Wprowadzenie do pipet serologicznych i pipetowników

Pipeta serologiczna to niemal wszechobecny instrument laboratoryjny służący do przenoszenia mililitrowych objętości cieczy. Pipety serologiczne zazwyczaj posiadają skalę wzdłuż ścianek, która umożliwia pomiar ilości aspirowanej lub dozowanej cieczy.

Instrumenty te najczęściej stosuje się z dozownikiem do pipet, który ułatwia przenoszenie cieczy poprzez wytworzenie częściowej próżni. Ten sam dozownik można wykorzystać z pipetami serologicznymi o różnych rozmiarach, w zależności od objętości, którą chcemy przenieść.

Pipety serologiczne są zazwyczaj albo plastikowe, sterylne i jednorazowe, albo szklane, sterylizowalne i wielorazowe.

Wszystkie pipety serologiczne wymagają zastosowania dozownika do pipet w celu przenoszenia cieczy.

Dozownik do pipet eliminuje konieczność stosowania przez badacza archaicznej techniki pipetowania ustnego. Ta prymitywna metoda przenoszenia cieczy nie jest zalecana, ponieważ może doprowadzić do przedostania się cieczy do jamy ustnej i wywołać poważne działania niepożądane.

Jeden z rodzajów dozowników, gruszka do pipet, zapewnia najniższą dokładność i jest zazwyczaj używana z szklanymi pipetami serologicznymi do przenoszenia nieokreślonych objętości cieczy.

Pompa do pipet jest również stosowana z pipetami szklanymi i pozwala na bardziej precyzyjną regulację objętości cieczy. Pompy do pipet są szczególnie użyteczne przy dozowaniu powtarzalnych objętości roztworu.

Dopper (pipet-aid) jest najczęściej stosowanym rodzajem dozownika do pipet. Składa się z kilku kluczowych elementów: stożek nosowy to miejsce, w którym mocuje się pipetę, a także miejsce, w którym znajduje się filtr – chroniący wnętrze urządzenia przed cieczą i zapewniający sterylność.

Na uchwycie doppera znajdują się dwa spusty; górny spust służy do aspiracji cieczy, a dolny do jej dozowania.

Doppery są często wyposażone w ustawienia kontrolujące prędkość dozowania cieczy. Na przykład instrument można ustawić na dozowanie cieczy przy użyciu wymuszonego powietrza, w trybie wydmuchiwania (blow-out) lub bez użycia siły, w trybie grawitacyjnym.

Choć niektóre doppery posiadają kable, większość z nich jest zasilana bateryjnie.

Niektóre doppery są wyposażone w stojak mocowany do uchwytu, co pozwala na odłożenie urządzenia na bok bez konieczności wyjmowania pipety.

Jak wspomniano, z tym samym dozownikiem można stosować pipety serologiczne o różnych rozmiarach w zależności od przenoszonej objętości cieczy, od zaledwie jednej dziesiątej mililitra aż do dziesiątek mililitrów.

Najpierw należy wybrać pipetę o rozmiarze odpowiednim dla objętości, którą chcemy przenieść. Następnie otwórz opakowanie od góry i, trzymając pipetę wyłącznie powyżej podziałki, zamocuj ją do dozownika, po czym usuń resztę opakowania.

Następnie, trzymając dozownik w jednej ręce, zdejmij korek z naczynia z cieczą, którą chcesz pobrać. Następnie, utrzymując pipetę w pozycji pionowej, delikatnie naciśnij górny spust, aby powoli zassać próbkę.

Do pomiaru przenoszonej objętości należy używać podziałki znajdującej się wzdłuż boku pipety. Należy pamiętać, że objętość odczytuje się na linii podziałki w dolnej części menisku, a nie na górnej granicy cieczy.

Teraz, uważając, aby nie dotknąć końcówki pipety żadnej niesterylnej powierzchni, ostrożnie dozuj ciecz do wybranego naczynia.

Podczas zasysania cieczy należy stosować delikatny nacisk, szczególnie w przypadku pipet serologicznych o mniejszej objętości, aby uniknąć zanieczyszczenia filtra i próbki lub uszkodzenia asystenta pipetującego (pipet-aid). Brak ostrożności podczas obsługi asystenta pipetującego może wywołać silne niezadowolenie bardziej doświadczonych członków laboratorium, którzy mogliby być zmuszeni do demontażu i naprawy tego urządzenia. Przy zasysaniu większych objętości oraz podczas dozowania można zastosować mocniejszy nacisk na spust, aby przyspieszyć transfer roztworu.

Na koniec należy pamiętać o prawidłowej utylizacji pipety po zakończeniu przenoszenia cieczy.

Skoro wiesz już, jak obsługiwać pipetę serologiczną, przyjrzyjmy się bliżej niektórym powszechnym zastosowaniom laboratoryjnym.

Równomierne rozmieszczenie komórek w roztworze jest istotnym krokiem podczas wysiewania lub hodowli komórkowej. Pipety serologiczne należy wykorzystywać do delikatnego i skutecznego mieszania zawiesin komórkowych, a także do mieszania roztworów chemicznych i odczynników.

Po izolacji lub traktowaniu eksperymentalnych hodowli komórkowych pipety serologiczne mogą być przydatne do przenoszenia całych kolonii komórek w celu ich namnożenia lub dalszej analizy eksperymentalnej.

Innym powszechnym zastosowaniem pipet serologicznych jest ostrożne nakładanie warstw odczynników w celu stworzenia gradientów gęstości, takich jak gradient Ficoll, który jest wykorzystywany do oczyszczania komórek z osocza krwi.

Właśnie obejrzeli Państwo wprowadzenie JoVE do pipet serologicznych.

W tym filmie omówiliśmy: czym jest pipeta serologiczna i kiedy się ją stosuje, w jaki sposób automatyczny kontroler pipet pomaga w aspiracji i dozowaniu mililitrowych objętości cieczy oraz różne zastosowania pipety serologicznej. Dziękujemy za oglądanie i prosimy pamiętać o niebezpieczeństwach związanych z pipetowaniem ustnym!