Name: Metylacja C w fazie stałej 11, oczyszczanie i formulacja do produkcji znaczników PET (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-10-24T14:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 25 s
Description: Poznaj efektywną technikę radiomarkowania węglem-11 z użyciem kartridży ekstrakcji na fazie stałej do produkcji znaczników PET. Metoda skraca czas syntezy, eliminuje potrzebę stosowania HPLC i ułatwia zgodność z GMP.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie było częściowo wspierane przez grant 18-05 od Alzheimer's Society of Canada (dla A. K.) i Brain Canada Foundation przy wsparciu Health Canada. Autorzy pragną podziękować Wydziałowi Medycyny Uniwersytetu McGill, Instytutowi Neurologicznemu w Montrealu i Centrum Obrazowania Mózgu McConnell za wsparcie tych prac. Dziękujemy również Pani Monice Lacatus-Samoila za pomoc w procedurach kontroli jakości oraz doktorom Jean-Paulowi Soucy i Gassanowi Massarwehowi za dostęp do radioizotopów i zakładu radiochemicznego.

1. Przygotowanie i eluentów
<ol>
	<li>Rozpuścić 2,72 g trójwodnego octanu sodu w 100 ml wody, aby przygotować 0,2 M roztwór octanu sodu (roztwór A).</li>
	<li>Rozpuścić 11,4 ml lodowatego kwasu octowego w 1 l wody, aby przygotować 0,2 M roztwór kwasu octowego (roztwór B).</li>
	<li>Połączyć 50 ml roztworu A z 450 ml roztworu B, aby przygotować bufor octanowy o pH 3,7 (bufor 1) zgodnie z centrum odniesienia buforu15. Sprawdź pH buforu za pomocą pasków pH lub pH-metru.</li>
	<li>Połączyć 12,5 ml absolutnego etanolu z 87,5 ml buforu 1, aby uzyskać 12,5% wodny roztwór EtOH (przepłukać 1) w butelce o pojemności 100 ml.</li>
	<li>Połączyć 15 ml bezwzględnego etanolu z 85 ml buforu 1, aby uzyskać 15% wodny roztwór EtOH (płukanie 2) w butelce o pojemności 100 ml.</li>
	<li>Połączyć 5 ml absolutnego etanolu z 5 ml buforu 1, aby uzyskać 50% wodny roztwór EtOH (końcowy eluent) i pobrać 2,5 ml tego roztworu do strzykawki o pojemności 10 ml.</li>
</ol>
2. Zastosowanie prekursora do kartridża
<ol>
	<li>Przepuść 10 ml wody, a następnie 5 ml acetonu przez wkład tC18, aby go wstępnie kondycjonować.</li>
	<li>Osuszyć wkład strumieniem azotu o stężeniu 50 ml/min przez 1 min.</li>
	<li>Rozpuścić 2 mg prekursora 6-OH-BTA-0 w 1 ml bezwodnego acetonu.</li>
	<li>Trzymając precyzyjną szklaną strzykawkę Luer-tip o pojemności 250 μl skierowaną w dół, pobrać 100 μl roztworu prekursora i 50 μl poduszki powietrznej na wierzch płynu. Wyjąć igłę i nałożyć roztwór prekursora na wkład tC18 od strony żeńskiej, powoli wciskając tłok do samego dołu. Nie naciskaj na rozwiązanie dalej!</li>
</ol>
3. Ustawianie rozmaitości do automatycznej syntezy
<ol>
	<li>Zamocuj standardowy 5-portowy jednorazowy kolektor na module syntezy i zmontuj go zgodnie z <silna klasa="xfig">Rysunek 2 i kroki 3.2 - 3.5 poniżej. 
	UWAGA: Zalecamy stosowanie kolektorów odpornych na aceton (patrz Tabela materiałów).</li>
	<li>Port 1 ma dwie pozycje. Podłączyć wlot poziomy do automatycznego dozownika wyposażonego w strzykawkę o pojemności 20 ml. Podłącz pionowy wlot do butelki z myciem 1.</li>
	<li>Podłącz wyjście modułu, który wytwarza [11C]CH3OTf do portu 2 kolektora.</li>
	<li>Zainstaluj kartridż tC18 załadowany prekursorem 6-OH-BTA-0 między portami 3 i 4.</li>
	<li>Port 5 ma dwie pozycje. Podłącz poziomy wylot do butelki na odpady, która musi pomieścić co najmniej 200 ml. Podłącz pionowy wylot do sterylnej fiolki w celu pobrania znacznika przez sterylny filtr.</li>
</ol>
4. Radiosynteza [11C]PiB
UWAGA: Wszystkie manipulacje związane z izotopami radioaktywnymi muszą być wykonywane w osłoniętej ołowiem gorącej komórce przez personel odpowiednio przeszkolony do pracy z materiałami radioaktywnymi. 
UWAGA: Protokół ten nie obejmuje szczegółów produkcji [11C]CO2 w cyklotronie i jego konwersji do [11C]CH3OTf przy użyciu modułu radiochemicznego. Procedury te będą zależały od indywidualnego wyposażenia pracowni radiochemicznej i nie wchodzą w zakres niniejszego protokołu. Nasze centrum PET jest wyposażone w cyklotron IBA, który wytwarza węgiel-11 w postaci chemicznej [11C]CO2 w reakcji jądrowej 14N(p,α)11C z mieszaniną gazów N2/O2 (99,5:0,5) w tarczy gazowej, oraz dostępny na rynku moduł do produkcji [11C]CH3I metodą "suchą" (redukcja katalityczna do [11C]CH4 , po której następuje jodowanie rodnikowe). [11kategorii]CH3OTf jest wytwarzany przez przepuszczenie [11C]CH3I przez srebrną kolumnę triflatową podgrzaną do 175 °C przy 20 ml/min.
<ol>
