Name: Met behulp van de electroretinogram om Function beoordelen in het knaagdier Retina en de beschermende effecten van Remote Limb Ischemische preconditionering (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 34 s
Description: Leer hoe je het electroretinogram gebruikt om retinale functie te beoordelen bij ratten en de beschermende effecten van remote ischemische preconditionering op het netvlies te onderzoeken.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs zijn dankbaar voor de hulp van mevrouw Sharon Spana in knaagdieren controle, handling en experimenten. PhD financiële steun is verstrekt door de Universiteit van Sydney en de Australian Research Centre for Excellence in Vision.

Dit protocol volgt het dier zorg richtlijnen van de Universiteit van Sydney. 1. Het maken van elektroden <ol><li> Teken de positieve elektrode (degene die contact cornea) vanaf een korte (5 cm) lengte van platinadraad 1-2 mm in diameter. Mode het in een lus enkele mm in diameter. Sluit deze lus een huidige lood, lang genoeg om de ingangstrap van de versterker bereikt (zie figuur 4). </li><li> Construct de negatieve elektrode (die zal gaan in de mond van het dier) met behulp van een Ag / AgCl pellet 1-2 mm in diameter, ook verbonden met een conventie lead (zie figuur 4). </li><li> Als een referentie-elektrode (die in romp van het dier gaat), een schone injectienaald (23 G), ook verbonden met een leiding van geschikte lengte (zie figuur 4). </li><li> Idealiter gebruik drie-lood kabels die door de fabrikanten instrument, om de drie elektroden te verbinden (positieve U94; hoornvlies, negatieve → mond, verwijzing → stuit) naar de versterker. </li></ol> 2. Aansluiting en kalibratie van Licht Stimulus en ERG Set-up <ol><li> Maak (of zoek) een opname laboratorium, die donker kan worden gemaakt. Uit te rusten met een of beide van een over-the-bank lichtrode gemaakt of een rood hoofd-lamp. </li><li> Gebruik een luxmeter die rood licht verlichtingssterkte bereiken van het oog van de rat tijdens de installatie te bevestigen niet meer dan 1 lux. Opmerking: een grijsfilter kan worden gebruikt om de helderheid van de lamp te verminderen en de bron van de lamp licht moeten specifiek uitstralen rood licht. Dark aanpassing zal worden aangetast als lichtbronnen uitstoten lager (zichtbaar) golflengten. </li><li> Afdichten van alle strooilicht invoeren van de opname laboratorium (dit vereist vaak volharding met ondoorzichtige tape) en bereiden een grijsfilter (dit kan worden gekocht in platen) groot genoeg is om op te passen, en zo zwak, een computerscherm, je zal hebben in de lab. Opmerking: Stray licht enhet licht van het scherm voldoende zijn om donkere aanpassing van het oog rat schaden. </li><li> Sluit de versterker data-acquisitie hardware. Verbind positieve, negatieve en verwijzing leidt naar de versterker. Zorg ervoor dat de computer en de LED Ganzfeld voedingseenheid zijn aangesloten op een grond bron. Opmerking: Sommige laboratoria hebben zich gespecialiseerd aarding punten, aangesloten op een bouwgrond; een waterleiding is een effectief alternatief. </li><li> Kalibreren van de LED-lichtbron met een research-kwaliteit radiometer. Bevestig sensor van de meter in de stand van de ogen van het dier zal worden gevestigd tijdens een experiment. </li><li> Programmeer de Ganzfeld LEDs naar een full-field ERG protocol met stapsgewijze verhogingen van de flits van energie, flash duur, flash herhaling en tijd tussen de flitsen rennen, genaamd interstimuls interval (ISI), de instellingen. Voor een voorbeeld full-field-protocol zie tabel 1. Opmerking: De full-field ERG flitsen toenemen van repetitieve dim flitsen naar brechts knippert in een stapsgewijze manier. De twee flash-programma is een vervolg op de full-field-protocol en maakt isolatie van staafjes en kegeltjes reacties. </li></ol> 3. Dag Voorafgaand aan ERG Experimenteren <ol><li> Dark passen Sprague-Dawley ratten gedurende 12 uur voor de opname. Het is handig om deze in de opname laboratorium, nadat strooilicht is geëlimineerd. </li></ol> 4. Dag van de ERG Experimentation <ol><li> Schik voor het dier zachtjes verwarmd tijdens het opnemen zijn. We maken gebruik van een lichte metalen platform gebouwd, zodat het hoofd van het dier kan rusten op het juiste moment bij de ingang van de Ganzfeld. Het platform heeft ingebouwde buis waardoorheen we pompen water voorverwarmd tot 40 ° C in een waterbad. Opmerking: Gebleken is dat dit blijft de kerntemperatuur van het dier bij 37 ° C. </li><li> Weeg de rat onder donkere omstandigheden. Gewicht opnemen en maken correcte ketamine (60 mg / kg) en xylazine (5 mg / kg) dosis. Restrain de rat genTLY en injecteer verdoving intraperitoneaal. </li><li> Let op de tijd van de injectie. Zodra het dier bewusteloos is (meestal binnen 5 min) Controleer de diepte van de anesthesie door licht te knijpen een voet pad, om te zien of een reflex reactie aanwezig is. Het is het beste om te wachten tot deze reflex is afwezig of zwak is, alvorens verder te gaan. </li><li> Breng een enkele druppel atropine en een andere van proxmethacaine aan hoornvlies. </li><li> Snijd een 10 cm lengte van de zwarte draad. Maak een lus met een simpele knoop en zet de lus over de evenaar van het oog. Draai het iets; het effect is om de oogbol iets naar voren trekken, met minimale druk. Dit houdt het hoornvlies duidelijk uit de oogleden. </li><li> Breng carbomeer oogdruppels op de cornea oppervlak. Zorgen carbomer blijft aan hoornvlies en niet morsen op de oogleden of het gezicht. </li><li> Plaats absorberend beddengoed bovenop verwarmde platform. </li><li> Positie rat op het beddengoed, met het hoofd in de aanbevolen plaats in de opening van de Ganzfeld. </li><li> Int Inserternal temperatuursonde in het rectum. Secure temperatuursensor in de positie door taping sonde aan op de