Indukcja rozlanego aksonalnego uszkodzenia mózgu u szczurów na podstawie przyspieszenia obrotowego

Urazowe uszkodzenie mózgu jest jedną z głównych przyczyn śmierci i niepełnosprawności. Rozlane uszkodzenie aksonalne mózgu to rozległe uszkodzenie aksonów rozwijające się po TBI. W niniejszej pracy chciałbym przedstawić nasz model indukcji rozlanego aksonalnego uszkodzenia mózgu w oparciu o wynik mechanizmu przyspieszenia obrotowego TBI.

Wybierz dorosłe samce szczurów Sprague-Dawley o wadze od 300 do 350 gramów. Zapewnij szczurom karmę i wodę ad libitum. Wykonaj wszystkie eksperymenty między 6:00 a 12:00. Urządzenie zostało umieszczone na ciężkim, stabilnym stole laboratoryjnym.

Urządzenie składa się z następujących elementów: cylindra, żelaznego ciężarka, mechanizmu obrotowego składającego się z cylindrycznej rurki i kołków mocujących głowicę. Ciężar jest przymocowany do sznurka i podniesiony na wysokość 120 centymetrów. Swobodnie spadający ciężar uderza w uruchamiając mechanizm obrotowy.

Urządzenie do bocznego obracania głowy szczura służyło do szybkiego obracania głowy od zera do 90 stopni. Po indukcji, rozlanym aksonalnym uszkodzeniu mózgu, szczur został przeniesiony do sali pooperacyjnej. F oznacza siłę przyłożoną do głowy zwierzęcia w kilogramach.

Duża litera M to moment siły, K to energia kinetyczna. Małe m to masa spadającego ciężaru, g to przyspieszenie grawitacyjne, h to wysokość w centymetrach, a D to odległość między szpilkami do uszu w centymetrach. Do oceny deficytu neurologicznego i deficytów modelu oceny użyliśmy oceny nasilenia neurologicznego u szczurów.

Oceniamy mobilność, porażenie połowicze, zadanie chodzenia po belce, niepowodzenie w zadaniu chodzenia po belce. Awaria zadania równoważenia belki o szerokości 1,5 centymetra. Stabilność i wyważenie belki, wysiłek na balansie belki o szerokości 1,5 centymetra i refleksy.

48 godzin po urazie wszystkie szczury, grupa urazowa i kontrolna, zostały głęboko znieczulone i transkardiowo perfuzjowane 0,9% heparynizowaną solą fizjologiczną, a następnie 500 mililitrami 4% formaldehydu w 0,1 M buforze fosforanowym soli fizjologicznej. Po perfuzji wykonano dekapitację, a mózgi natychmiast usunięto, a następnie utrwalono w 4% roztworze formaldehydu na 48 godzin. Mózgi zostały następnie zablokowane w pięciomilimetrowych odcinkach koronalnych od powierzchni opuszki węchowej do kory wzrokowej, podczas gdy móżdżek i pnie mózgu zostały wypreparowane.

Po zatopieniu parafiny ze wzgórza wykonano skrawki czołowe i strzałkowe. Wytwarzanie barwienia immunochemicznego białka prekursorowego beta-amyloidu. Na schemacie pokazane są różne grupy szczurów w różnym czasie.

Rozlane aksonalne uszkodzenie mózgu na początku eksperymentu. W czasie 48 godzin zbadano Neurological Severity Score. W czasie 48 godzin barwienie immunochemiczne beta-APP przeprowadzono we wszystkich dwóch grupach.

Zilustrowany deficyt neurologiczny 48 godzin po rozlanym aksonalnym uszkodzeniu mózgu dla dwóch badanych grup. Test Manna-Whitneya wykazał, że deficyt neurologiczny był znacznie większy u 15 szczurów z rozlanym aksonalnym uszkodzeniem mózgu w porównaniu z 15 szczurami naiwnymi po 48 godzinach od interwencji. Reprezentatywne mikrofotografie ujawniające immunoreaktywność aksonalną i neuronalną po izolowanym rozlanym aksonalnym uszkodzeniu mózgu u szczurów 48 godzin po urazie.

Mniejsze ciągi komórkowe są wykrywane za pomocą białka prekursorowego beta-amyloidu. W grupie pozorowanej nie został wykryty. W naszej pracy opracowaliśmy prosty, powtarzalny i niezawodny nowy model rozlanego aksonalnego uszkodzenia mózgu oparty na mechanizmie przyspieszenia obrotowego.

Taki model umożliwi lepsze zrozumienie patofizjologii rozlanego aksonalnego uszkodzenia mózgu i opracowanie skuteczniejszych metod leczenia. Bardzo dziękuję państwu za uwagę.