	<li>Dostarczyć [11C]CH3OTf do kolektora przez port 2 i przepuścić go przez załadowany wkład tC18 przy przepływie wyjściowym 20 mL/min regulowanym przez moduł [11C]CH3OTf, przez porty 3 i 4 oraz do butelki na odpady, jak pokazano na <silna klasa="xfig">Rysunek 2A.</li>
	<li>Gdy cała radioaktywność zostanie przeniesiona i uwięziona na kartridżu tC18, zgodnie z monitorem detektora radioaktywności za uchwytem naboju, zatrzymaj przepływ gazu, zamykając port 2. Pozostaw wkład na 2 minuty, aby zakończyć reakcję.</li>
	<li>Pobrać 19 ml roztworu do płukania 1 (patrz krok 1.4) z butelki o pojemności 100 ml do strzykawki dozującej przez port 1 przy 100 ml / min, jak pokazano na <silna klasa = "xfig" > Rysunek 2B.</li>
	<li>Dozować 18,5 ml roztworu do płukania 1 z dozownika przez wkład tC18 przez porty 3 i 4 i do butelki na odpady z prędkością 50 ml / min, jak pokazano na <silna klasa = "xfig" > Rysunek 2C. Upewnij się, że w kolektorze nie ma pęcherzyków powietrza, ponieważ mogą one zmniejszyć skuteczność separacji.</li>
	<li>Powtórzyć kroki 4.3 i 4.4 cztery razy, za każdym razem pobierając i dozując 18,5 ml roztworu do przemywania 1. Całkowita objętość roztworu do przemywania 1 przepuszczonego przez tC18 wynosi 92,5 ml; jednak może się różnić w zakresie 90 - 100 ml w zależności od konkretnego użytego modułu syntezy.</li>
	<li>Przełącz linię wejściową na porcie 1 z roztworu mycia 1 na roztwór do prania 2 (patrz krok 1.5).</li>
	<li>Powtórzyć kroki 4.3 i 4.4 trzy razy, pobierając i dozując za każdym razem 18,5 ml roztworu do płukania 2. Całkowita objętość roztworu do płukania 2 przepuszczonego przez tC18 wynosi 55,5 ml. Może się jednak wahać w zakresie 50 - 60 ml w zależności od konkretnego użytego modułu syntezy.</li>
	<li>Przełącz zawór 5 w kierunku końcowej fiolki, jak pokazano na <silna klasa="xfig">Rysunek 2D. Odłączyć przewód od dozownika i podłączyć go do strzykawki o pojemności 10 ml zawierającej 2,5 ml końcowego roztworu eluentu (50% wodnego roztworu EtOH, patrz krok 1.6) i 7,5 ml powietrza.</li>
	<li>Trzymając strzykawkę w dół, ręcznie przepchnąć końcowy roztwór eluentu (2,5 ml), a następnie powietrze (7,5 ml) przez wkład tC18 przez porty 3 i 4 i do sterylnej fiolki w celu pobrania znacznika przez sterylny filtr, jak pokazano na Rysunek 2D.</li>
	<li>Odłączyć pustą strzykawkę, podłączyć strzykawkę o pojemności 10 ml zawierającą 10 ml sterylnego buforu fosforanowego (receptura nie jest dołączona, ponieważ może się różnić) i przecisnąć całą objętość przez wkład tC18 do sterylnej fiolki, jak opisano powyżej (<silna klasa = "xfig">Rysunek 2D). Odłączyć strzykawkę i przepłukać przewód 10 ml powietrza za pomocą tej samej strzykawki.</li>
	<li>Pobrać 0,7 ml końcowego preparatu znacznikowego i pobrać próbki do procedur kontroli jakości (0,1 ml), testu endotoksyn bakteryjnych (0,1 ml) i sterylności (0,5 ml).</li>
</ol>
5. Procedury kontroli jakości
UWAGA: Każda partia radioznacznika musi zostać poddana odpowiednim procedurom kontroli jakości (QC) przed wydaniem do miejsca obrazowania PET w celu podania ludziom lub zwierzętom. Autorzy tego manuskryptu nie ponoszą odpowiedzialności za zgodność radioznacznika produkowanego w innych ośrodkach z lokalnymi przepisami władz sanitarnych.
<ol>
	<li>Przeprowadzić procedury kontroli jakości przed uwolnieniem, które muszą obejmować badania tożsamości radiochemicznej (RCI), czystości radiochemicznej (RCP), czystości chemicznej i aktywności molowej znacznika, a także pozostałej zawartości rozpuszczalnika i pH preparatu.</li>
	<li>Oznaczyć RCI, RCP, czystość chemiczną i aktywność molową za pomocą analitycznego systemu HPLC wyposażonego w detektory UV (monitorowanie przy 350 nm) i radioaktywności oraz kolumnę z odwróconymi fazami. Określić czasy retencji 6-OH-BTA-0 i 6-OH-BTA-1 i skalibrować przyrząd w celu ilościowego określenia zawartości każdego związku.</li>
	<li>Oznaczyć zawartość pozostałości rozpuszczalnika za pomocą analitycznego systemu chromatografii gazowej wyposażonego w kolumnę kapilarną. Określić czasy retencji acetonu i etanolu oraz skalibrować przyrząd w celu ilościowego określenia zawartości każdego rozpuszczalnika.</li>
	<li>Wykonaj test endotoksyn bakteryjnych za pomocą czytnika wkładów wyposażonego w odpowiednie wkłady.</li>
	<li>Przeprowadzić analizę sterylności próbki co najmniej 14 dni po syntezie, aby upewnić się, że nie ma wzrostu bakterii lub wysłać próbkę sterylności do laboratorium akredytowanego przez lokalny organ ds. zdrowia.</li>
</ol>