staart. </li><li> Plaats de referentie-elektrode (de 23 G-naald) subcutaan in het achterste been, en verbinding maken met versterker. </li><li> Plaats de negatieve elektrode (Ag / AgCl pellet) stevig in de mond. Om dit te voorkomen uitglijden uit de mond, brengt de verbindende leiden tot een stabiele ondergrond. </li><li> Plaats de positieve elektrode in het midden van de cornea. Met behulp van een micromanipulator, ervoor te zorgen dat de elektrode raakt het hoornvlies voorzichtig. </li><li> Controleer de lichaamstemperatuur is bij 37,0-37,5 ° C. </li><li> Zodra het dier goed is gepositioneerd en elektroden zijn in de plaats, draperen de hele setup (Ganzfeld en dier) met een ondoorzichtig materiaal (naar donker aanpassing behouden). We maken gebruik van een zachte zwarte doek. </li><li> In de acquisitie software ingesteld op een 2 KHz sampling rate met een collectie tijd van 100-1000 msec met 5 msec van pre-collectie sampling. Stel de band pass filters om 1-1,000Hz en ervoor te zorgen dat de bemonstering wordt geactiveerd om de periode van ~ 250 msec na een flits proeven. </li><li> Controleer de opname baseline. Het moet vrij zijn van externe ruis, maar tonen enkele versterker lawaai en een respiratoire oscillatie. </li><li> Als de basislijn toont externe ruis, begint het oplossen van problemen. De meeste problemen zijn gerelateerd aan afwijkingen in elektrodepositie of aarding. Gebruik een kooi van Faraday om ervoor te zorgen opnames zijn vrij van externe ruis. </li><li> Voer een proefflits, 0,4 log scot cd.sm -2. Een ERG golfvorm gelijk aan figuur 2A moeten verschijnen. In ons laboratorium typische antwoorden voor een 0,4 log scot cd.sm -2 flash zijn (a-wave: -474 ± 39 mV en b-golf: 1512 ± 160 mV, n = 11). </li><li> Laat dier dark opnieuw aan te passen voor 10 min. Het is handig om de 10 min om de basislijn opnieuw te controleren. </li><li> Na de bevestiging van stabiele signaal te beginnen opnemen. </li><li> Aan het einde van de opname sessie, controleer dan of het lichaam temperature werd gehandhaafd. Verwijder elektroden. Reapply carbomeer polymeer hoornvliezen. Laat het dier te herstellen op een warmte-pad totdat het is volledig mobiel en actief, voordat hij terugkeerde naar stallen. </li></ol> 5. Remote ischemie <ol><li> Voer remote ischemie in ofwel wakker of verdoofd knaagdieren. </li><li> Als het dier is verdoofd, leg het op een verwarmd platform (boven) en zet de bloeddrukmeter manchet over het bovenste deel van de achterste ledematen, uit de buurt van de knie. </li><li> Wanneer de dieren worden gebruikt om verschillende handelingen is het mogelijk om deze procedure uit te voeren zonder verdoving; Dit vereist twee personen. Een persoon weerhoudt het dier voorzichtig en de tweede past de bloeddrukmeter manchet en exploiteert de bloeddrukmeter. </li><li> Voor wakkere dieren, gebruik dan een stuk handdoek ~ 15 cm x 30-50 cm om voorzichtig wikkel de dieren, met één achterbeen gratis. Leg het dier op zijn rug op (bijvoorbeeld) de linker onderarm, met zijn hoofd verscholen tussen arm en de romp van de houder, en plaatsde manchet zoals zojuist beschreven. </li><li> Leeglopen van de manchet en zorgen voor de luchtdruk gesloten is. Pomp de manchet 160 mmHg in dieren verdoofd en op 180 mmHg in wakkere dieren. Dit overschrijdt systolische druk (meestal 140 mmHg en 160 mmHg respectievelijk). </li><li> Handhaaf die belasting met gebruikmaking van de handbediende pomp. </li><li> Na de geplande tijd voor ischemie (we gebruiken 2 periodes van 5 minuten, gescheiden door 5 min reperfusie), laten leeglopen van de manchet druk door de luchtdruk ventiel los te draaien. </li><li> Bevestig het effect op afstand ischemie met huidtemperatuur probe bevestigd aan de voetzool. Skin temperatuur daalt meestal 32-30 ° C, meer dan 5 minuten en herstelt op reperfusie. </li></ol> 6. Licht Schade <ol><li> Zorg ervoor dat de ratten zijn in een donker aangepaste nachts, voordat het licht schade procedure. </li><li> Op het juiste moment na ischemie van de ledematen (in onze experimenten zonder vertraging), wordt elk dier afzonderlijk in een plexiglas dozen, wi geplaatstth water en voedsel in de vloer op basis van containers. Opmerking: Licht-geïnduceerde schade kan alleen in albino dieren worden uitgevoerd. </li><li> Schakel op een pre-gekalibreerde 1000 lux wit licht op een standaard tijd (meestal 09:00) en deze toestand gedurende 24 uur behouden. </li></ol> 7. ERG Data Extraction en Analyse <ol><li> Verwerven gemiddeld golfvormen van de ERG. Eventueel corrigeren voor een niet-nul basislijn, door aftrekking. </li><li> Meet de amplitude van een golf (ingediend op gemiddelde tot hogere stimulus intensiteit), als het spanningsverschil tussen de basislijn en de eerste (&lt;30 msec latentie) goot (figuur 1). </li><li> Meet de b-golf amplitude als het spanningsverschil tussen de top van het a-golf en de positieve van de volgende golven, gewoonlijk optreedt bij een latentie van 80-100 msec (figuur 1). </li><li> Isoleer oscillerende potentialen via een Fourier transformatie om gegevens 60-235 Hz filter, met een 90 Hz transitie band <sup&gt; 7. Indien nodig kan de geïsoleerde oscillatiepotentiaal signaal kan dan worden afgetrokken van de ongefilterde golfvorm om de identiteit van een golfdal bevestigen. </li><li> De impliciete tijd (latency) van de a- en b-golf pieken kan ook een nuttige maatregel (figuur 1) zijn. Gebruik de twee flitsen om de staaf reactie te isoleren. Trek de conus response (flash 2) vanaf het gemengde respons (flash 1) aan de stang response isoleren (Figuur 2). </li><li> Normaliseren individuele lichtintensiteit een-wave en b-golf amplitudes (post-behandeling / post-behandeling-baseline) of gemiddeld voor de behandeling groepen. Intensiteit-respons curves plot de groep amplitudes en opstaan ​​tegen flash energie. </li></ol>

