L5 עד 6. נקב את העור ואת החלל התת עורי בעזרת מחט הכניסה והסר את מחט השיבוץ.
הנח מזרק מלא במי מלח על מחט הכניסה והשתמש בלחץ קבוע כדי להכניס בזהירות את המחט לחלל האפידורלי. לאחר שמורגש אובדן התנגדות, המעיד על מיקום אפידורלי נכון, הכנס את מחט השיבוץ וקדם את המחט שניים עד שלושה מילימטרים לתוך החלל התוך-תקלי. הכניסו את הניקוז לעומק של 20 סנטימטר.
חבר מתאם נעילת Luer וודא את המיקום על ידי שאיבה זהירה של המשקאות החריפים. לאחר מכן תקן בזהירות את הניקוז בעזרת תפרים וחבר את הניקוז למערכת ניקוז נוזל השדרה. לאחר מכן, חשוף את הגולגולת מאחורי האוזן השמאלית והשתמש בחיבור מקדחה של שישה מילימטר כדי לבצע בזהירות קידוח חור של הגולגולת.
הכניסו בדיקת דופלר לייזר שנייה ישירות למוח והשתמשו בתפרים כדי לקבע בזהירות את הגשושית במקומה. חבר את הגשושית לקשיח ולתוכנה כדי לבדוק את איכות האות. יש להקפיד על אות יציב עם פעימות בינונית.
נתק את כל הגששים ובעזרת ארבעה עד חמישה עוזרים, הנח בזהירות את החיה במצב שכיבה באמצעות ריפוד, הקפד לא להפריע לבדיקות. חבר מחדש את הבדיקות ובדוק את איכות האות. לאחר מכן התחל ניקוז נוזל מוחי רציף בלחץ יעד של 10 מילימטרים כספית ונפח ניקוז של 20 מיליליטר לשעה.
לאחר ביצוע מיני לפרוטומיה, יש להגדיל את חלק החמצן הנשאב לאחד ולתת 0.1 מיליגרם לק"ג פנקורוניום תוך ורידי. נתח בעדינות את עצם החזה מהרקמה שמסביב, ולאחר מכן בצע מיקום דחיסה רטרוסטרנלי כדי למנוע פציעות. לאחר הפסקת האוורור, חלקו את העצם עם מסור מתנודד והפעילו מחדש את האוורור עם חלק מופחת של חמצן בהשראה ל-0.3.
השתמש בצריבה חשמלית כדי להפחית את הדימום ולאטום את עצם החזה בשעוות עצם. גייסו בזהירות את בסיס הריאה השמאלית וחלקו את החלק הצדדי השמאלי של הסרעפת כדי להקל על החשיפה הכירורגית. משוך בעדינות את הריאה השמאלית כדי לחשוף את אבי העורקים היורד פרוקסימלי לגזע הצליאק ולחלק את הרקמה שמסביב.
הנח Overholt סביב אבי העורקים היורד כדי להבטיח חשיפה נכונה והצמד בדיקת זרימה סביב אבי העורקים החזי היורד, ולאחר מכן אשר את נוכחותו של אות באיכות טובה והצמד לולאת כלי סביב אבי העורקים היורד דיסטלי לבדיקת הזרימה כדי לסמן את אזור ההידוק הצולב של אבי העורקים. לאחר רכישת מדידה בסיסית, נהל שלבי טעינת נפח רצופים של שבעה מיליליטר לק"ג של קולואיד עמילן הידרוקסיאתיל במשך תקופה של חמש דקות לכל שלב. חמש דקות של שיווי משקל בין כל שלב עד שהעלייה בתפוקת הלב היא פחות מ-15%לאחר השלמת האופטימיזציה ההמודינמית, חזור על המדידות.
לאחר מכן, הנח מהדק אבי העורקים באזור שסומן קודם לכן באבי העורקים הסופרצליאקי כדי לגרום לאיסכמיה במרווחים של 1, 2, 5, 10 ו-30 דקות למשך 48 דקות בסך הכל. המשך בהידוק צולב אבי העורקים לאחר כל מרווח. לאחר חמש דקות לכל היותר או לאחר נורמליזציה של זרימת עורק הירך, בצע חסימת זרימה ידנית של הווריד הנבוב התחתון כדי למנוע עלייה בלחץ הדם של יותר מ-100 מיליליטר כספית ממוצע לחץ עורקי וחזור על המדידות בסוף מרווח ההידוק של 30 דקות לפני הזלוף מחדש.
לאחר קבלת המדידות, פתח בהדרגה את המהדק כדי להבטיח יציבות המודינמית ולתת שבעה מיליליטר לק"ג של קולואידים של עמילן הידרוקסיאתיל וזריקות בולוס נוספות של 10 עד 20 מיקרוגרם נוראדרנלין ו/או אפינפרין לייצוב. התאם את קצב הנשימה כדי להבטיח נורמוקפניה לפי הצורך. לאחר שעה, חזור על המדידות.
לאחר קבלת המדידות שלאחר הרפרפוזיה, חזור על טעינת הנפח כפי שהודגם וקבל סט מדידות נוסף. 4-1/2 שעות לאחר השראת רפרפוזיה של איסכמיה, קבל את מערך המדידות הסופי. כאן, ניתן לראות דוגמאות להקלטות מיקרו-סירקולטוריות של חוט השדרה בזמן אמת בשילוב עם הקלטות מיקרו-סירקולטוריות ומקרו-המודינמיות מוחיות במהלך הידוק צולב של אבי העורקים לצורך השראת איסכמיה, כמו גם במהלך שחרור והזלפה מחדש.
השיבוש בזרימת אבי העורקים היורד לווה בירידה ניכרת בשטף חוט השדרה בעוד שהלחץ באבי העורקים העולה גדל. רפרפוזיה הובילה לתוצאות הפוכות. ניתוח סטטיסטי של פרמטרי המאקרו והמיקרו-סירקולציה מצביע על ירידה ניכרת בשטף חוט השדרה במהלך איסכמיה.
לעומת זאת, שטף המוח גדל באופן ניכר במהלך איסכמיה כפי שמצוין על ידי הממוצעים השוליים המשוערים ומרווחי הסמך שלהם. זה לווה בעלייה בקצב הלב, בלחץ העורקי ובהתנגדות כלי הדם המערכתית, בעוד שתפוקת הלב ונפח השבץ ירדו. ניתוח מיקרוספירה פלואורסצנטית חשף ירידה ניכרת בזרימת הדם בחוט השדרה התחתון, בעוד שלא נצפה שינוי משמעותי בחוט השדרה העליון.
רפרפוזיה הובילה לתוצאות הפוכות. למרות שהייתה ירידה נוספת בתפוקת הלב, נפח השבץ והלחץ העורקי בסוף הפרוטוקול, שטף חוט השדרה וזרימת הדם המיקרו-סירקולטורית של חוט השדרה היו יציבים. החדרת בדיקת מחט חוט השדרה זקוקה לידע מעמיק באנטומיה.
בנוסף, אתה זקוק לכישורים טכניים גבוהים מאוד בטיפול בבדיקה. יש להימנע מניסיונות מרובים כדי למנוע פגיעות בחוט השדרה, שעלולות להשפיע על המתודולוגיה.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
פרוטוקול זה מספק שיטה שניתן לשחזרה להערכה בזמן אמת של מיקרו-מחזור חוט השדרה, חיוני לפיתוח טיפולים ממוקדים. הוא מאפשר הערכה של גישות טיפוליות בתנאי איסכמיה/רפרפוזיה במודל של חיות גדולות.