<ol><li>Langstrom, B., Lundqvist, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+preparation+of+11C-methyl+iodide+and+its+use+in+the+synthesis+of+11C-methyl-L-methionine%5BTitle%5D)+AND+%22The+International+journal+of+applied+radiation+and+isotopes%22%5BJournal%5D)">The preparation of 11C-methyl iodide and its use in the synthesis of 11C-methyl-L-methionine.</a> The International journal of applied radiation and isotopes. 27 (7), 357-363 (1976).</li>
<li>Larsen, P., Ulin, J., Dahlstrøm, K., Jensen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+of+%5B11C%5Diodomethane+by+iodination+of+%5B11C%5Dmethane%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+radiation+and+isotopes%22%5BJournal%5D)">Synthesis of [11C]iodomethane by iodination of [11C]methane.</a> Applied radiation and isotopes. 48 (2), 153-157 (1997).</li>
<li>Jewett, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+synthesis+of+%5B11C%5Dmethyl+triflate%5BTitle%5D)+AND+%22International+journal+of+radiation+applications+and+instrumentation.+Part+A%2C+Applied+radiation+and+isotopes%22%5BJournal%5D)">A simple synthesis of [11C]methyl triflate.</a> International journal of radiation applications and instrumentation. Part A, Applied radiation and isotopes. 43 (11), 1383-1385 (1992).</li>
<li>Wilson, A. A., Garcia, A., Houle, S., Vasdev, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utility+of+commercial+radiosynthetic+modules+in+captive+solvent+%5B11C%5D-methylation+reactions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Labelled+Compounds+and+Radiopharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">Utility of commercial radiosynthetic modules in captive solvent [11C]-methylation reactions.</a> Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals. 52 (11), 490-492 (2009).</li>
<li>Wilson, A. A., Garcia, A., Jin, L., Houle, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiotracer+synthesis+from+%5B%2811%29C%5D-iodomethane%3A+a+remarkably+simple+captive+solvent+method%5BTitle%5D)+AND+%22Nuclear+medicine+and+biology%22%5BJournal%5D)">Radiotracer synthesis from [(11)C]-iodomethane: a remarkably simple captive solvent method.</a> Nuclear medicine and biology. 27 (6), 529-532 (2000).</li>
<li>Fedorova, O. S., Vaitekhovich, F. P., Krasikova, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+Synthesis+of+%5B18F%5DFluoromethylcholine+for+Positron-Emission+Tomography+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutical+Chemistry+Journal%22%5BJournal%5D)">Automated Synthesis of [18F]Fluoromethylcholine for Positron-Emission Tomography Imaging.</a> Pharmaceutical Chemistry Journal. 52 (8), 730-734 (2018).</li>
<li>Jewett, D. M., Ehrenkaufer, R. L., Ram, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+captive+solvent+method+for+rapid+radiosynthesis%3A+application+to+the+synthesis+of+%5B1-%2811%29C%5Dpalmitic+acid%5BTitle%5D)+AND+%22The+International+journal+of+applied+radiation+and+isotopes%22%5BJournal%5D)">A captive solvent method for rapid radiosynthesis: application to the synthesis of [1-(11)C]palmitic acid.</a> The International journal of applied radiation and isotopes. 36 (8), 672-674 (1985).</li>
<li>Watkins, G. L., Jewett, D. M., Mulholland, G. K., Kilbourn, M. R., Toorongian, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+captive+solvent+method+for+rapid+N-%5B11C%5Dmethylation+of+secondary+amides%3A+application+to+the+benzodiazepine%2C+4%27-chlorodiazepam+%28RO5-4864%29%5BTitle%5D)+AND+%22International+journal+of+radiation+applications+and+instrumentation.+Part+A%2C+Applied+radiation+and+isotopes%22%5BJournal%5D)">A captive solvent method for rapid N-[11C]methylation of secondary amides: application to the benzodiazepine, 4'-chlorodiazepam (RO5-4864).</a> International journal of radiation applications and instrumentation. Part A, Applied radiation and isotopes. 39 (5), 441-444 (1988).</li>
<li>Hockley, B. G., Henderson, B., Shao, X. Chapter 27, Synthesis of {11C]Raclopride. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHockley%2C+BG+%22Radiochemical+Syntheses%22">Radiochemical Syntheses</a>. , John Wiley & Sons. 167-175 (2012).</li>
<li>Lodi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reliability+and+reproducibility+of+N-%5B11C%5Dmethyl-choline+and+L-%28S-methyl-%5B11C%5D%29methionine+solid-phase+synthesis%3A+a+useful+and+suitable+method+in+clinical+practice%5BTitle%5D)+AND+%22Nuclear+Medicine+Communications%22%5BJournal%5D)">Reliability and reproducibility of N-[11C]methyl-choline and L-(S-methyl-[11C])methionine solid-phase synthesis: a useful and suitable method in clinical practice.</a> Nuclear Medicine Communications. 29 (8), 736-740 (2008).</li>
<li>Jolly, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+%22%5B%2811%29C%5Dkits%22+for+a+fast%2C+efficient+and+reliable+production+of+carbon-11+labeled+radiopharmaceuticals+for+Positron+Emission+Tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+radiation+and+isotopes%22%5BJournal%5D)">Development of "[(11)C]kits" for a fast, efficient and reliable production of carbon-11 labeled radiopharmaceuticals for Positron Emission Tomography.</a> Applied radiation and isotopes. 121, 76-81 (2017).</li>
<li>Boudjemeline, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+efficient+solid+phase+supported+radiosynthesis+of+%5B%2811%29+C%5DPiB+using+tC18+cartridge+as+a+%223-in-1%22+production+entity%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Labelled+Compounds+and+Radiopharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">Highly efficient solid phase supported radiosynthesis of [(11) C]PiB using tC18 cartridge as a "3-in-1" production entity.</a> Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals. 60 (14), 632-638 (2017).</li>
<li>Mathis, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+lipophilic+thioflavin-T+derivative+for+positron+emission+tomography+%28PET%29+imaging+of+amyloid+in+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Bioorganic+and+medicinal+chemistry+letters%22%5BJournal%5D)">A lipophilic thioflavin-T derivative for positron emission tomography (PET) imaging of amyloid in brain.</a> Bioorganic and medicinal chemistry letters. 12 (3), 295-298 (2002).</li>
<li>Mathis, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+and+evaluation+of+11C-labeled+6-substituted+2-arylbenzothiazoles+as+amyloid+imaging+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+medicinal+chemistry%22%5BJournal%5D)">Synthesis and evaluation of 11C-labeled 6-substituted 2-arylbenzothiazoles as amyloid imaging agents.</a> Journal of medicinal chemistry. 46 (13), 2740-2754 (2003).</li>
<li>Buffer Reference Center. , Sigma Aldrich. Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.sigmaaldrich.com/life-science/core-bioreagents/biological-buffers/learning-center/buffer-reference-center.html">https://www.sigmaaldrich.com/life-science/core-bioreagents/biological-buffers/learning-center/buffer-reference-center.html</a> (2019).</li>
<li>Philippe, C., Mitterhauser, M., Wadsak, W. Chapter 18, Synthesis of 2-(4-N-[11C]Methylaminophenyl)-6-Hydroxybenzothiazole ([11C]6-OH-BTA-1; [11C]PIB). <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPhilippe%2C+C+%22Radiochemical+Syntheses%22">Radiochemical Syntheses</a>. , John Wiley & Sons. 177-189 (2012).</li>
<li>Shao, X., Fawaz, M. V., Jang, K., Scott, P. J. H. Synthesis and Applications of [11C]Hydrogen Cyanide. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aShao%2C+X+%22Radiochemical+Syntheses%22">Radiochemical Syntheses</a>. , John Wiley & Sons. 207-232 (2015).</li>
<li>Ametamey, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiosynthesis+and+preclinical+evaluation+of+11C-ABP688+as+a+probe+for+imaging+the+metabotropic+glutamate+receptor+subtype+5%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">Radiosynthesis and preclinical evaluation of 11C-ABP688 as a probe for imaging the metabotropic glutamate receptor subtype 5.</a> Journal of Nuclear Medicine. 47 (4), 698-705 (2006).</li>
<li>Ametamey, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+PET+studies+of+metabotropic+glutamate+receptor+subtype+5+with+11C-ABP688%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">Human PET studies of metabotropic glutamate receptor subtype 5 with 11C-ABP688.</a> Journal of Nuclear Medicine. 48 (2), 247-252 (2007).</li>
</ol>