<ol><li>Arden, G. B., Heckenlively, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aArden%2C+GB+%22Principles+and+practice+of+clinical+electrophysiology+of+vision%22">Principles and practice of clinical electrophysiology of vision</a>. , MIT Press. 139-183 (2006).</li>
<li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ganglion+cell+contributions+to+the+rat+full-field+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology-London%22%5BJournal%5D)">Ganglion cell contributions to the rat full-field electroretinogram.</a> Journal of Physiology-London. 555 (1), 153-173 (2004).</li>
<li>Fortune, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+ganglion+cell+functional+loss+in+rats+with+experimental+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Selective ganglion cell functional loss in rats with experimental glaucoma.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 45 (6), 1854-1862 (2004).</li>
<li>Alarcon-Martinez, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+and+long+term+axotomy-induced+ERG+changes+in+albino+and+pigmented+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Vision%22%5BJournal%5D)">Short and long term axotomy-induced ERG changes in albino and pigmented rats.</a> Molecular Vision. 15 (254-255), 2373-2383 (2009).</li>
<li>Lyubarsky, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functionally+rodless+mice%3A+transgenic+models+for+the+investigation+of+cone+function+in+retinal+disease+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Research%22%5BJournal%5D)">Functionally rodless mice: transgenic models for the investigation of cone function in retinal disease and therapy.</a> Vision Research. 42 (4), 401-415 (2002).</li>
<li>Bush, R. A., Sieving, P. A. A PROXIMAL RETINAL COMPONENT IN THE PRIMATE PHOTOPIC ERG A-WAVE. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 35 (2), 635-645 (1994).</li>
<li>Liu, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+the+electroretinographic+oscillatory+potentials+in+normal+and+ROP+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Development of the electroretinographic oscillatory potentials in normal and ROP rats.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 47 (12), 5447-5452 (2006).</li>
<li>Casson, R. J., Wood, J. P. M., Melena, J., Chidlow, G., Osborne, N. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+ischemic+preconditioning+on+light-induced+photoreceptor+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">The effect of ischemic preconditioning on light-induced photoreceptor injury.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 44 (3), 1348-1354 (2003).</li>
<li>Lawson, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aerobic+Exercise+Protects+Retinal+Function+and+Structure+from+Light-Induced+Retinal+Degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Aerobic Exercise Protects Retinal Function and Structure from Light-Induced Retinal Degeneration.</a> Journal of Neuroscience. 34 (7), 2406-2412 (2014).</li>
<li>Grimm, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIF-1-induced+erythropoietin+in+the+hypoxic+retina+protects+against+light-induced+retinal+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">HIF-1-induced erythropoietin in the hypoxic retina protects against light-induced retinal degeneration.</a> Nature Medicine. 8 (7), 718-724 (2002).</li>
<li>Weymouth, A. E., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+electroretinography%3A+Methods+for+extraction+and+interpretation+of+rod+and+cone+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Rodent electroretinography: Methods for extraction and interpretation of rod and cone responses.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 27 (1), 1-44 (2008).</li>
<li>Bayer, A. U., Cook, P., Brodie, S. E., Maag, K. P., Mittag, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+different+recording+parameters+to+establish+a+standard+for+flash+electroretinography+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Research%22%5BJournal%5D)">Evaluation of different recording parameters to establish a standard for flash electroretinography in rodents.</a> Vision Research. 41 (17), 2173-2185 (2001).</li>
<li>Pugh, E. N., Lamb, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AMPLIFICATION+AND+KINETICS+OF+THE+ACTIVATION+STEPS+IN+PHOTOTRANSDUCTION%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+Et+Biophysica+Acta%22%5BJournal%5D)">AMPLIFICATION AND KINETICS OF THE ACTIVATION STEPS IN PHOTOTRANSDUCTION.</a> Biochimica Et Biophysica Acta. 1141 (2-3), 111-149 (1993).</li>
<li>Breton, M. E., Schueller, A. W., Lamb, T. D., Pugh, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ANALYSIS+OF+ERG+A-WAVE+AMPLIFICATION+AND+KINETICS+IN+TERMS+OF+THE+G-PROTEIN+CASCADE+OF+PHOTOTRANSDUCTION%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">ANALYSIS OF ERG A-WAVE AMPLIFICATION AND KINETICS IN TERMS OF THE G-PROTEIN CASCADE OF PHOTOTRANSDUCTION.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 35 (1), 295-309 (1994).</li>
<li>Mizota, A., Adachi-Usami, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+body+temperature+on+electroretinogram+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Effect of body temperature on electroretinogram of mice.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 43 (12), 3754-3757 (2002).</li>
<li>Szabo-Salfay, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+electroretinogram+and+visual+evoked+potential+of+freely+moving+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">The electroretinogram and visual evoked potential of freely moving rats.</a> Brain Research Bulletin. 56 (1), 7-14 (2001).</li>
<li>Charng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conscious+Wireless+Electroretinogram+and+Visual+Evoked+Potentials+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+One%22%5BJournal%5D)">Conscious Wireless Electroretinogram and Visual Evoked Potentials in Rats.</a> Plos One. 8 (9), (2013).</li>
<li>Galambos, R., Juhasz, G., Kekesi, A. K., Nyitrai, G., Szilagyi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NATURAL+SLEEP+MODIFIES+THE+RAT+ELECTRORETINOGRAM%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">NATURAL SLEEP MODIFIES THE RAT ELECTRORETINOGRAM.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 91 (11), 5153-5157 (1994).</li>
