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Etichettatura di prossimità basata su AirID per l'interazione proteina-proteina nelle piante
 
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Etichettatura di prossimità basata su AirID per l'interazione proteina-proteina nelle piante

Article DOI: 10.3791/64428-v 08:36 min September 16th, 2022
September 16th, 2022

챕터

요약

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Qui, presentiamo un protocollo passo-passo per eseguire l'esperimento di marcatura di prossimità (PL) nel cetriolo (Cucumis sativus L.) utilizzando AT4G18020 proteina (APRR2)-AirID come modello. Il metodo descrive la costruzione di un vettore, la trasformazione di un costrutto attraverso l'agroinfiltrazione, l'infiltrazione di biotina, l'estrazione di proteine e la purificazione di proteine marcate con biotina attraverso la tecnica di purificazione per affinità.

Tags

AirID Marcatura di prossimità Interazione proteina-proteina Approcci PL Ascorbato Perossidasi modificata APEX Escherichia Coli Biotina Ligasi BirA BioID TurboID Restrizioni Nuova versione Sistemi vegetali Proteina AT4G18020 (APRR2) Protocollo passo-passo Costruzione di vettori Agroinfiltrazione Trasformazione della biotina Estrazione di proteine Tecnica di purificazione per affinità Analisi degli IPP nelle piante
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