Autorzy oświadczają, że nie mają konkurencyjnych interesów finansowych.

Pomimo niedawnego pojawienia się i zatwierdzenia przez FDA kilku znaczników PET znakowanych 18znakami F, takich jak florbetapir, florbetaben i flutemetamol, [11C] PiB pozostaje złotym standardem znacznika do obrazowania amyloidu ze względu na szybki wychwyt przez mózg i niskie niespecyficzne wiązanie. Obecnie znacznik ten jest syntetyzowany za pomocą mokrej chemii16 lub przy użyciu podejścia "suchej pętli" 4,17</su...

Pozytonowa tomografia emisyjna (PET) to metoda obrazowania molekularnego, która polega na wykrywaniu rozpadu radioaktywnego izotopu przyłączonego do biologicznie aktywnej cząsteczki, aby umożliwić wizualizację in vivo procesów biochemicznych, sygnałów i przemian. Węgiel-11 (t1/2 = 20,3 min) jest jednym z najczęściej stosowanych izotopów promieniotwórczych w PET ze względu na jego obfitość w cząsteczkach organicznych i krótki okres półtrwania, co pozwala na wielokrotne podawanie znacznika tego samego dnia temu samemu człowiekowi lub zwierzęciu i zmniejsza obciążenie radiologiczne pacjentów. Wiele znaczników znakowanych tym izotopem jest wykorzystywanych w badaniach klinicznych i podstawowych badaniach zdrowotnych do obrazowania in vivo PET klasycznych i pojawiających się biologicznie istotnych celów - [11C]raklopryd dla receptorów D2 / D3, [11C] PiB dla blaszek amyloidowych, [11C] PBR28 dla białka translokatora - by wymienić tylko kilka.
Znaczniki PET znakowane węglem-11 są głównie wytwarzane przez 11C-metylację nieradioaktywnych prekursorów zawierających grupy -OH (alkohol, fenol i kwas karboksylowy), -NH (amina i amid) lub -SH (tiol). Krótko mówiąc, izotop jest wytwarzany w tarczy gazowej cyklotronu w wyniku reakcji jądrowej 14N(p,α)11Cw postaci chemicznej [11C]CO2 . Ten ostatni jest następnie przekształcany w [11C] jodek metylu ([11C]CH3I) za pomocą mokrej chemii (redukcja do [11C]CH3OH za pomocą LiAlH4, a następnie hartowanie za pomocą HI)1 lub suchej chemii (redukcja katalityczna do [11C]CH4, po której następuje jodowanie rodnikowe z molekularnym I2)2. [11kategorii]CH3I można następnie przekształcić w bardziej reaktywny triflat 11C-metylu ([11C]CH3OTf), przepuszczając go przez kolumnę triflatu srebra3. Metylacja 11C jest następnie przeprowadzana przez bulgotanie radioaktywnego gazu do roztworu nieradioaktywnego prekursora w rozpuszczalniku organicznym lub za pomocą bardziej eleganckiej metody "pętli" rozpuszczalnika w niewoli4,5. 11C-tracer jest następnie oczyszczany za pomocą HPLC, przeformułowywany w biokompatybilnym rozpuszczalniku i przepuszczany przez sterylny filtr przed podaniem ludziom. Wszystkie te manipulacje muszą być szybkie i niezawodne, biorąc pod uwagę krótki okres połowicznego rozpadu węgla-11. Jednak zastosowanie systemu HPLC znacznie zwiększa straty znacznika i czas produkcji, często wymaga użycia toksycznych rozpuszczalników, komplikuje automatyzację i czasami prowadzi do nieudanych syntez. Ponadto wymagane czyszczenie reaktorów i kolumny HPLC wydłuża opóźnienia między syntezami kolejnych partii znaczników i zwiększa narażenie personelu na promieniowanie.
Radiochemia fluoru-18 (t1/2 = 109,7 min), innego powszechnie stosowanego izotopu PET, została ostatnio rozwinięta dzięki rozwojowi zestawów opartych na kasetach, które eliminują potrzebę oczyszczania metodą HPLC. Dzięki zastosowaniu wkładów do ekstrakcji do fazy stałej (SPE), te w pełni jednorazowe zestawy pozwalają na niezawodną rutynową produkcję 18znaczników F, w tym [18F]FDG, [18F]FMISO, [18F]FMC i innych, przy krótszym czasie syntezy, zmniejszonym zaangażowaniu personelu i minimalnej konserwacji sprzętu. Jednym z powodów, dla których węgiel-11 pozostaje mniej popularnym izotopem w obrazowaniu PET, jest brak podobnych zestawów do rutynowej produkcji 11znaczników C. Ich opracowanie znacznie poprawiłoby niezawodność syntezy, zwiększyłoby wydajność radiochemiczną oraz uprości automatyzację i konserwację prewencyjną modułów produkcyjnych.
Obecnie dostępne zestawy produkcyjne wykorzystują niedrogie, jednorazowe kartridże SPE zamiast kolumn HPLC do oddzielania radioznacznika od nieprzereagowanego radioaktywnego izotopu, prekursora i innych radioaktywnych i nieradioaktywnych produktów ubocznych. Idealnie byłoby, gdyby reakcja znakowania radioaktywnego przebiegała również na tym samym kartridżu; na przykład [18F]fluorometylacja dimetyloaminoetanolu gazowym [18F]CH2BrF w produkcji znacznika PET do obrazowania raka prostaty [18F]fluorometylocholina zachodzi na kartridżu z żywicą kationowymienną<klasa sup="xref">6. Chociaż podobne procedury znakowania radioaktywnego kilku 11znaczników C na wkładach zostały zgłoszone7,8 i stały się szczególnie skuteczne dla radiosyntezy [11C]choline9 i [11C]methionine10, te przykłady pozostają ograniczone do onkologicznych znaczników PET, w których oddzielenie od prekursora często nie jest wymagane. Niedawno informowaliśmy o opracowaniu "[11C]zestawów" do produkcji [11C]CH3I11 i późniejszej 11C-metylacji, a także syntezy wspomaganej fazą stałą12 w naszych wysiłkach na rzecz uproszczenia rutynowej produkcji 11C-tracerów. W tym miejscu chcemy zademonstrować nasz postęp na przykładzie radiosyntezy wspomaganej fazą stałą [11C]PiB, radioznacznika do obrazowania Aβ, który zrewolucjonizował dziedzinę obrazowania choroby Alzheimera (AD), gdy został po raz pierwszy opracowany w 2003 roku (Rysunek 1)13,14. W tej metodzie lotny [11C]CH3OTf (bp 100 °C) przepuszcza się przez prekursor 6-OH-BTA-0 osadzony na żywicy jednorazowego wkładu. Znacznik PET [11C]PiB jest następnie oddzielany od prekursora i zanieczyszczeń radioaktywnych przez elucję z wkładu z biokompatybilnym wodnym roztworem etanolu. Ponadto zautomatyzowaliśmy tę metodę radiosyntezy [11C]PiB za pomocą zdalnie sterowanego modułu syntezy radiochemicznej i jednorazowych zestawów kasetowych. W szczególności wdrożyliśmy tę radiosyntezę na 20-zaworowym module radiochemicznym, wyposażonym w napęd strzykawkowy (dozownik), który pasuje do standardowej jednorazowej plastikowej strzykawki o pojemności 20 ml, regulatora przepływu gazu, pompy próżniowej i manometru. Ze względu na prostotę tej metody jesteśmy przekonani, że można ją zmodyfikować do większości dostępnych na rynku syntezatorów automatycznych, zarówno kasetowych, jak i wyposażonych w zawory stacjonarne. Ta technika wspomagana fazą stałą ułatwia produkcję [11C]PiB zgodną z przepisami Dobrej Praktyki Produkcyjnej (GMP) i poprawia niezawodność syntezy. Opisana tu technika zmniejsza również ilość prekursora wymaganego do radiosyntezy, wykorzystuje wyłącznie "zielone" biokompatybilne rozpuszczalniki oraz skraca czas pomiędzy kolejnymi partiami produkcyjnymi.