<li>Galambos, R., Szabo-Salfay, O., Szatmar, E., Szilagyi, N., Juhasz, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+modifies+retinal+ganglion+cell+responses+in+the+normal+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Sleep modifies retinal ganglion cell responses in the normal rat.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 98 (4), 2083-2088 (2001).</li>
<li>Guarino, I., Loizzo, S., Lopez, L., Fadda, A., Loizzo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+chronic+implant+to+record+electroretinogram%2C+visual+evoked+potentials+and+oscillatory+potentials+in+awake%2C+freely+moving+rats+for+pharmacological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Plasticity%22%5BJournal%5D)">A chronic implant to record electroretinogram, visual evoked potentials and oscillatory potentials in awake, freely moving rats for pharmacological studies.</a> Neural Plasticity. 11 (3-4), 241-250 (2004).</li>
<li>Huang, J. C., Salt, T. E., Voaden, M. J., Marshall, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NON-COMPETITIVE+NMDA-RECEPTOR+ANTAGONISTS+AND+ANOXIC+DEGENERATION+OF+THE+ERG+B-WAVE+IN-VITRO%5BTitle%5D)+AND+%22Eye+%28London%29%22%5BJournal%5D)">NON-COMPETITIVE NMDA-RECEPTOR ANTAGONISTS AND ANOXIC DEGENERATION OF THE ERG B-WAVE IN-VITRO.</a> Eye (London). 5 (4), 476-480 (1991).</li>
<li>Sasovetz, D. KETAMINE HYDROCHLORIDE - EFFECTIVE GENERAL ANESTHETIC FOR USE IN ELECTRORETINOGRAPHY. Annals of Ophthalmology. 10 (11), 1510-1514 (1978).</li>
<li>Mojumder, D. K., Wensel, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topical+Mydriatics+Affect+Light-Evoked+Retinal+Responses+in+Anesthetized+Mice%29%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Topical Mydriatics Affect Light-Evoked Retinal Responses in Anesthetized Mice).</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 51 (1), 567-576 (2010).</li>
<li>Fraunfel, F. t, Burns, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ACUTE+REVERSIBLE+LENS+OPACITY+-+CAUSED+BY+DRUGS%2C+COLD%2C+ANOXIA%2C+ASPHYXIA%2C+STRESS%2C+DEATH+AND+DEHYDRATION%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">ACUTE REVERSIBLE LENS OPACITY - CAUSED BY DRUGS, COLD, ANOXIA, ASPHYXIA, STRESS, DEATH AND DEHYDRATION.</a> Experimental Eye Research. 10 (1), 19(1970).</li>
<li>Calderone, L., Grimes, P., Shalev, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ACUTE+REVERSIBLE+CATARACT+INDUCED+BY+XYLAZINE+AND+BY+KETAMINE-XYLAZINE+ANESTHESIA+IN+RATS+AND+MICE%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">ACUTE REVERSIBLE CATARACT INDUCED BY XYLAZINE AND BY KETAMINE-XYLAZINE ANESTHESIA IN RATS AND MICE.</a> Experimental Eye Research. 42 (4), 331-337 (1986).</li>
<li>Behn, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dark+adaptation+is+faster+in+pigmented+than+albino+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Documenta+Ophthalmologica%22%5BJournal%5D)">Dark adaptation is faster in pigmented than albino rats.</a> Documenta Ophthalmologica. 106 (2), 153-159 (2003).</li>
<li>Sugawara, T., Sieving, P. A., Bush, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+relationship+of+the+scotopic+and+photopic+ERG+to+photoreceptor+cell+loss+in+light+damaged+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Quantitative relationship of the scotopic and photopic ERG to photoreceptor cell loss in light damaged rats.</a> Experimental Eye Research. 70 (5), 693-705 (2000).</li>
<li>Machida, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((P23H+rhodopsin+transgenic+rat%3A+Correlation+of+retinal+function+with+histopathology%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">P23H rhodopsin transgenic rat: Correlation of retinal function with histopathology.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 41 (10), 3200-3209 (2000).</li>
<li>Brandli, A., Stone, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+Ischemia+Influences+the+Responsiveness+of+the+Retina%5BTitle%5D)+AND+%22Observations+in+the+Rat.+Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Remote Ischemia Influences the Responsiveness of the Retina.</a> Observations in the Rat. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 55 (4), 2088-2096 (2014).</li>
<li>Maccarone, R., Di Marco, S., Bisti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Saffron+supplement+maintains+morphology+and+function+after+exposure+to+damaging+light+in+mammalian+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Saffron supplement maintains morphology and function after exposure to damaging light in mammalian retina.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 49 (3), 1254-1261 (2008).</li>
<li>Hood, D. C., Birch, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+abnormal+rod+photoreceptor+activity+with+the+a-wave+of+the+electroretinogram%3A+Applications+and+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Documenta+Ophthalmologica%22%5BJournal%5D)">Assessing abnormal rod photoreceptor activity with the a-wave of the electroretinogram: Applications and methods.</a> Documenta Ophthalmologica. 92 (4), 253-267 (1996).</li>
<li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rod-driven+a-wave+of+the+dark-adapted+mammalian+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">The rod-driven a-wave of the dark-adapted mammalian electroretinogram.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 39, 1-22 (2014).</li>
<li>Hood, D. C., Birch, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+COMPUTATIONAL+MODEL+OF+THE+AMPLITUDE+AND+IMPLICIT+TIME+OF+THE+B-WAVE+OF+THE+HUMAN+ERG%5BTitle%5D)+AND+%22Visual+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">A COMPUTATIONAL MODEL OF THE AMPLITUDE AND IMPLICIT TIME OF THE B-WAVE OF THE HUMAN ERG.</a> Visual Neuroscience. 8 (2), 107-126 (1992).</li>
<li>Wachtmeister, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oscillatory+potentials+in+the+retina%3A+what+do+they+reveal%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Oscillatory potentials in the retina: what do they reveal.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 17 (4), 485-521 (1998).</li>
</ol>

