Creatie van twee sacculaire elastase-verteerde aneurysmata met verschillende hemodynamiek in één konijn

Ons protocol beschrijft een reproduceerbare techniek om een konijnenaneurysmamodel te maken met zowel stomp- als bifurcatiehemodynamiek en gedegenereerde wandconditie bij één dier en tijdens een enkele chirurgische aanpak met lage morbiditeits- en sterftecijfers en hoge doorgankelijkheidspercentages. Het model maakt een directe vergelijking mogelijk van het natuurlijke verloop van sacculaire aneurysma's met betrekking tot de rol van hemodynamiek, evenals het testen van endovasculaire apparaten in twee verschillende aneurysmaconfiguratie en stromingsconditie. Het belangrijkste nadeel van deze methode blijft hetzelfde als voor de creatie van het klassieke bifurcatie- en stompaneurysmamodel, de behoefte aan geavanceerde laboratoriumapparatuur en specifieke microchirurgische vaardigheden.

Gebruik een scalpel om een mediane huidincisie te maken van het tongbeen tot 1,5 centimeter caudaal naar het manubrium sterni. Bereid het onderhuidse en vetweefsel voor van de mediale incisie tijdens het uitvoeren van een zorgvuldige hemostase. Bevrijd de sternocephalicus-spier van het aanhangende bindweefsel en breng lidocaïne topisch aan om myoclonus te voorkomen.

Leg de rechter gemeenschappelijke halsslagader, of CCA, mediaal van de sternocephalicus spier bloot en houd deze nat met natte swabs. Bereid de laterale en proximale delen van de sternocephalicus-spier voor en trek deze mediaal in met een vaatlus om de CCA bloot te leggen. Identificeer de externe halsader en bescherm deze met een nat microdoekje.

Ontleed het bindweefsel zorgvuldig langs de CCA tot de bifurcatie van de brachiocephalische romp om de slagader bloot te leggen. Als er kleine takken uit de slagader komen, stolt u ze met de cauterizer. Breng twee tijdelijke clips aan, waarvan de eerste aan de oorsprong van het WVV en de tweede twee centimeter distale ervan.

Plaats een rubberen pad onder het vat en spoel af met papaverinehydrochloride voor vaatverwijding. Verwijder de adventitia voorzichtig met behulp van microscissors. Voer een arteriotomie uit onder de distale clip met een 22-gauge vierkatheter en breng de katheter caudaal in op de proximale clip.

Spoel het segment intraluminaal met gehepariniseerd natriumchloride totdat er geen bloed zichtbaar is. Bevestig vervolgens de katheter met een ligatuur van 4-0. Injecteer via de katheter 0,1 tot 0,2 milliliter elastase in het slagadersegment en incubeer gedurende 20 minuten.

Na 20 minuten incubatietijd met elastase, reinigt u de elastase-oplossing en vervangt u de spuit om het slagadersegment ongeveer 10 keer te spoelen met 0,9% zoutoplossing. Breng twee ligaturen aan, waarbij de eerste op vijf millimeter distal van de proximale clip en de tweede net proximaal onder de arteriotomie. Snijd het vat op ongeveer drie millimeter boven de eerste ligatuur en nog een keer tussen de tweede ligatuur en de distale clip.

Bewaar dit autologe transplantaat in een gehepariniseerde oplossing tot het ontstaan van het bifurcatie-aneurysma. Open voorzichtig de eerste proximale clip en meet het aneurysma. Om een bifurcatie-aneurysma te creëren, verwijdert u de adventitia voorzichtig en maakt u ongeveer een longitudinale incisie van twee millimeter lateraal in de stomp van de rechter CCA.

Breng twee tijdelijke clips aan op de linker CCA om het segment van ongeveer een centimeter af te bakenen en verwijder de adventitia ertussen. Voer een arteriotomie uit met een naald van 23 gauge. Spoel vervolgens het segment met gehepariniseerd natriumchloride.

Vergroot de arteriotomie met behulp van microscissors tot ongeveer vier tot vijf millimeter om het hechten van de juiste CCA en het aneurysmazakje mogelijk te maken. Om de anastomose uit te voeren, hecht u de proximale achterwand van de rechter halsslagader stomp met vijf hechtingen, te beginnen bij de proximale rand van de arteriotomie aan de linker CCA. Hecht vervolgens de achterkant van het aneurysmazakje met vier tot vijf hechtingen, te beginnen bij de distale rand van de arteriotomie aan de linker CCA.

Ga verder met de distale achterkant ter hoogte van de incisie van de vismond om te hechten met de verticale achterkant van het aneurysmatransplantaat met drie hechtingen. Hecht de voorkant van de vismondincisie met drie hechtingen, beginnend naar boven en naar beneden bewegend. Werk af met de voorste hechting tussen de linker CCA en de voorkant van het aneurysmatransplantaat en de rechter CCA met ongeveer zes hechtingen.

Voordat u de anastomose voltooit, spoelt u de bloedvaten met gehepariniseerde 0,9% zoutoplossing intraluminaal. Verwijder de clip aan de rechterkant van CCA terwijl u wat druk uitoefent op de anastomose met de micro swabs voor hemostase. Ga vervolgens verder door de distale clip uit de linker CCA te verwijderen.

Als er geen ernstige bloeding is, ga dan verder met het verwijderen van de proximale clip op de linker CCA om de bloedstroom mogelijk te maken. Bij follow-up werd aneurysma-doorgankelijkheid bevestigd door magnetische resonantie-angiografie. Een driedimensionale TOF-sequentie verkregen met een MRI van drie tesla gericht op de nekslagaders wordt getoond.

Het stompaneurysma wordt waargenomen op de rechter subclaviaslagader en het bifurcatie-aneurysma wordt waargenomen op de bifurcatie die wordt gecreëerd door anastomosering van de rechter CCA op de linker subclaviaslagader. Aneurysma doorgankelijkheid werd ook bevestigd door macroscopische inspectie na weefselextractie. Grote groeven op de clip geven één millimeter aan en kleine groeven geven 0,5 millimeter aan.

Microscopische analyse van de stomp en bifurcatie-aneurysmata werd uitgevoerd na kleuring van de monsters met hematoxyline-eosine. Twee stappen zijn van cruciaal belang tijdens de operatie, ten eerste, de blootstelling en dissectie van de rechter halsslagader tot brachiocephalische romp, en ten tweede, de bescherming van vitale structuren zoals luchtpijp, halsader en larynxzenuw.