<table><tbody><tr><td>6-OH-BTA-0</td><td>ABX zaawansowane związki biochemiczne</td><td>5101</td><td>Nieradioaktywny prekursor [11C]PiB</td></tr><tr><td>6-OH-BTA-1</td><td>ABX zaawansowane związki biochemiczne</td><td>5140</td><td>Nieradioaktywny standard [11C]PiB</td></tr><tr><td>System HPLC Agilent 1200</td><td>Agilent</td><td>Agilent 1200</td><td>Analityczny system HPLC</td></tr><tr><td>Etanol absolutny</td><td>Alkohole handlowe</td><td>432526</td><td></td></tr><tr><td>strzykawka Hamilton (końcówka luer, 250 &mikro; L)</td><td>Hamilton</td><td>HAM80701</td><td></td></tr><tr><td>MZ Analytical PerfectSil 120</td><td>MZ-Analysentechik GmbH</td><td>MZ1440-100040</td><td>Analityczna kolumna HPLC</td></tr><tr><td>System Perkin Elmer Clarus 480 GC</td><td>Perkin Elmer</td><td>Clarus 480</td><td>Chromotograf gazowy</td></tr> z <tr><td>poliwęglanu</td><td>Scintomics</td><td>ACC-101</td><td>Kolektor syntezy</td></tr><tr><td>Restek MTX-Wax kolumna (30 m, 0,53 mm)</td><td>Restek</td><td>70625-273</td><td>Analityczna kolumna GC</td></tr><tr><td>Scintomics Moduł GRP</td><td>Scintomics</td><td>Scintomics GRP</td><td>Zautomatyzowana jednostka syntezy</td></tr><tr><td>Sep-Pak tC18 Plus</td><td>Waters</td><td>WAT020515</td><td>Wkład do ekstrakcji do fazy stałej</td></tr><tr><td>kolektor odporny na rozpuszczalniki</td><td>Scintomics</td><td>ACC-201</td><td>Kolektor do syntezy</td></tr><tr><td>Igła do rdzenia kręgowego</td><td>BD</td><td>405181</td><td></td></tr><tr><td>Sterylny </td><td>linia przedłużająca B. Braun</td><td>8255059</td><td></td></tr><tr><td>Sterylny filtr</td><td>Millipore</td><td>SLLG013SL</td><td></td></tr><tr><td>Sterylna fiolka (20 ml)</td><td>Huayi</td><td>SVV-20A</td><td></td></tr><tr><td>Sterylna woda</td><td>Baxter</td><td>JF7623</td><td></td></tr><tr><td>Badania Synthra MeIplus</td><td>Synthra</td><td>MeIplus Research</td><td>[11C]CH3I/[11C]CHModuł 3OTf</td></tr><tr><td>Strzykawka (10 mL)</td><td>BD</td><td>309604</td><td></td></tr><tr><td>Strzykawka (1mL)</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>Strzykawka (20 mL)</td><td>B. Braun</td><td>4617207V</td><td>Dozownik strzykawka</td></tr><tr><td>Filtr odpowietrzający</td><td>Millipore</td><td>TEFG02525</td><td></td></tr></tbody></table>

metylacja c w fazie stałej 11, oczyszczanie i formulacja do produkcji znaczników pet