Jonathan Stone is de directeur van CSCM Pty Ltd

De donker aangepaste flash ERG hierboven beschreven is een betrouwbare methode voor het beoordelen van de retinale functie bij ratten. Zowel de een-wave en b-golf werden gereduceerd met lichte schade. Remote ischemische preconditionering getemperd licht schade veroorzaakte reducties in de een-wave en b-golf. Dit behoud van retinale functie suggereert dat remote ischemische preconditionering heeft geïnduceerde neuroprotectie, die lijkt op andere vormen van beschermende preconditionering zoals hypoxie, ischemie en lichaam...

De ERG is een elektrische potentiaal van het netvlies opgewekt in reactie op licht, en opgenomen van het corneale oppervlak van het oog. Wanneer opnameomstandigheden zorgvuldig beheer kan de ERG worden gebruikt in een verscheidenheid van manieren om de retinale functie bepalen. Hier beschrijven we hoe de &quot;flash ERG, de potentiaal gegenereerd wanneer de retina wordt blootgesteld aan een korte, heldere flits gepresenteerd in een Ganzfeld achtergrond opnemen. De Ganzfeld verspreidt het licht homogeen en de lichtflits het hele netvlies bereikt ongeveer gelijkmatig. Als de retina wordt donker aangepast voor de opname, en de donkere aanpassing wordt gehandhaafd als het dier is voorbereid voor het opnemen, de ERG verkregen wordt opgewekt door zowel staafjes en kegeltjes fotoreceptoren. De donker aangepaste flash ERG heeft een karakteristieke golfvorm, die is op twee manieren geanalyseerd. Ten eerste zijn vroege en late onderdelen van de ERG golfvorm onderscheiden, en met betrekking tot de sequentie van neuronal activering in de retina. De eerste component is een korte vertraging neergaande potentiaal, de a-wave (figuur 1). Dit wordt gevolgd door een opgaande potentiaal, de zogenaamde b-wave. De stijgende fase van de b-golf toont oscillaties, die worden beschouwd als een afzonderlijke component (oscillerende potentials of OP&#39;s). De a-golf wordt geacht zullen worden door fotoreceptoren, de b-golf door cellen van de binnenste kernlaag, en OP&#39;s door amacrine cellen 1. Op basis van de prikkelsterkte, reacties op erg zwak flitsen zogenaamde scotopische drempel respons mogelijk. De scotopic drempelwaarde respons wordt verstaan ​​worden gegenereerd uit de retinale ganglioncellen 2-4. Ten tweede kan de flitser ERG worden gescheiden door lichte aanpassing, of door een twee flash protocol hieronder beschreven, in staaf- en-cone gedreven componenten. Onder fotopische omstandigheden, de a-golf is niet detecteerbaar in ratten omdat de kegel bevolking is laag, maar OP&#39;s en b-wave zijnduidelijke 5. In primaten, waarvan het netvlies hebben hogere kegel bevolking, zowel staaf- en kegel- paden genereren een detecteerbaar een golf 6. Twee nuttige maatregelen vaak uit het flash ERG zijn de amplitudes van de a- en b-golven, gemeten zoals in figuur 1, met typische flash responsen getoond in figuur 2. Wanneer de fotoreceptor populatie wordt verminderd, bijvoorbeeld door blootstelling aan licht tot schadelijk licht, alle onderdelen van de ERG verminderd. Neurobeschermende interventies, zoals remote ischemische preconditionering (RIP), kan worden gevalideerd door het behoud van de amplitudes van de a- en b-golven (Figuur 3). Samengevat, de analyse van de ERG een vergelijking mogelijk tussen gezond, licht beschadigd en neuroprotected netvlies.