Solid Phase 11C-Methylation, Purification and Formulation for the Production of PET Tracers

Rutynowa produkcja radioznaczników używanych w pozytonowej tomografii emisyjnej (PET) opiera się głównie na mokrej chemii, gdzie radioaktywny synton reaguje z nieradioaktywnym prekursorem w roztworze. Takie podejście wymaga oczyszczenia znacznika za pomocą wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC), a następnie przeformułowania w biokompatybilnym rozpuszczalniku do stosowania u ludzi. Niedawno opracowaliśmy nowatorskie podejście do metylacji 11C do wysoce wydajnej syntezy radiofarmaceutyków PET znakowanych węglem-11, wykorzystując wkłady w fazie stałej jako jednorazowe jednostki "3 w 1" do syntezy, oczyszczania i reformulacji znaczników. Takie podejście eliminuje stosowanie preparatywnej HPLC i zmniejsza straty znacznika w liniach przesyłowych i w wyniku rozpadu promieniotwórczego. Co więcej, technika oparta na kartridżach poprawia niezawodność syntezy, upraszcza proces automatyzacji i ułatwia spełnienie wymagań Dobrej Praktyki Produkcyjnej (GMP). Tutaj demonstrujemy tę technikę na przykładzie produkcji znacznika PET Pittsburgh związku B ([11C]PiB), złotego standardu w obrazowaniu in vivo blaszek amyloidowych w ludzkich mózgach.

Podsumowując typową radiosyntezę [1C]PiB, gazowy [1C]CH3OTf jest najpierw przepuszczany przez kartridż tC18 załadowany roztworem prekursora (Rysunek 1). Rozdział mieszaniny reakcyjnej przeprowadza się następnie poprzez sukcesywną elucję wodnymi roztworami etanolu w następujący sposób. Najpierw 12,5% EtOH eluje większość nieprzereagowanego [1C]CH3OTf oraz 6-OH-BTA-0, następnie 15% EtOH wypłukuje pozostałe ...

Informujemy o skutecznej technice radioznakowania węglem-11 w celu wytworzenia klinicznie istotnych znaczników dla pozytonowej tomografii emisyjnej (PET) przy użyciu wkładów do ekstrakcji do fazy stałej. 11Czynnik metylujący C przepuszcza się przez kartridż, który jest wstępnie załadowany prekursorem, a następująca po nim elucja za pomocą wodnego roztworu etanolu dostarcza chemicznie i radiochemicznie czyste znaczniki PET o wysokiej wydajności radiochemicznej.

Metylacja C w fazie stałej 11, oczyszczanie i formulacja do produkcji znaczników PET

Routine production of radiotracers used in positron emission tomography (PET) mostly relies on wet chemistry where the radioactive synthon reacts with a ...