<table><tbody><tr><td>PC computer</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Powerlab, 4 kanaals acquisitie hardware</td><td>AD Instruments</td><td>PL 35044</td><td>Acquisitie van ERG</td></tr><tr><td>Animal Bio Amp</td><td>AD Instruments</td><td>FE 136</td><td>Versterker voor ERG</td></tr><tr><td>Lab chart</td><td>AD Instruments</td><td></td><td>Software voor signaalverzameling</td></tr><tr><td>Ganzfeld</td><td>Photometric solutions</td><td>FS-250A</td><td>Lichtstimulatie</td></tr><tr><td>Ganzfeld besturingssysteem</td><td>Photometric solutions</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Research Radiometer</td><td>International light technologies</td><td>ILT-1700</td><td>Lichtreeks kalibreren</td></tr><tr><td>Luxmeter</td><td></td><td>LX-1010B</td><td>Rode lichtverlichting controleren</td></tr><tr><td>Excel</td><td>Microsoft</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Leidingdraden</td><td>AD Instruments</td><td></td><td>Verbind positieve, negatieve grondelektroden met versterker</td></tr><tr><td>Leidingdraden - alligator</td><td>AD Instruments</td><td></td><td>Aarding ganzfeld en acquisitiehardware op computer</td></tr><tr><td>Platinedraad 95%</td><td>A&amp;E metals</td><td></td><td>Positieve elektrode</td></tr><tr><td>Mondelektrode Ag/AgCl Pellet</td><td>SDR</td><td>E205</td><td>Negatieve elektrode</td></tr><tr><td>26 G naald</td><td>BD</td><td></td><td>Grondelektrode</td></tr><tr><td>Waterpomp</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Waterbad</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Slangen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Homeotherm dekensysteem met flexibele sonde</td><td>Harvard Apparaten</td><td>507222F</td><td></td></tr><tr><td>Atropine 1% w/v</td><td>Bausch &amp; Lomb</td><td></td><td>Topische mydriase</td></tr><tr><td>Proxmethycaine 0,5% w/v</td><td>Bausch &amp; Lomb</td><td></td><td>Topische verdoving</td></tr><tr><td>Visco tears oogdruppels</td><td>Novartis</td><td></td><td>Carbomerpolymeer</td></tr><tr><td>Draad</td><td></td><td></td><td>Ooglid terugtrekken</td></tr><tr><td>Pincet</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Herbruikbaar kleefmiddel</td><td>Blu tac</td><td></td><td>Dim rode koplamp. Bevestig elektroden</td></tr><tr><td>Absorbeerbare bedden</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ketamil - ketamine 100 mg/ml - 50 ml</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td><td>Dissociatieve</td></tr><tr><td>Xylium - Xylazine 100 mg/ml - 50 ml</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td><td>Spierverslapper</td></tr><tr><td>Weegschaal</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

met behulp van de electroretinogram om function beoordelen in het knaagdier retina en de beschermende effecten van remote limb ischemische preconditionering

Using the Electroretinogram to Assess Function in the Rodent Retina and the Protective Effects of Remote Limb Ischemic Preconditioning

Het ERG is de som van alle retinale activiteit. Het ERG wordt meestal opgenomen vanaf de hoornvlies, die fungeert als een antenne die signalen van de retina verzamelt en samenvoegt. Het ERG is een gevoelige maat voor veranderingen in de retinale functie die pan-retinaal zijn, maar is minder effectief voor het detecteren van schade beperkt tot een klein gebied van de retina. In het huidige werk beschrijven we hoe we de ‘flash’ ERG kunnen opnemen, dat is het potentieel dat wordt gegenereerd wanneer de retina wordt blootgesteld aan een korte lichtflits. We beschrijven methoden voor anesthesie, mydriase en hoornvliesbeheer tijdens de opname; hoe de retina donker aangepast kan worden gehouden; elektrodematerialen en plaatsing; het bereik en de kalibratie van de stimulusenergie; opnameparameters en de extractie van gegevens. We beschrijven ook een methode om ischemie in een ledemaat te induceren, en hoe de ERG te gebruiken om de effecten van deze van de retina verwijderde ischemie op de retinale functie na lichtschade te beoordelen. Er wordt een twee-flitsprotocol beschreven dat het isoleren van de kegeltjes-gedreven component van de donker aangepaste ERG mogelijk maakt, en daardoor de scheiding van de staafjes- en kegeltjescomponenten. Omdat het kan worden opgenomen met technieken die minimaal invasief zijn, is het ERG veel gebruikt in studies van de fysiologie, farmacologie en toxicologie van de retina. We beschrijven een voorbeeld van deze bruikbaarheid, waarbij het ERG wordt gebruikt om de functie van de door licht beschadigde retina te beoordelen, met en zonder een neuroprotectieve interventie; preconditie door verwijderde ischemie.

Het protocol kan worden gebruikt om visuele functie van knaagdieren retina in vivo meten. De een-golf, een maat voor de afdrukband functie en de b-golf, een maatregel van innerlijke netvlies functie worden geannoteerd in figuur 1. De staaf gedomineerde ERG signaal toeneemt met de toenemende licht stimulus, zoals weergegeven in figuur 2A. De a-golf blijkt bij ~ 0,4 log scot cd.sm -2 en de amplitude van de a-golf neemt toe tot verzadiging 2...

Het elektroretinogram (ERG) is een elektrisch potentiaal dat door de retina wordt gegenereerd als reactie op licht. Dit artikel beschrijft hoe de ERG kan worden gebruikt om de retinale functie te beoordelen, bij in het donker aangepaste ratten, en hoe het kan worden gebruikt om een neuroprotectieve interventie te evalueren, in dit geval afstandsischemisch preconditioning.