Węgiel-11 jest jednym z najczęściej stosowanych izotopów promieniotwórczych w pozytonowej tomografii emisyjnej ze względu na jego obfitość w cząsteczki organiczne i krótki okres półtrwania wynoszący 20 minut. W tym filmie pokazujemy skuteczną technikę znakowania radioaktywnego węglem-11 przy użyciu wkładów ekstrakcyjnych do fazy stałej. W porównaniu z metodami konwencjonalnymi, techniki oparte na kartridżach eliminują stosowanie HPLC, skracają czas radiosyntezy, poprawiają niezawodność syntezy, upraszczają proces automatyzacji i ułatwiają przestrzeganie Dobrych Praktyk Produkcyjnych (GMP).Technika oparta na kartridżach została zademonstrowana na radiosyntezie C11 PiB, znacznika PET stosowanego do obrazowania in vivo blaszek amyloidowych w mózgach pacjentów cierpiących na chorobę Alzheimera. Niedawno zastosowaliśmy technikę "trzy w jednym" do radiosyntezy C11 ABP688, znacznika PET do obrazowania metabotropowych receptorów glutaminianu typu piątego, a także innych znaczników znakowanych węglem-11. Połączyć 450 mililitrów 0,2-molowego roztworu kwasu octowego z 50 mililitrami 0,2-molowego roztworu octanu sodu, aby przygotować bufor octanowy o pH 3,7 jako bufor pierwszy.Sprawdź pH buforu za pomocą pasków pH lub pH-metru. Następnie połącz 12,5 mililitra absolutnego etanolu z 87,5 mililitrami buforu octanowego w 100-mililitrowej butelce, aby uzyskać 12,5% wodny roztwór etanolu jako mycie. Połącz 15 mililitrów absolutnego etanolu z 85 mililitrami buforu octanowego w 100-mililitrowej butelce, aby uzyskać 15% wodny roztwór etanolu jako płukanie dwa.Połącz pięć mililitrów absolutnego etanolu z pięcioma mililitrami buforu octanowego, aby uzyskać 50% wodny roztwór etanolu jako końcowy eluent i pobrać 2,5 mililitra tego roztworu do 10-mililitrowej strzykawki. Aby wstępnie przygotować wkład tC18, od strony żeńskiej użyj strzykawki, aby przepuścić 10 mililitrów wody, a następnie pięć mililitrów acetonu przez wkład. Wysuszyć wkład strumieniem azotu w ilości 50 mililitrów na minutę przez jedną minutę.W probówce Eppendorfa rozpuść dwa miligramy prekursora 6-OH-BTA-0 w jednym mililitrze bezwodnego acetonu. Trzymając w dół precyzyjną szklaną strzykawkę o pojemności 250 mikrolitrów z końcówką Luer, należy pobrać 100 mikrolitrów roztworu prekursora, a następnie 50 mikrolitrów poduszki powietrznej. Wyjąć igłę i postukać w strzykawkę, aby upewnić się, że poduszka powietrzna znajduje się nad roztworem w strzykawce.Nanieść roztwór prekursora na wkład tC18 od strony żeńskiej, powoli wciskając tłok do samego dołu. Nie popychaj powietrza dalej. Zabezpiecz i zamontuj standardowy pięcioportowy rozdzielacz jednorazowy na module syntezy.Port pierwszy ma dwie pozycje. Podłącz wlot poziomy do automatycznego dozownika wyposażonego w strzykawkę o pojemności 20 mililitrów. Podłącz pionowy wlot do butelki z myciem.Podłącz wyjście modułu, który wytwarza triflat metylu C11, do drugiego portu kolektora. Zainstaluj kartridż tC18 załadowany prekursorem 6-OH-BTA-0 między portami trzecim i czwartym. Port piąty ma dwie pozycje.Podłącz poziomy wylot do butelki na odpady, a pionowy wylot do sterylnej fiolki w celu pobrania znacznika przez sterylny filtr. W gorącym ogniwie osłoniętym ołowiem użyj linii teflonowej, aby dostarczyć triflate metylu C11 do kolektora przez port drugi i przepuścić go przez załadowany wkład tC18 przy przepływie wyjściowym 20 mililitrów na minutę. Moduł triflatu metylu C11 reguluje przepływ przez porty trzeci i czwarty do butelki na odpady.Gdy cała radioaktywność zostanie przeniesiona i uwięziona we wkładzie tC18, zgodnie z monitorem detektora radioaktywności, zatrzymaj przepływ gazu, zamykając port drugi. Pozostaw wkład na dwie minuty, aby zakończyć reakcję. Następnie, przez port pierwszy, pobrać 19 mililitrów roztworu Wash One z butelki o pojemności 100 mililitrów do strzykawki z dozownikiem w tempie 100 mililitrów na minutę.Dozować 18,5 mililitra roztworu do mycia z dozownika przez wkład tC18 przez porty trzeci i czwarty i do butelki na odpady z prędkością 50 mililitrów na minutę. Upewnij się, że w kolektorze nie ma pęcherzyków powietrza, ponieważ mogą one zmniejszyć skuteczność separacji. Powtórz pobieranie i dozowanie cztery razy z 18,5 mililitrami mycia jednym roztworem za każdym razem i całkowitą objętością 92,5 mililitra przechodzącym przez tC18.Przełącz linię wejściową na porcie pierwszym z prania pierwszego na pranie drugie. Powtórz pobieranie i dozowanie trzy razy z 18,5 mililitrami roztworu do mycia za każdym razem i całkowitą objętością 55,5 mililitra przechodzącego przez tC18. Przełączyć zawór piąty w kierunku ostatniej fiolki.Odłącz przewód od dozownika i podłącz go do 10-mililitrowej strzykawki zawierającej 2,5 mililitra końcowego roztworu eluentu i 7,5 mililitra powietrza. Trzymając strzykawkę w dół, ręcznie wepchnąć końcowy roztwór eluentu, a następnie powietrze przez wkład tC18 przez porty trzeci i czwarty oraz do sterylnej fiolki w celu pobrania znacznika przez sterylny filtr. Zmienić strzykawkę na strzykawkę zawierającą 10 mililitrów sterylnego buforu fosforanowego i przepchnąć całą objętość przez wkład tC18 do sterylnej fiolki.Odłączyć strzykawkę i przepłukać przewód 10 mililitrami powietrza za pomocą tej samej strzykawki. Za pomocą strzykawki o pojemności jednego mililitra należy pobrać próbki do procedur kontroli jakości przed zwolnieniem, testu endotoksyn bakteryjnych i testu sterylności. Aby przeprowadzić procedury kontroli jakości przed zwolnieniem, należy najpierw określić tożsamość radiochemiczną, czystość radiochemiczną, czystość chemiczną i aktywność molową znacznika za pomocą analitycznego systemu HPLC wyposażonego w detektory radioaktywności UV i kolumnę z odwróconymi fazami.Określ czasy retencji 6-OH-BTA-0 i 6-OH-BTA-1 i skalibruj przyrząd w celu ilościowego określenia zawartości każdego związku. Oznaczyć zawartość pozostałości rozpuszczalnika za pomocą analitycznego systemu chromatografii gazowej wyposażonego w kolumnę kapilarną. Określić czasy retencji acetonu i etanolu oraz skalibrować przyrząd w celu ilościowego określenia zawartości każdego rozpuszczalnika.W badaniu tym przeprowadzono radiosyntezę C11 PiB przez metylację C11 prekursora 6-OH-BTA-0 z triflatem metylu C11. Kontrola jakości analitycznego HPLC C11 PiB wykazuje, że czystość radiochemiczna wynosiła 98% Czasy retencji prekursora 6-OH-BTA-0 i piku znacznika 6-OH-BTA-1 na chromatogramie UV wynosiły odpowiednio 3,6 i 5,9 minuty. Analiza śladu UV wykazała resztkowe stężenie prekursora poniżej dopuszczalnego limitu 1,3 mikrograma przy braku innych zanieczyszczeń nieradioaktywnych.Oznacza to, że czystość radiochemiczna i chemiczna znacznika jest akceptowalna w klinicznych badaniach PET. Zwiększenie ilości prekursora 6-OH-BTA-0 z 0,1 miligrama do 0,3 miligrama poprawiło wydajność radiochemiczną z 18,1% do 32,1% kosztem nieco większej ilości prekursora w produkcie końcowym. Technika ta powinna mieć zastosowanie do wielu różnych systemów z odpowiednią różnicą w polarności między prekursorem a produktem znakowanym radioizotopowo.Wszystkie manipulacje z udziałem izotopów promieniotwórczych muszą być wykonywane w gorącej komorze osłoniętej ołowiem przez personel odpowiednio przeszkolony w zakresie obchodzenia się z materiałami promieniotwórczymi.

solid-phase-11c-methylation-purification-formulation-for-production

Research

JoVE Journal

Chemistry

Chemia

Demonstrujemy półautomatyczną syntezę radiochemiczną [18F]3F4AP i procedury kontroli jakości.