Met behulp van de electroretinogram om Function beoordelen in het knaagdier Retina en de beschermende effecten van Remote Limb Ischemische preconditionering

The ERG is the sum of all retinal activity. The ERG is usually recorded from the cornea, which acts as an antenna that collects and sums signals from the ...

Het algemene doel van deze procedure is om de visuele functie te testen bij normaal lichtbeschadigde en remote ischemisch gepreconditioneerde en lichtbeschadigde ratten met behulp van het ERG, om zo de beschermende effecten van remote ledemaatischemie op het netvlies aan te tonen. Dit wordt bereikt door de ratten eerst 12 uur donker te adapteren. De tweede stap is het registreren van het baseline donkergeadapteerde ERG met behulp van LED-lichtstimuli en een digitale versterker.Kies vervolgens voor het blootstellen van de ratten aan retinale stress door ze aan fel continu licht te exponereren. De laatste stap is het vergelijken van de ERG-opnames van de ratten met lichtschade en die met remote limb ischemie zijn voorbehandeld, waarbij de fotoreceptorresponsen in de A-golf en de inneren retinale responsen in de B-golf worden gemeten. Uiteindelijk wordt de donkergeadapteerde ERG gebruikt om de scotopische visuele functie te beoordelen.Zo kan deze methode inzicht bieden in neuroprotectie op basis van remote ischemie. Het kan daarnaast worden toegepast op farmacologisch onderzoek naar andere vormen van netvliesbeschadiging en -ziekten, en voor de screening van dieren met visuele defecten. Om deze procedure te starten, laat u de rat 12 uur lang wennen aan het donker en anesthetiseer deze vervolgens door middel van een injectie met een ketamine-xylazine-cocktail.Zodra het dier bewusteloos is, moet de diepte van de anesthesie worden gecontroleerd door voorzichtig in de poot te knijpen om er zeker van te zijn dat de reflexreactie afwezig is. Breng vervolgens een druppel atropine en een druppel proxmethaan aan op het hoornvlies. Snijd een zwart garen van 10 centimeter lang af.Maak vervolgens een lus met de draad en schuif de lus over de equator van het oog, waarbij deze strak genoeg moet zitten om de oogbol iets naar voren te treken en het hoornvlies vrij te houden van het ooglid. Breng daarna carmer-oogdruppels aan op de hoornvliezen. Plaats de rat op het absorberende strooisel bovenop het verwarmde platform, waarbij de kop in de opening van de ganzfeld wordt geplaatst.Plaats vervolgens de interne temperatuursensor in het rectum om ervoor te zorgen dat de lichaamstemperatuur op 37 °C wordt gehouden, en bevestig de temperatuursensor door de kabel aan de staart van de rat te plakken. Plaats daarna de referentie-elektrode subcutaan in het achterpootje. Bevestig de negatieve elektrode stevig in de bek om te voorkomen dat de elektrode uit de bek glijdt.Bevestig de verbindingsdraad aan een stabiel oppervlak. Positioneer vervolgens de positieve elektrode over het centrum van het hoornvlies en zorg ervoor dat de elektrode het hoornvlies voorzichtig raakt met behulp van een micromanipulator. Zodra de elektroden op hun plaats zitten, wordt de gehele opstelling, inclusief het ganzfeld en het dier, afgedekt met een ondoorzichtig materiaal om de donkeradaptatie te behouden.In de acquisitesoftware: stel de bemonsteringssnelheid in op 2 kHz, met 5 ms voor de pre-collectie bemonstering en een collectietijd van 100 tot 1000 ms. Stel vervolgens de banddoorlaatfilters in op 1 tot 1000 Hz en zorg ervoor dat de bemonstering wordt getriggerd voor een periode van 100 ms na een flits.Controleer nu de baseline van de registratie. Deze moet vrij zijn van externe ruis, maar de ruis van de versterker en de respiratoire oscillatie wel vertonen. Voer vervolgens een testflits uit.Dit is een typische ERG-golfvorm als reactie op de testflits. Wanneer dit is voltooid, krijgt het dier 10 minuten de tijd om opnieuw aan het donker te wennen. Controleer vervolgens of de basislijn een stabiel signaal geeft.Start vervolgens de opname. Controleer aan het einde van de opnamesessie de stabiliteit van de lichaamstemperatuur van het dier. Verwijder de elektroden en breng daarna de carmer-polymeer opnieuw aan op de hoornvliezen. Laat het dier vervolgens herstellen op een warmtemat totdat het volledig mobiel en actief is, alvorens het terug te plaatsen in de huisvesting.Deze figuur toont de meting van een a-golf en b-golf van een ERG na donkeradaptatie. Het hier getoonde spoor is geregistreerd vanaf het hoornvlies van een donkergeadapteerd oog bij een felle lichtflits gegeven op het tijdstip aangeduid als T nul. De amplitude van een a-golf wordt gemeten vanaf de basislijn tot aan het eerste dal.De amplitude van de B-golf wordt gemeten vanaf het dal van de A-golf tot de daaropvolgende positieve piek. De latentie wordt gemeten vanaf het stimulusartefact tot het punt van belang op het spoor, zoals het dal van de A-golf. Het ruwe, gedomineerde ERG-signaal neemt toe naarmate de lichtstimulus toeneemt.Een golf wordt zichtbaar bij ongeveer 0,4 logs scotopische candela seconden per vierkante meter, en het twin-flash paradigma is gebruikt om het gemengde ERG-signaal te scheiden in kegel- en staafresponsen. Eenmaal beheerst, kan deze techniek binnen 30 minuten worden uitgevoerd.

using-electroretinogram-to-assess-function-rodent-retina-protective

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

This video demonstrates the preparation of a rat model to study retinal health and visual pathway integrity. Visual evoked potential and electroretinography reference and active electrodes are connected to the rat, followed by aligning the platform with the rat in front of the Ganzfeld bowl for even retinal illumination and closing the Faraday cage to avoid external interference.

Preparing a Rat Model to Assess Visual Pathway Integrity Using an Electrophysiology Setup

Source: Brandli, A. Remote Limb Ischemic Preconditioning: A Neuroprotective Technique in Rodents. J. Vis. Exp. (2015)This video demonstrates a non-invasive limb ischemic preconditioning protocol in rats to induce systemic neuroprotection. The procedure involves controlled arterial occlusion and reperfusion, triggering cellular stress pathways that release protective factors. These factors enhance resistance to ischemic and metabolic injuries in distant organs such as the brain and retina.

Non-Invasive Limb Ischemic Preconditioning in a Rat Model for Neuroprotection

Het knaagdier netvlies is lang erkend als een toegankelijke venster naar de hersenen. In dit technisch document bieden we een protocol dat het muismodel van zuurstof geïnduceerde retinopathie van de mechanismen die leiden tot het falen van vasculaire regeneratie binnen het centrale zenuwstelsel na ischemische schade te bestuderen in dienst heeft. Het beschreven systeem kan ook worden ingezet om strategieën te ontwikkelen om hergroei van functionele bloedvaten te bevorderen binnen het netvlies...

Beoordeling van de Vasculaire Regeneratie in het CZS met de muis Retina

Remote ischemische preconditionering (RIP) is een werkwijze voor het conditioneren weefsels tegen schadelijke stress. We hebben een methode van remote ischemie vastgesteld op de achterste ledematen, door het opblazen van een bloeddrukmeter manchet voor 5-10 min. De neurobeschermende capaciteiten van RIP zijn aangetoond in een model van retinale degeneratie in knaagdieren.

Remote Limb Ischemische preconditionering: Een Neurobeschermende Technique in Knaagdieren

Ex vivo ERG kan worden gebruikt om elektrische activiteit van retinale cellen rechtstreeks op te nemen van geïsoleerde intacte netvliezen van dieren of mensen. We demonstreren hier hoe gebruikelijke in vivo ERG-systemen kunnen worden aangepast voor ex vivo ERG-opnamen om de elektrische activiteit van retinale cellen te ontleden.

Simultaan<em&gt; Ex vivo</em&gt; Functioneel testen van Two netvliezen door<em&gt; In vivo</em&gt; Elektroretinogram System

Dit protocol beschrijft gelijktijdige meting van elektroretinogram en visueel geëvokte potentialen bij geanesthetiseerde ratten.

Gelijktijdig opnemen van Electroretinografie en Visual evoked potentials in verdoofde ratten

We tonen chirurgische implantatie en recording procedures visuele elektrofysiologische signalen van het oog (electroretinogram) en hersenen (visuele evoked potential) in ratten bij bewustzijn, dat meer analoog is aan de menselijke aandoening waarbij opnamen zonder verdoving uitgevoerd worden verwart meten.

Implantatie en Registratie van Wireless electroretinogram en Visual opgewekte potentiele in Conscious Rats

Hier presenteren we een methode voor het opnemen van licht-opgeroepen elektrische reacties van het retinale pigment epitheel (RPE) in muizen met behulp van een techniek bekend als DC-ERGs voor het eerst beschreven door Marmorstein, Peachey, en collega's in de vroege jaren 2000.

Direct-Coupled Electroretinogram (DC-ERG) voor het opnemen van de licht-opgeroepen elektrische reacties van de Muis Retinal Pigment Epithelium

Hier beschrijven we een muismodel van retinale ischemie door voorbijgaande bilaterale gemeenschappelijke halsslagader occlusie met behulp van eenvoudige hechtingen en een klem. Dit model kan nuttig zijn voor het begrijpen van de pathologische mechanismen van retinale ischemie veroorzaakt door cardiovasculaire afwijkingen.

Een Murine-model van ischemisch netvliesletsel veroorzaakt door voorbijgaande bilaterale gemeenschappelijke halsslagader Occlusie

Modificatie van bestaande multi-elektrode array of patch clamp apparatuur maakt het ex vivo elektroretinogram breder toegankelijk. Verbeterde methoden om ex vivo lichtresponsen te registreren en te onderhouden vergemakkelijken de studie van fotoreceptor en ON-bipolaire celfunctie in het gezonde netvlies, diermodellen van oogziekten en menselijke donorvliezen.

Optimalisatie van de instellingen en voorwaarden voor ex vivo elektroretinogram om de retinafunctie in kleine en grote ogen te bestuderen

Dit protocol modelleert retinale ischemie-reperfusieschade in een muizenoog door retinale ischemie te induceren via canulatie van de voorste kamer en intraoculaire drukverhoging, gevolgd door intraoculaire druknormalisatie om de reperfusie te starten.

Inductie van retinale ischemie-reperfusieschade in een muisoogmodel

Leer hoe je het electroretinogram gebruikt om retinale functie te beoordelen bij ratten en de beschermende effecten van remote ischemische preconditionering op het netvlies te onderzoeken.

Met behulp van de electroretinogram om Function beoordelen in het knaagdier Retina en de beschermende effecten van Remote Limb Ischemische preconditionering (Video) | JoVE Journal

Met behulp van de electroretinogram om Function beoordelen in het knaagdier Retina en de beschermende effecten van Remote Limb Ischemische preconditionering

Meer video's verkennen