Zautomatyzowana synteza radiochemiczna [18F]3F4AP: nowy znacznik PET do obrazowania chorób demielinizacyjnych

Miejsca obrazowania pozytonowej tomografii emisyjnej (PET), które biorą udział w wielu wczesnych badaniach klinicznych, wymagają solidnych i wszechstronnych możliwości produkcji radioznaczników. Na przykładzie radioznacznika [18F] Klofarabiny ilustrujemy, jak zautomatyzować syntezę radioznacznika za pomocą elastycznego radiosyntezatora opartego na kasecie i zwalidować syntezę do użytku klinicznego.

Automatyzacja protokołu syntezy radioznacznika metodą pozytonowej tomografii emisyjnej (PET) do produkcji klinicznej

Tutaj reprezentujemy protokół do w pełni zautomatyzowanego znakowania radioaktywnego [11C]SNAP-7941 i analizy kinetyki w czasie rzeczywistym tego znacznika PET na komórkach wykazujących ekspresję i nieeksprymujących P-gp.

Techniczny aspekt automatycznej syntezy i oceny kinetycznej w czasie rzeczywistym [11C]SNAP-7941

Synteza radiofarmaceutyków znakowanych fluorem-18 (18F) do pozytonowej tomografii emisyjnej zazwyczaj wymaga miesięcy doświadczenia. Po włączeniu do radioznacznika, motyw akceptora krzemowo-fluorkowego (SiFA) umożliwia prosty protokół znakowania 18F, który jest niezależny od kosztownego sprzętu i szkolenia przygotowawczego, przy jednoczesnym zmniejszeniu ilości potrzebnego prekursora i wykorzystaniu łagodniejszych warunków reakcji.

Rozdział 18Znakowanie F radioznaczników funkcjonalizowanych akceptorem fluorku krzemu (SiFA) do pozytonowej tomografii emisyjnej

Tutaj opisujemy radiosyntezę 1-(2-[18F]Fluoroetylo)-L-tryptofanu, środka do obrazowania metodą pozytonowej tomografii emisyjnej do badania metabolizmu tryptofanu, przy użyciu jednogarnkowej, dwuetapowej strategii w systemie syntezy radiochemicznej o dobrych wydajnościach radiochemicznych, wysokim nadmiarze enancjomerycznym i wysokiej niezawodności.

Radiosynteza 1-(2-[18F]fluoroetylo)-L-tryptofanu przy użyciu jednogarnkowego, dwuetapowego protokołu

Ten artykuł opisuje radiosyntezę, formułowanie, kontrolę jakości nowej sondy znakowanej radioaktywnie (tj. nanoniki NM-02 znakowanej 68Ga) oraz jej zastosowanie do obrazowania PET/CT małych zwierząt w modelu ksenoprzeszczepu.

Radiosynteza, kontrola jakości i obrazowanie pozytonowej tomografii emisyjnej małych zwierząt 68nanocząsteczek znakowanych Ga

Ten protokół przedstawia szczegółową procedurę przygotowania czterech radioznaczników węgla-11 za pomocą "metody pętlowej" [11C]metylacji. Opisujemy procedurę syntezy [11C]ER-176, z danymi dla trzech dodatkowych radioznaczników: [11C]MRB, [11C]mHED i [11C]PiB. Metoda pętlowa zapewnia wydajną syntezę ze zwiększoną wydajnością radiochemiczną w porównaniu z tradycyjną metylacją naczynia reakcyjnego [11C].

Zwiększenie wydajności i wydajności znakowania radioligandów węgla-11 w badaniach klinicznych z wykorzystaniem metody pętli

Opisano metodę oznaczenia kwasowości w fazie gazowej oligopeptydów zawierających cysteinę. Eksperymenty przeprowadzono przy użyciu potrójnego spektrometru mas kwadrupolowego. Względną kwasowość peptydów zmierzono za pomocą eksperymentów dysocjacji indukowanej zderzeniowo, natomiast kwasowość ilościową wyznaczono z zastosowaniem rozszerzonej kinetycznej metody Cooksa.

Oznaczanie kwasowości w fazie gazowej oligopeptydów

Biofizyczne i biochemiczne badania interakcji między domenami białek osadzonych w błonie napotykają wiele wyzwań technicznych, z których pierwszym jest uzyskanie odpowiedniego materiału do badań. W artykule opisano protokół wytwarzania i oczyszczania stabilizowanych dwusiarczkiem transbłonowych kompleksów peptydowych, które nadają się do analizy strukturalnej za pomocą roztworu magnetycznego rezonansu jądrowego (NMR) i innych zastosowań analitycznych.

Wytwarzanie stabilizowanych dwusiarczkiem transbłonowych kompleksów peptydowych do badań strukturalnych

Opisano metody cienkowarstwowej chromatografii (TLC) separacji ekstraktów roślinnych i kontaktowej bioautografii w celu identyfikacji metabolitów przeciwbakteryjnych. Metody te stosuje się do badań przesiewowych związków fenolowych koniczyny czerwonej hamujących bakterie wytwarzające hiperamoniak (HAB) pochodzące ze żwacza bydła.

Separacje metodą chromatografii cienkowarstwowej (TLC) i testy biologiczne ekstraktów roślinnych w celu identyfikacji związków przeciwdrobnoustrojowych

Poznaj efektywną technikę radiomarkowania węglem-11 z użyciem kartridży ekstrakcji na fazie stałej do produkcji znaczników PET. Metoda skraca czas syntezy, eliminuje potrzebę stosowania HPLC i ułatwia zgodność z GMP.

Metylacja C w fazie stałej ¹¹, oczyszczanie i formulacja do produkcji znaczników PET

Przeglądaj więcej filmów